牵牛全草的化学成分研究

从牵牛全草(Pharbitis nilChoisy)乙酸乙酯提取物中分离得到十个化合物。据理化性质和光谱分析鉴定其结构为:顺式阿魏酸酰对羟基苯乙胺(1),对羟基桂皮酸酰对羟基苯乙胺(2),阿魏酸酰对羟基苯乙胺(3),顺式对羟基桂皮酸酰对羟基苯乙胺(4),桂皮酸酰对羟基苯乙胺(5),对羟基苯乙胺(6),7-羟基香豆素(7),6-甲氧基-7-羟基香豆素(8),尿嘧啶(9),β-谷甾醇葡萄糖苷(10)。化合物1～9均为首次从该植物中得到。

牵牛全草的化学成分研究(Ⅱ)

目的:研究牵牛全草Pharbitis nil(L.)Choisy的化学成分。方法:用无水乙醇浸泡后浓缩得到的浸膏分别用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取,萃取物使用柱层析、HPLC制备、重结晶等方法对牵牛全草乙醇提取物进行分离纯化,依据理化性质和光谱分析鉴定各单体化合物结构。结果:从牵牛全草乙醇提取物的醋酸乙酯和正丁醇部分分离得到10个化合物,分别为:2-甲氧基对苯二酚-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1),红景天苷(2),(6S,9R)-roseoside(3),ampelopsisionoside(4),尿嘧啶(5),尿嘧啶核苷(6),顺式阿魏酸酰对羟基苯乙胺(7),对羟基桂皮酸酰对羟基苯乙胺(8),阿魏酸酰对羟基苯乙胺(9),胡萝卜苷(10)。结论:化合物1～4,6为首次从该植物中分离得到。

GC法同时测定牵牛子脂肪油中5种脂肪酸

目的测定牵牛子脂肪油中的棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸。方法采用毛细管气相色谱法,对被测成分甲酯化后测定。色谱柱为DB-Wax毛细管柱(30 m×0.25 mm,0.25μm);检测器为FID;程序升温,起始温度170℃,以10℃/min升至230℃后,保持5 min;分流比15∶1。结果棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸质量浓度分别在0.04～0.57 mg/mL(r=0.999 6)0,.01～0.18 mg/mL(r=0.999 6),0.02～0.35 mg/mL(r=0.999 8),0.05～0.82 mg/mL(r=0.999 7)0,.004～0.06 mg/mL(r=0.999 4)范围内,与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=9)分别为98.5%,96.4%,97.2%9,8.2%9,5.7%。结论本法简便、准确,重复性好,可用于牵牛子脂肪油的质量控制。

黑丑提取物的体内外抗肿瘤活性及其初步机制

目的探讨黑丑提取物的抗肿瘤活性,并对其作用机理进行研究。方法应用MTT法考察黑丑提取物在体外对人肝癌细胞BEL-7402、结肠癌细胞HCT-8、肺癌细胞A-549的细胞毒效应。为明确其体内抗肿瘤疗效,建立了Lew is肺癌的小鼠模型,通过对比各组小鼠的相对肿瘤增殖率、肿瘤生长曲线、抑瘤率、瘤重等指标考察黑丑提取物的抑瘤效果。通过G-四链体的稳定性实验,初步探讨了黑丑的抗肿瘤作用机制。结果黑丑提取物在体外对上述3种肿瘤细胞均具有抑制作用,对人肺癌细胞A-549的IC50值为30.19μg/ml。在体内的抗肿瘤药效实验中亦表现出明显的抗肿瘤活性,且其可有效稳定G-四链体结构。结论黑丑提取物在体内外均具有明显的抑瘤作用,并可通过稳定G-四链体结构进而抑制肿瘤细胞的端粒酶活性,最终导致肿瘤细胞凋亡。

海水胁迫对牵牛种子萌发的影响

利用不同浓度的海水处理牵牛种子,观察、分析海水胁迫对牵牛种子萌发的影响。结果表明,30%浓度(体积分数,下同)以下的海水对牵牛种子的发芽率影响不大,当海水浓度达到50%时牵牛种子的发芽率仍有85%;发芽势、发芽指数和活力指数三项指标在10%的海水浓度时基本达到最大,而活力指数在海水浓度为20%时仍超过对照,并且差异显著。试验结果表明,牵牛种子发芽对20%浓度以下的海水具有较强的抗胁迫能力。

裂叶牵牛地上部分挥发油化学成分与生物活性研究

目的研究裂叶牵牛地上部分挥发油的化学成分及其生物活性。方法采用超临界CO2萃取法,得到裂叶牵牛地上部分中的挥发油,并通过气相色谱-质谱联用法(GC-MS)分析其化学成分;研究挥发油对肿瘤细胞MGC-803和A549体外增殖抑制活性,及其抗氧化活性。结果裂叶牵牛地上部分挥发油中已鉴定出的组分占挥发油总量的91.43%,主要成分有1-碘十八烷(29.71%)、二十九烷(17.02%)、亚麻酸(9.91%)等;裂叶牵牛地上部分挥发油质量浓度在200μg/mL时,自由基清除率为29.3%,对肿瘤细胞MGC-803和A549体外增殖的抑制率分别为55.6%和57.4%。结论裂叶牵牛地上部分挥发油没有表现出较好的抗氧化活性,但对肿瘤细胞MGC-803和A549的体外增殖具有一定的抑制作用。

巴豆牵牛子配伍的研究

巴豆与牵牛配伍前后的部分药理研究结果表明：合用后泻下作用增强，抗炎作用减弱，免疫功能降低，对胃粘膜的损伤加重，体重减轻，死亡率增加，对理化刺激的反应性降低，对血液的影响不明显。提示在该实验条件下，两药配伍属“相恶”或“相反”范畴，为其属配伍禁忌提供了一定的科学依据。

牵牛花粉表面蛋白SDS-PAGE分析

花粉表面蛋白在植物自交亲和反应中起着重要作用。为了探讨植物自交亲和性分子机制,以裂牵牛的花粉和柱头为材料,对其花粉表面蛋白和柱头表面蛋白进行了SDS-PAGE分析,通过对比不同的提取方式获得的花粉表面蛋白的电泳谱带,获得了最佳的样品提取方法。通过分析花粉和柱头表面蛋白的电泳波谱发现,花粉表面蛋白和柱头表面蛋白的电泳谱带中有2条共同的蛋白带,推断这2条谱带可能与花粉的识别反应有关。为了证明SDS-PAGE电泳获得的信息是来自花粉表面的蛋白,而不是来自花粉吸水涨裂后花粉原生质蛋白,对水浸提后的牵牛花粉粒进行显微镜观察,发现很少有破裂的花粉粒,进一步确定了传粉受精过程中是花粉表面蛋白与雌蕊组织间的识别反应。

炎清舒体外抗菌试验

体外抗菌试验结果表明乙型溶血性链球菌对炎清舒搽剂高度敏感；对绿脓杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌中度敏感；金黄色葡萄球菌低度敏感；大肠杆菌、变形杆菌不敏感。

野生大花牵牛变异植株快速繁殖的研究

以花期长的野生大花牵牛生长点为试材,进行了生长点的生长和分化、试管苗的生根和生根继代培养、试管苗的移植的研究,建立起野生大花牵牛生长点的快速繁殖技术。结果证明:1/2MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA是生长点生长培养的理想培养基;MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA是生长芽分化培养和分化继代的理想培养基;1/2MS+0.1 mg/L IBA是试管苗生根和生根继代培养的理想培养基。试管苗在温室营养钵的河沙中易移栽成活,移植成活的试管苗长势旺盛,并保持了花期长的有利变异性状。

牵牛子不同提取物对小鼠急性毒性的比较研究

目的:探讨中药牵牛子石油醚、氯仿、正丁醇提取物对小鼠急性毒性。方法:制备牵牛子石油醚、氯仿、正丁醇提取物,采用急性毒性替代法-上下法进行毒性比较。结果:牵牛子石油醚、氯仿、正丁醇提取物均不同程度表现出了急性毒性症状,按生药量计算的半数致死量(LD50)分别是455g/kg,32g/kg,9g/kg。结论:牵牛子不同提取物对小鼠的急性毒性强度为正丁醇部位>牵牛子氯仿部位>石油醚部位。

植物细胞吸收镉的机理及镉对植物气孔发育的影响

镉(Cd)是对动植物有严重危害的一种重金属,但关于它如何进入细胞以及它对植物发育影响的研究很少。通过观察Cd暴露下的3种植物——凤仙花、牵牛花、紫茉莉的生长状况,用台盼蓝染根细胞核和通过叶表皮造模技术观察气孔变化,初步研究了Cd进入细胞的可能途径,提出了Cd进入植物体内的细胞模型,并观察了Cd对气孔发育的影响。结果表明:Cd环境暴露下,用台盼蓝染色凤仙花的根可使其根毛细胞核染色,而对照不被染色。根据三种植物在Cd暴露条件下的生长状况和植株死亡时的表现,提出了Cd进入细胞的模型:Cd首先与细胞膜上的蛋白质结合,使细胞膜上形成可以允许Cd2+或其他离子进出细胞的孔,Cd通过扩散进入细胞;与膜蛋白结合的Cd为可逆结合,依据Cd浓度形成平衡。Cd影响气孔的开闭和发育。当Cd浓度变化时,气孔闭合率也发生变化。在叶子的发育中,如果有Cd的存在,气孔的发育偏离原有的进程,牵牛花叶子的副卫细胞消失,同时气孔数量减少。对Cd敏感的凤仙花的气孔密度严重减少,紫茉莉和牵牛花气孔则少量减少。同时叶表皮细胞壁的弯曲形状也发生较大变化,表皮细胞也明显变小。

牵牛E3泛素连接酶PNRma1基因的克隆及抗旱相关性分析

为研究牵牛E3泛素连接酶对其干旱胁迫的响应情况,利用RT-PCR技术从牵牛中克隆得到1个E3泛素蛋白连接酶基因PNRma1的cDNA全长序列,其序列长度为734bp,编码244个氨基酸。对牵牛PNRma1蛋白进行二级结构预测,结果表明该蛋白主要由α螺旋(41.88%)和无规则卷曲(37.18%)构成,并且牵牛PNRma1蛋白与野生潘那利番茄的同源性最高(相似度为94%)。在干旱胁迫处理下,PNRma1基因在牵牛根部的表达量总体上与对照相比呈现上升后下降的趋势,其在叶片中表达水平呈现后期上升趋势,试验结果表明,PNRma1基因响应牵牛的干旱胁迫反应,并且在根部(6h)早于叶片(9h)应答干旱信号。

牵牛花对石油污染盐碱土壤微生物群落与石油烃降解的影响

利用磷脂脂肪酸(PLFAs)生物标记法分析野生型牵牛花(Pharbitis nil(Linn.)Choisy)根际土壤微生物群落结构,探讨牵牛花生长对石油烃污染土壤微生物群落与石油烃降解的影响.结果表明,供试土壤微生物群落中,先后出现了24种PLFAs,包括标记细菌的饱和脂肪酸(SAT)、革兰氏阳性菌(G+)的末端支链饱和脂肪酸(TBSAT)、革兰氏阴性菌(G-)的单不饱和脂肪酸(MONO)和环丙脂肪酸(CYCLO)、真菌的多不饱和脂肪酸(PUFA)和放线菌的中间型支链饱和脂肪酸(MBSAT)等六大类型.PLFAs的主成分分析(PCA)表明,牵牛花根际与对照组(未种牵牛花,CK)土壤微生物群落具有明显的差异,微生物多样性在春季增加83%、夏季增加140%、秋季增加50%;微生物的生物量在春季增加97.6%,夏季增加116.3%,秋季增加60.3%.牵牛花根际与对照组相比土壤中石油烃降解率明显提高,在春、夏、秋季分别提高了7.5%、34.2%和19.7%;并且,在牵牛花生长的不同季节石油烃的降解率有明显的差异,春季为22.3%,夏季为51.8%,秋季为38.0%.相关性分析表明,石油烃降解与土壤微生物总生物量具有中等程度的相关性(|r|=0.75);与G+细菌、甲烷氧化菌的生物量具有高度相关性,相关系数|r|>0.8;与G-的生物量具有中度相关性,相关系数为|r|=0.74;与真菌的生物量具有低度相关性,相关系数为|r|=0.36,与放线菌没有相关性,相关系数为|r|<0.30.

基于DNA条形码技术探讨中药牵牛子的基原物种问题

目的对中药材牵牛子的基原物种问题进行探讨,以确保药材来源的准确及临床疗效的稳定。方法以核基因片段ITS2序列及叶绿体基因间隔区序列psbA-trnH作为DNA条形码,对研究材料进行PCR扩增并双向测序,所得序列经CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA6.0进行相关数据分析,并构建NJ(邻接)树。结果圆叶牵牛、牵牛及裂叶牵牛ITS2序列种内遗传距离为0,没有遗传差异,而圆叶牵牛与牵牛、裂叶牵牛遗传距离均为0.106,牵牛与裂叶牵牛之间遗传距离为0.018。psbA-trnH序列比对后,牵牛、裂叶牵牛与圆叶牵牛样品间序列完全相同,无碱基差异。结论牵牛和裂叶牵牛亲缘关系密切,但基于两者间稳定的形态差异及遗传变异,不适宜简单处理为同一物种,可作为变种关系或近期分化的近缘物种。ITS2序列作为DNA条形码可为有效解决牵牛子基原物种问题提供重要依据。