黄柏(Phellodendron amurense Rupr．)枝条组培快繁技术研究

以黄柏枝条为外植体,通过研究MS培养基不同激素对黄柏枝条初始萌发的表现,筛选黄柏最佳培养基新配方,结果表明:最适宜黄柏茎段萌动的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,最适宜的增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1mg/L,最适宜的生根培养基为MS+NAA 0.3 mg/L+IAA 0.2 mg/L。

关黄柏历史沿革及产业发展现状与策略探析

关黄柏为东北三大珍贵阔叶树种之一,具有较高的药用价值、生态价值及经济价值,市场需求量极大,为国家珍贵的药用保护树种。目前,关黄柏资源短缺、供给关系失衡、质量控制薄弱、衍生品种类不足、资金投入不足、政策支持不够等问题严重制约了关黄柏产业的可持续性高质量发展。本文通过对关黄柏本草考证、资源现状、产业发展等方面的研究进展进行综述,全面分析关黄柏全产业链发展现状,并提出相应的发展策略,为关黄柏资源可持续利用及产业高质量发展提供参考。

长白山地区黄檗阔叶混交林主要乔木种群生态位特征

黄檗是国家二级保护植物。通过定量分析黄檗阔叶混交林中主要乔木种群的生态位特征,可以为黄檗的保护和维持物种多样性提供理论依据。基于吉林省第九次森林资源连续清查数据,通过对长白山地区黄檗阔叶混交林群落的典型样地进行调查,利用重要值、Levins生态位宽度、Shannon-Wiener生态位宽度和Pianka生态位重叠度计算方法,分析黄檗阔叶混交林主要乔木种群的生态位特征。结果表明,长白山地区黄檗阔叶混交林有25个阔叶树种,占比96.15%,黄檗的重要值最大;Levins和Shannon-Wiener生态位宽度指数大小排序基本一致,生态位宽度最大的树种均为黄檗,其次为胡桃楸;黄檗、枫桦、胡桃楸和裂叶榆等物种的生态位重叠值较大,生态位宽度和生态位重叠度表现出明显的一致性。但是存在部分物种生态位宽度和生态位重叠度具有相反性,如鹅耳栎与槲树、刺槐、椴树,以及黄檗与红松,这与生态宽度受到物种生态习性、生境特征和空间分布等因素有关。

高效液相色谱法测定关黄柏叶中黄柏酮的含量

目的:采用高效液相色谱法建立关黄柏叶中黄柏酮的含量测定方法。方法:高效液相色谱法,WondaSil C18 Superb色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.1%醋酸水(V∶V=49∶51)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为215 nm,柱温为30℃。结果:黄柏酮在1.68~52.74μg/mL范围内,线性关系良好(R2=0.9999)。供试品溶液在24 h内稳定性良好,方法的精密度高,平均加样回收率为102.2%,RSD为2.27%。关黄柏叶中黄柏酮的含量为1.604 mg/g。结论:所建立的方法可用于测定关黄柏叶中黄柏酮的含量。

黄檗中生物碱含量的高效液相色谱分析

建立了一种简便、快速、准确的测定黄檗 (PhellodendronamurenseRupr.)中生物碱含量的高效液相色谱分析方法。色谱条件 :采用日本KYAHIQsilC 18柱 (2 5 0mm× 4 .6mm ,5 μm) ,流动相乙腈 /水溶液 (10 0 0mL溶液中含磷酸二氢钾 3.4 g及十二烷基磺酸钠 1.7g) 1∶1,流速 1.0mL/min ,检测波长 345nm ,进样量 10μL。样品制备以 6 3%的乙醇作溶剂 ,在 4 1℃下超声波提取黄檗茎皮 6 4min。用HPLC分别测定了黄檗根皮、茎皮和叶中小檗碱、掌叶防己碱、药根碱的含量 ,结果表明 :小檗碱和药根碱在根皮中的含量最高 ,茎皮次之 ,叶最低 ,而掌叶防己碱在茎皮中的含量最高 ,根皮次之 ,叶最低。

长白山黄檗基本情况调查及保护

通过野外实地调查、记录、分析、总结。掌握长白山黄檗资源、生存现状的基本情况,提出保护和利用的设想。掌握了黄檗分布范围、生态条件、生长发育规律、自然更新途径、致危因子、保护措施。为黄檗的保护和合理利用提出了指导意见。

中国黄檗资源现状及可持续利用对策

阐述了黄檗的生物学和生态学特性,总结了中国黄檗资源的分布现状,分析了黄檗的濒危原因,提出了黄檗资源的可持续利用对策。人为严重破坏是黄檗濒危的外部原因,林下不能天然更新等生物生态学特性是黄檗濒危的内部原因。加强基础研究工作,逐渐建立新的药用模式,是解决黄檗保护与利用矛盾的根本出路。通过人工栽培获取中药材以及通过种植幼树获取药用原料,可以促进黄檗资源的可持续利用。

黄波罗不同种源对育苗质量的影响

对黄波罗不同种源的种子质量和育苗的苗木质量进行了研究, 结果表明:黄波罗种源以柴河最好,海林次之,而穆棱较差;苗木质量也表现相同,种源柴河最好,海林与山河屯次之,而穆棱较差。

播种量与育苗密度对黄波罗苗木质量的影响

对黄波罗育苗中的播种量和育苗密度进行了研究，结果表明在垄作和床作中应采用播种系数为4，0的播种量，其效果可以满足育苗密度的需求；育苗密度在垄作中以60～70株／m、床作中以80～90株／m^2为优。

不同种质及生长年限关黄柏中生物碱含量变化规律的研究

采用反相高效液相色谱法对不同种质(北京、东北),不同生长年限关黄柏中有效成分(小檗碱、巴马汀、药根碱)含量的变化规律进行研究。为科学地确定关黄柏采收期,保护关黄柏资源提供依据。高效液相色谱法,色谱柱:Alltim a HP C1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(40:60,含种0.1质%(的吉十林二通烷化基)磺9年酸生钠以),上流的速关:1黄.0柏m中L/m小in檗;柱碱温含:量25可℃达,检到测中波国长药:典34规5定nm的。含北量京要种求质。2不年同生种以质上,、不东北同生长年限的关黄柏生物碱含量具有差异性,且变化趋势不同。

黄檗种子及果肉中抑制物质活性的研究

目的探讨黄檗野生种群更新困难的原因,为其种子的萌发机制研究提供参考依据。方法采用甲醇、乙醚、蒸馏水分别浸提黄檗果肉和种子,以白菜、小麦和黄檗作为受试植物,检测种子发芽及幼苗生长情况。结果黄檗果肉和种子的浸提液分别降低了白菜、小麦和黄檗种子的发芽率,对幼苗生长也有不同程度的抑制作用。抑制作用随浓度的增高而增强,以乙醚提取液抑制作用最强,水提液抑制作用不明显。将黄檗种子分离为胚、胚乳和子叶3部分用蒸馏水提取,生物测定发现子叶水提液的抑制活性最强。结论黄檗果肉和种子中均存在着活性较强的抑制物质,能够明显抑制自身及其他植物的生长,抑制物质主要存在于子叶中。

臭氧对黄檗幼苗叶片可见伤害及气孔特征的影响

以4年生黄檗(Phellodendron amurense Rupr.)幼苗为试验材料,利用开顶箱(OTCs)模拟法,设置了4个处理(O3摩尔分数为40×10-9(对照)、60×10-9、80×10-9和120×10-9)的气体熏蒸试验,观测了不同摩尔分数臭氧对黄檗叶片的可见伤害及叶片气孔结构特征的影响。结果表明:单叶伤害面积比和单株叶可见伤害比随O3摩尔分数升高而增加(P<0.01),摩尔分数为120×10-9下熏蒸6 d时黄檗叶片出现坏死斑等伤害症状。O3摩尔分数为80×10-9和120×10-9处理组下表皮气孔密度极显著增加(P<0.01),分别增加37.26%和35.12%,两处理组间差异不显著。气孔宽度、开度、周长和面积也均极显著降低(P<0.01)。而O3摩尔分数为60×10-9时除气孔宽度和开度降低外,其他参数变化不显著(P>0.05)。气孔比随O3摩尔分数升高而增大,并在80×10-9时达到最大为3.52,随后降低。黄檗叶片气孔大小参数与O3摩尔分数之间的相关性可用一元二次曲线方程较好地描述。推测摩尔分数为(80±10)×10-9时是黄檗幼苗臭氧胁迫忍耐性的临界点。

高效液相色谱法测定关黄柏不同采收期及黄檗不同部位的小檗碱、巴马汀含量

目的测定关黄柏不同采收期及黄檗不同部位的小檗碱、巴马汀的含量。方法采用高效液相色谱法测定。结果检测波长 345nm ,平均加样回收率分别为 96 9%和 97 2 % ,RSD =0 5 7%和0 6 2 %。结论沈阳地区关黄柏的最佳采收期为 10月 ;黄檗枝条中的小檗碱含量虽不及关黄柏 。

我国黄檗野生种群生存现状及化学表征研究

黄檗(Phellodendron amurense Rupr.)为我国常用中药关黄柏的基原,也是国家二级保护植物,但在20世纪60-90年代其野生资源遭到严重破坏,并且至今种群规模未得到很好的恢复。本文对我国燕山、千山、长白山、张广才岭、小兴安岭5条山脉黄檗野生种群的种群密度、年龄结构(径级结构)、生物碱类成分含量等进行了调查和研究,结果显示:黄檗野生种群年龄结构呈纺锤形,幼龄级、青壮级个体分别占总个体数的13.9%和68.0%,表明幼龄植株储备匮乏,天然更新不足,总体呈严重的衰退趋势,受威胁状况严峻;千山种群的小檗碱、巴马汀、黄柏碱含量及生物碱总量最高,而小兴安岭种群最低,且二者与其他三条山脉黄檗种群的生物碱类成分含量差异显著。本研究结果表明,野生黄檗种群分布区缩小,年龄结构呈衰退趋势,部分种群个体数量极少,即使在保护状态下也难以自我恢复;千山黄檗种群的生物碱类成分含量较高,在开展药材生产时应予以重视。

黄柏水提物联合抗菌药对产ESBLs大肠杆菌的抑菌效果

【目的】探讨黄柏水提物与抗菌药联用对产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠杆菌的抑制效果,为黄柏的综合开发利用提供参考依据。【方法】采用二倍微量肉汤稀释法测定黄柏水提物与抗菌药的最小抑菌浓度（MIC）,并采用微量棋盘稀释法测定黄柏水提物与抗菌药联用后的分级抑菌浓度指数（FICI）。【结果】黄柏水提物对产ESBLs大肠杆菌的MIC为500 mg/m L,黄柏水提物与头孢曲松钠、阿莫西林、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、头孢噻呋钠、头孢他啶、氟苯尼考、环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、克林沙星、加替沙星、头孢噻肟联用后的FICI为0.50~2.01,其中,黄柏水提物与阿莫西林、头孢曲松钠、头孢噻呋钠、头孢他啶、头孢噻肟、痢菌净联用存在相加作用,与氟苯尼考联用存在协同作用,与诺氟沙星、左旋氧氟沙星、克林沙星、磺胺间甲氧嘧啶间为无关作用,与环丙沙星、加替沙星联用呈拮抗作用。【结论】黄柏水提物与青霉素类、第三代头孢菌素、痢菌净、氟苯尼考联用是通过相加或协同作用提高药物对产ESBLs大肠杆菌的抑制效果,但不宜与喹诺酮类抗菌药联合用药。

黄檗枝条生物碱含量初步分析

利用岛津20A高效液相色谱仪对黄檗不同枝龄主要生物碱质量分数进行了检测.结果表明:在黄檗木质部和韧皮部内,掌叶防己碱最多,小檗碱较少,药根碱最少;韧皮部中各生物碱质量分数均远高于木质部.药根碱质量分数在黄檗不同枝龄间差异显著.木质部内药根碱质量分数与小檗碱质量分数和黄檗枝龄均呈显著正相关;韧皮部内药根碱质量分数和掌叶防己碱质量分数呈显著正相关,小檗碱质量分数与掌叶防己碱质量分数呈极显著负相关,掌叶防己碱质量分数在木质部和韧皮部间呈显著正相关.

不同植被地区天然黄檗生物碱含量对季节的响应

黄檗(Phellodendron amurense Rupr.)不仅为中国特有的濒危植物,还是我国著名中药材"关黄柏"的药源植物,由于其珍贵的药用价值而被过度开采。本研究采用HPLC检测不同植被地区天然黄檗种群中药根碱、掌叶防己碱和小檗碱等生物碱的含量,分析不同部位,不同季节对生物碱分布的影响。研究表明,药根碱在黄檗各部位的分布为:根皮>茎皮>多年生枝>一年生枝>叶片。掌叶防己碱含量分布为:茎皮>多年生枝皮>根皮>一年生枝>叶片。小檗碱在不同部位的分布规律表现为:根皮>茎皮>多年生枝>一年生枝>叶片。根皮和茎皮中的药根碱含量随着春、夏、秋季节的推移呈逐渐上升的趋势,表现为秋季>夏季>春季,而多年生枝皮、一年生枝、叶片中的药根碱则是秋季>春季>夏季。各部位的掌叶防己碱均随着季节推移而升高,表现为秋季>夏季>春季。根皮、茎皮和多年生枝皮中小檗碱含量随着季节变化表现为夏季>秋季>春季。一年生枝中小檗碱在夏季降低,而到了秋季再升高。

利用血液代谢组学研究关黄柏生物碱对慢性非细菌性前列腺炎模型大鼠的干预作用

目的:本研究应用行为学、组织病理学和代谢组学技术研究关黄柏生物碱对慢性非细菌性前列腺炎(Chronic Nonbacterial Prostatitis,CNP)的干预作用,从血液代谢组学角度阐释关黄柏生物碱对CNP模型大鼠体内代谢水平的影响及其作用机制。方法:通过对关黄柏进行分离纯化得到含量较高的关黄柏生物碱富集物,采用前列腺注射辣椒素的方法制备CNP模型大鼠,应用UPLC-Triple TOF-MS/MS联用技术建立CNP血液代谢组学研究方法,鉴定CNP生物标记物及代谢通路,确定关黄柏生物碱对CNP干预作用的代谢途径。结果:确定了与CNP密切相关的18个生物标记物及14个代谢通路。关黄柏生物碱通过对花生四烯酸代谢、甘油磷脂代谢、嘌呤代谢等代谢通路的调节,可显著对各项指标及12个CNP生物标记物产生回调作用。结论:关黄柏生物碱可以有效干预CNP的发生与发展,本研究为抗CNP药物的研究与开发提供科学的实验数据。

培养条件对黄檗快速繁殖影响的研究

以黄檗带顶芽和腋芽的茎段为材料,以MS和1/2MS为基本培养基,进行黄檗组培苗的快速繁殖,以研究不同培养条件对黄檗快速繁殖的影响。结果表明:以MS+6-BA0·8mg·L^(-1)为培养基,浓度10%次氯酸钠溶液消毒黄檗茎段8min,其组培苗生长最旺盛,成活率可达92·8%。以MS为基本培养基,蔗糖浓度20mg·L^(-1),pH值5·8对黄檗组培苗的壮苗效果最好。

黄檗落叶化学成分的研究

从黄檗落叶的95%乙醇提取物中分离鉴定了7个化合物,分别为phellodenol-A(1),茵芋苷(skimmin,2),phellodenol E(3),黄檗苷(amurensin,4),黄柏苷(phellamurin,5),(2R)-phellodensin-F(6)和clerosterol 3-O-β-D-galactopyranoside(7)。其中,化合物7为首次从黄柏属植物中分离得到,化合物3和6为首次从该植物中分离得到。