忍冬木层孔菌醇提物对肝纤维化大鼠肝星状细胞的影响

目的:研究忍冬木层孔菌醇提物抗肝纤维化的机制。方法:用2 m L/kg CCl4橄榄油溶液对大鼠腹腔注射制备肝纤维化模型。第1次注射后,给药组分别灌胃剂量相当于忍冬木层孔菌生药量1、0.5 g/kg的乙醇提取物,1次/d,共给药8 w。给药结束后,测定各组大鼠血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、肝组织的总抗氧化能力(TAOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;免疫组化测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的表达。结果:与模型组比较,忍冬木层孔菌醇提物能降低模型大鼠血清中TGF-β1含量;升高肝组织T-SOD的活性及T-AOC水平,降低MDA含量;下调肝组织中α-SMA的表达,上调MMP-1的表达并下调TIMP-1的表达。结论:忍冬木层孔菌具有良好的抗氧化能力,具有防治肝纤维化的应用前景。其机制可能与抑制由氧化应激引发的肝星状细胞激活,并降低TGF-β1等激活肝星状细胞的细胞因子,上调促进胶原降解的MMP-1表达有关。

忍冬木层孔菌化学成分研究

目的:研究忍冬木层孔菌的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及反相柱色谱进行分离纯化,并运用波谱方法对化合物进行结构鉴定。结果:从忍冬木层孔菌中共分离得到了6个化合物,分别鉴定为:麦角甾醇过氧化物(1)、麦角甾醇(2)、香草醛(3)、3,4-二羟基苄叉丙酮(4)、β-谷甾醇(5)和正二十二烷酸(6)。结论:以上化合物均为首次从忍冬木层孔菌中分离得到,其中,化合物4为新天然产物。

忍冬木层孔菌醇提物雌激素样作用研究

目的：研究忍冬木层孔菌醇提物的雌激素样作用,为寻找安全有效的雌激素替代药物提供依据。方法：采用细胞增殖实验评价忍冬木层孔菌醇提物的体外雌激素样作用和抗雌激素作用;检测忍冬木层孔菌提取物对雌性幼鼠、去势雌性大鼠血清中雌二醇（E2）、孕酮（P）含量及成年雌性大鼠子宫雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）表达,并考察其对成年雌性大鼠子宫、卵巢及乳腺组织病理学的影响。结果：细胞增殖实验显示,忍冬木层孔菌醇提物在5~50μg/m L时能刺激MCF-7细胞增殖,具有雌激素样作用;在10~100μg/m L时能降低E2诱导的MCF-7细胞增殖,具有抗雌激素作用。体内实验表明300 mg/kg忍冬木层孔菌醇提物能增加雌性幼鼠血清E2含量,促进初生雌性幼鼠子宫发育;忍冬木层孔菌醇提物240 mg/kg可增加去势雌鼠血清E2、P含量,改善因雌激素缺乏而导致的子宫萎缩。120 mg/kg忍冬木层孔菌醇提物可增加正常成年雌性大鼠血清P含量,120、240 mg/kg忍冬木层孔菌醇提物可以增加正常雌性成年大鼠血清E2含量并能调节成年雌性大鼠子宫ERα、ERβ表达。病理检查显示,忍冬木层孔菌醇提物对大鼠子宫、卵巢、乳腺等组织病理学无明显影响。结论：忍冬木层孔菌具有雌激素样作用,无明显不良反应,具有替代雌激素应用的前景。

忍冬木层孔菌总酚通过调控肥大细胞抗四氯化碳所致大鼠肝纤维化

探讨忍冬木层孔菌总酚(Phellinus lonicerinus total phenolics,PLTP)调控肥大细胞(Mast Cell,MC)改善四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的作用.将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(0.2mg/kg)、PLTP低剂量组(250mg/kg)、PLTP高剂量组(500mg/kg),每组10只.除正常组注射橄榄油外,其余各组腹腔注射2mL/kg 50%CCl4橄榄油溶液,2次/w,共8w.首次注射后各给药组每天灌胃对应剂量的药物,正常组与模型组灌胃相应体积的生理盐水,1次/d,共8w.末次给药后禁食24h,取大鼠血和肝脏,检测血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)及透明质酸(haluronic acid,HA)、Ⅲ型前胶原(procollagen typeⅢ,PCⅢ)、Ⅳ型胶原(typeⅣcollagen,Ⅳ-C)的含量;免疫组化测定α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)的表达量,同时切片观察肝脏组织学变化及肥大细胞的数量及脱颗粒变化.结果显示,与模型组比较,PLTP能降低大鼠血清AST、ALT及ALP的活性,降低血清中HA、PCⅢ、Ⅳ-C的含量;病理学检查结果表明PLTP能明显减轻CCl4引起的大鼠肝损伤及纤维化;甲苯胺蓝染色(TB)可见CCl4模型组大鼠肝脏血管周围及纤维间隔内大量正在脱颗粒和已经脱颗粒的充满蓝紫色颗粒的MC,MC数目较正常组明显升高,PLTP组MC数量明显减少.同时,免疫组织化学染色结果显示PLTP下调肝组织中α-SMA的表达.综上,PLTP对CCl4致大鼠肝纤维化有防治作用,其作用机制可能与减少MC的数量及其脱颗粒、下调肝组织中α-SMA的表达有关.

忍冬木层孔菌液体培养物的化学成分研究

忍冬木层孔菌(Phellinus lonicerinus(Bond.)Bond.et Sing)为湖北等地习用的桑黄品种,也是土家族常用药。对忍冬木层孔菌液体培养物的化学成分及其体外抗肿瘤活性进行研究。通过硅胶柱色谱、SephadexLH-20柱色谱及半制备型HPLC等色谱分离技术从忍冬木层孔菌发酵液及菌丝体中分离得到10个化合物,经核磁共振,质谱等现代波谱学技术将它们的结构分别鉴定为环(L-缬-L-脯)二肽(1)、环(L-亮-L-脯)二肽(2)、环(L-异亮-L-脯)二肽(3)、环(L-丙-L-脯)二肽(4)、麦角甾醇(5)、麦角甾-7,22-二烯-3,6-二酮(6)、过氧麦角甾醇(7)、苯乙酸(8)、对羟基苯甲醛(9)和4-羟基苯乙酸(10)。除化合物5、6和7外,其余7个化合物均为首次从该真菌中分离得到。体外细胞毒活性显示化合物1~4对胃癌细胞株HGC-27和子宫内膜癌细胞株RL95-2有不同程度的抑制活性,其中化合物3抑制活性最强,对HGC-27和RL95-2的IC_(50)分别为6.69μM和12.81μM。

忍冬木层孔菌总酚的HPLC分离及其指示性成分分析

对忍冬木层孔菌总酚主要成分进行了分析,为进一步控制总酚质量提供依据.用95%乙醇提取总酚,经大孔树脂吸附,乙醇洗脱制备忍冬木层孔菌总酚,利用高效液相色谱制备主要成分,采用普鲁士蓝紫外-可见分光光度法测定酚含量,用高效液相色谱测定主要成分含量.结果表明总酚中酚的含量达到63.35%,从总酚中分离鉴定原儿茶酸,3,4-二羟基苄叉丙酮两种主要成分,总酚中原儿茶酸的含量为13.1%,3,4-二羟基苄叉丙酮的含量为12.2%.所制备的忍冬木层孔菌总酚符合有效部位质量要求,总酚中原儿茶酸和3,4-二羟基苄叉丙酮均具有抗肿瘤等药理活性,可作为总酚的指示性成分.

榆生拟层孔菌粗多糖四种提取方法的比较研究

本试验以榆生拟层孔菌(Fomitopsis ulmaria(Sor.:Fr.)Bond.et Sing)为研究对象,通过水提醇沉法、碱提取法、微波辅助法和热水浸提法进行榆生拟层孔菌粗多糖提取方法的比较研究。结果用差异显著性检验得出热水浸提法提取率最高,且较其它方法的提取率差异极显著;热水浸提法、碱提取法、微波辅助法、水提醇沉法的提取率分别为14.494%、11.586%、11.483%、7.673%。从粗多糖的提取率、提取成本以及操作难易程度等综合考虑,最佳提取方法为热水浸提法。

榆生拟层孔菌母种培养基筛选试验

本文设计5种不同培养基配方,对榆生拟层孔菌母种进行培养,通过比较其生长状况,利用方差分析的方法确定显著差异性。结果表明:配方为马铃薯200g、柳木屑50g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1 000mL的培养基最适合榆生拟层孔菌菌丝生长,表现为菌落边缘整齐,菌丝纯白色,粗壮致密;生长速度快,日长速为1.82cm,满管时间为5.5d。

忍冬木层孔菌对乳腺癌癌前病变大鼠的保护作用

目的:探讨忍冬木层孔菌醇提物对大鼠乳腺癌癌前病变的影响,为忍冬木层孔菌防治乳腺癌提供科学依据。方法:取雌性未孕SD大鼠,制备乳腺癌癌前病变模型。连续灌胃给药4周后观察大鼠一般情况、采用放射免疫法检测大鼠血清中性激素雌二醇(E2)、孕酮(P)、催乳素(PRL)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)含量,用HE染色分析乳腺组织病理变化,用免疫组化分析乳腺组织中雌激素受体α(ERα)、β(ERβ)和孕激素受体(PR)蛋白表达变化。结果:忍冬木层孔菌醇提物600mg/kg能降低血清中E2水平(P<0.05),升高P、PRL的含量(P<0.05或P<0.01),对LH和FSH未见明显的影响;150、300、600mg/kg能降低卵巢、子宫质量指数(P<0.05或P<0.01),改善乳腺组织病理变化(P<0.05或P<0.01);600mg/kg逆转乳腺组织中上调的ERα、ERβ和PR的异常表达(P<0.05或P<0.01)。结论:忍冬木层孔菌醇提物能够调节乳腺癌癌前病变大鼠体内性激素水平和效应,抑制激素异常对乳腺组织的不良刺激,从而改善大鼠乳腺组织病理变化,有效的阻止乳腺癌癌前病变的发生、发展。