多环芳烃的HPLC分析——充分发挥Waters Alliance HPLC系统的先进功能

多环芳烃是倍受关注的环境污染物．不同样品基质中多环芳烃的样品处理和ＨＰＬＣ分析方法在ＥＰＡ标准方法中都有明确的描述(见表１)．

基于HPLC指纹图谱的高酚酸耐盐金银花品种筛选

为了筛选出高酚酸含量且耐盐的金银花品种,在河北、山东、河南不同地点采集金银花品种17个,统一移植到河北省农林科学院滨海农业研究所实验基地的盐渍土(NaCl含量0.1%)上栽培繁殖,盐胁迫14 d后取枝条进行酚酸物质含量检测。采用高效液相色谱法(HPLC)与指纹图谱综合质量评价相结合的方法,以酚酸含量高为目标,对金银花品种进行筛选。结果表明:不同的金银花品种具有共同的特征色谱峰12个,特征峰中以绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C、木犀草苷这4种酚酸物质含量表现较高;不同品种的酚酸物质含量差异较大,其中变异株的绿原酸(15.7 mg/g)以及总酚酸物质含量(20.35 mg/g)均为最高,其次是古郡红(绿叶)(绿原酸含量为11.87 mg/g,总酚酸物质含量为17.05 mg/g),二者指标值均显著>其他品种。变异株和古郡红(绿叶)为本次试验筛选出的适合在盐碱地推广种植的品种。

HPLC法同时检测陕西平利绞股蓝中13种酚酸含量

为建立同时检测陕西平利绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)中13种酚酸含量的测定方法,采用高效液相色谱法(HPLC),利用甲醇水溶液(80%)常温涡旋,超声波提取,色谱柱为Dimensions C18(4.6 mm×150 mm,5μm,P/N:227-30011-07,C/N:18C03033),流动相为甲醇(100%)和磷酸水溶液(0.5%),洗脱方法为梯度洗脱,检测波长为280 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,进样体积为5μL。结果表明,13种酚酸在浓度为5~100 mg/L时线性关系良好,相关系数(R2)≥0.998;在样本加标回收试验中,平均加标回收率为61.8%~131.0%。该测定方法精密度、重复性、稳定性好,适用于陕西平利绞股蓝中酚酸含量的测定。

GC、GC-MS、HPLC三种方法测定水中溴氰菊酯的对比研究

溴氰菊酯作为第二代拟除虫菊酯类杀虫剂在世界范围内被广泛使用,水中溴氰菊酯的准确高效测定成为热点研究话题。本文对液液萃取-气相色谱法(GC)、固相萃取-气相色谱质谱法(GC-MS)、直接进样-高效液相色谱法(HPLC)三种水中溴氰菊酯测定方法进行比较分析,从曲线范围、检出限、精密度、准确度、检测周期等方面对比探讨三种方法各自优缺点,以期为不同水质样品分析方法的选择提供借鉴和参考。结果表明:GC法和GC-MS法检出限较低;GC法仪器分析时间短,但前处理较复杂;HPLC法前处理简单、线性范围宽、维护成本较低,适合高含量样品的测定,而GC-MS法则更适合低含量样品的测定。在实际工作中应结合水样自身特点及不同方法优缺点,根据需求选择最优的实验方法。

HPLC法测湖北产地多种茶叶的茶水中咖啡因的含量

比较湖北产地共6批茶叶的茶水中咖啡因的浓度。通过模拟泡茶工艺,利用高效液相色谱法,检测并分析茶水中咖啡因的浓度。咖啡因标准品溶液在0.1~0.5 mg/μL之间,浓度于峰面积呈良好的线性关系,精密度、稳定性、重复性均良好。远安黄茶茶叶的茶水中咖啡因的含量最高,为0.094 mg/mL。该实验数据为继续研究湖北本土茶叶的质量和以茶叶为原料进行再次创新提供新的参考。

固相萃取-HPLC-ESI-MS/MS法测定水中全氟化合物

搭建了固相萃取-超高效液相色谱-电喷雾-串联质谱仪,发现测定水中17种全氟化合物(PFCs)的检测方法。采用玻璃纤维滤膜过滤样品,WAX萃取柱(固相萃取小柱)对样品进行前处理后,柱温和流速分别设定为40℃和0.3 mL/min,使用乙酸铵和乙腈作为流动相,利用梯度洗脱程序进行分离,超高效液相色谱-串联质谱多反应监测(MRM)负离子模式测定,内标法定量。通过优化实验的样品前处理条件和测试参数,标准曲线绘制结果显示,在0~100μg/L范围内,17种全氟化合物线性良好(R大于0.999)。低、中、高3种质量浓度的实际加标样品的相对标准偏差在0.53%~12.00%,回收率在70.7%~114.0%。测试结果表明该方法可以应用于实际检测工作。

HPLC-MS/MS法测定黑枸杞中9种酚酸

建立了一种利用高效液相色谱串联三重四极杆质谱仪测定黑枸杞中9种酚酸的方法。色谱柱为安捷伦Infinity Lab Poroshell 120 EC-C18(3.0 mm×100 mm,2.7μm),以乙腈-水作为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,柱温30℃,进样量5.0μL。结果表明,乙酸乙酯是最优提取溶剂。在最优条件下,9种酚酸在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数R2>0.999,检出限<1.6μg/kg,定量限<5.0μg/kg。在50,100,200μg/kg这3个添加水平下,9种酚酸的回收率为76.4%~106.2%,RSD<4.1%。该方法操作简便,具有较高的准确度、灵敏度和精密度,可用于鉴定和定量分析天然植物提取物中的酚酸类化合物成分。

HPLC法同时测定导赤丸(水蜜丸)中10种成分

目的建立HPLC法同时测定导赤丸(水蜜丸)中栀子苷、芍药苷、连翘酯苷A、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量。方法该药物甲醇提取液的分析采用依利特C_(18)-BP色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相0.2%三乙胺-乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长230、267 nm。结果10种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9996),平均加样回收率98.44%~99.72%,RSD 0.47%~1.06%。结论该方法简便、快速、重复性好,可用于导赤丸(水蜜丸)的质量控制。

HPLC法同时检测抗痒醑中苯酚和水杨酸的含量

目的建立HPLC法同时测定抗痒醑中苯酚和水杨酸的含量。方法以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱;以甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶1)为流动相,检测温度30℃;流速1.0 mL/min,溶剂为流动相,进样量20μL。结果苯酚和水杨酸浓度分别在0.04072~0.14252 mg/mL和0.03096~0.10836 mg/mL范围内与峰面积呈现良好线性关系;高中低三个浓度苯酚的平均回收率为100.52%,RSD为0.19%;水杨酸的平均回收率为101.11%,RSD为0.45%。结论该方法简便、快捷、准确度好,可作为本所制剂抗痒醑的质控方法。

基于HPLC-ECD研究牡荆叶抗氧化的谱-效关系

为研究牡荆叶指纹图谱与抗氧化活性的谱-效关系,该研究首先建立了18批牡荆叶的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)指纹图谱,对不同来源牡荆叶药材进行聚类分析,鉴定主要酚类化合物且测定其含量,分析牡荆叶的总酚和总黄酮含量,并采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、氧自由基吸收能力法及铁离子还原能力法考察其体外抗氧化活性,通过皮尔逊相关分析、灰度关联分析及偏最小二乘回归分析法研究牡荆叶的谱-效关系。结果表明:(1)牡荆叶的指纹图谱标定21个共有峰,共指认出10个峰,其含量顺序为绿原酸>异荭草苷>木犀草苷>异牡荆素>异绿原酸A>异绿原酸C>原儿茶酸>荭草苷>异绿原酸B>新绿原酸;不同产地样品间相似性较高,相似度结果为0.816~0.983。(2)系统聚类分析显示,样品含量对分类有一定影响,不同来源样品被分为3类,其中南北方样品存在一定差异。(3)牡荆叶中总酚和总黄酮的含量分别为15.82~61.83 mg·g^(-1)和27.85~157.65 mg·g^(-1),样品均具不同程度的抗氧化活性。(4)谱-效关系表明,牡荆叶的抗氧化活性是多种化合物协同作用的结果,峰9(异荭草苷)、峰4和峰5(绿原酸)等化合物对牡荆叶药材抗氧化活性的贡献最大。综上表明,牡荆叶具有较好的抗氧化活性,其中主要的活性指标是异荭草苷和绿原酸。该研究结果可为牡荆叶抗氧化活性成分的筛选及其质量控制提供参考依据。

HPLC法同时测定五维赖氨酸口服溶液中4种水溶性主成分的含量

目的:建立直接同时测定五维赖氨酸口服溶液中盐酸赖氨酸和三种水溶性维生素含量的RP-HPLC法。方法:采用Phenomenex Gemini C 18100A(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以0.03 mol·L^(-1)磷酸二氢铵溶液(pH 3.0)-甲醇(98∶2)为流动相,检测波长为205 nm,流速1.0 mL·min^(-1)。结果:盐酸赖氨酸、维生素C、维生素B 6和烟酰胺分别在30.56~488.9μg·mL^(-1)(r=1.0000)、24.86~397.8μg·mL^(-1)(r=0.9998)、1.018~16.29μg·mL^(-1)(r=1.0000)、10.72~171.5μg·mL^(-1)(r=0.9990)范围内与峰面积呈良好的线性关系;定量限分别为10.39、0.4661、0.09279、0.1362 ng;平均回收率分别为100.6%、98.5%、98.0%、99.2%,RSD分别为0.1%、0.1%、0.1%、0.03%;测定3批样品,盐酸赖氨酸、维生素C、维生素B 6和烟酰胺的含量分别在99.9%~100.1%、89.3%~90.3%、93.1%~93.4%和92.7%~93.4%之间。结论:本实验建立的分析方法能够同时准确测定五维赖氨酸口服溶液中的4种水溶性主成分,方法操作简单、专属性强、灵敏度高,可用于控制五维赖氨酸口服溶液的质量。

RP-HPLC法测定18种氨基酸中有关物质

目的:建立 RP-HPLC 测定18种氨基酸中有关物质的方法。方法:采用 Zorbax SB-C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相 A,乙腈-水(1:1);B,醋酸盐缓冲液(pH 6.1),流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为360 nm,采用校正面积归一化法测定氨基酸中其他氨基酸的含量。结果:本色谱条件下各种氨基酸和杂质均能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰,最低检测限为1ng·mL^(-1)。结论:该方法专属性强,操作方便,结果准确,重现性好。

HPLC-MS同时测定人血浆中胺碘酮及其代谢产物浓度

目的:建立高效液相色谱质谱联用(HPLC-MS)同时测定人血浆中胺碘酮及其主要活性代谢产物去乙基胺碘酮浓度的方法,并用于临床血药浓度监测。方法:采用 Waters XTerra^(TM) MS C_(18)色谱柱(150mm×3.9mm,5μm),柱温40℃,以30mmol·L^(-1)醋酸铵水溶液-乙腈(12∶88)为流动相,流速0.85mL·min^(-1),以氯米帕明为内标。质谱采用电喷雾电离源(ESI)正源,以各物质准分子离子峰选择离子监测(SIR)模式进行定量分析,血浆样品用乙腈直接沉淀处理。结果:胺碘酮与去乙基胺碘酮在0.10～3.20μg·mL^(-1)浓度范围线性关系良好,相关系数分别为0.9993与0.9996,最低检测浓度分别为0.025μg·mL^(-1)与0.030μg·mL^(-1)。(S/N=3)。日内、日间 RSD 均小于10%(n=5)。结论:该方法操作简单、灵敏度高、分析时间短;适用于胺碘酮及其代谢产物血药浓度监测及药代动力学研究。

HPLC测定复方氨酚烷胺胶囊中对乙酰氨基酚含量

目的:建立复方氨酚烷胺胶囊中对乙酰氨基酚含量的高效液相色谱法方法。方法:采用WaterSpherisorbC18(5!mm4.6×150mm)为色谱柱;流动相为甲醇-水-冰醋酸(208∶00∶.5);检测波长为249nm。结果:该方法的平均加样回收率为98.5%,RSD为0.67%(n=4)。结论:可用于测定复方氨酚烷胺胶囊中对乙酰氨基酚的含量。

HPLC法测定妍婷颗粒中芍药苷的含量

1材料 仪器：美国Waters公司高效液相色谱系统：2996Photodiode Array Detector，2965 Separations Module，Empower工作站；色谱柱：Kromasil C18 5μm（中国科学院大连化学物理研究所）；SPD紫外检测器；MW2000电子天平，上海第二天平仪器厂。试药：芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所提供）。色谱条件：Kromasil C18色谱柱（4．6mm×150mm，5．0μm）；流动相：甲醇-水（30：70）；流速：1ml／min；检测波长：232nm；进样量：10μl；保留时间：10．6分钟。

HPLC法测定度米芬原料的有关物质

目的 建立高效液相色谱法检测度米芬原料的有关物质。方法 用Agilent 5TC C_(18)色谱柱;以乙腈为流动相A,0.03 mol·L^(-1)磷酸二氢钠+0.01 mol·L^(-1)十二烷基硫酸钠(磷酸调节pH至3.0)为流动相B,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1);柱温为40℃;检测波长为220 nm;进样量为20μL。结果 度米芬与有关物质苯酚(1)、N,N-二甲基-2-苯氧基乙胺(2)、溴化N,N-二甲基-N-(2-苯氧乙基)-1-十烷铵(3)、溴化N,N-二甲基-N-(2-苯氧乙基)-1-十四烷铵(4)及强制破坏产物均能完全分离。苯酚、N,N-二甲基-2-苯氧基乙胺、溴化N,N-二甲基-N-(2-苯氧乙基)-1-十烷铵和溴化N,N-二甲基-N-(2-苯氧乙基)-1-十四烷铵分别在0.020 9~5.220μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、0.018 5~4.620μg·mL^(-1)(r=0.999 6)、0.019 8~4.960μg·mL^(-1)(r=0.999 7)、0.017 4~4.340μg·mL^(-1)(r=0.999 4)范围内线性关系良好;定量限分别为18.19、12.38、15.34、13.81 ng·mL^(-1),检测限分别为6.13、4.79、5.26、3.94 ng·mL^(-1);苯酚、N,N-二甲基-2-苯氧基乙胺、溴化N,N-二甲基-N-(2-苯氧乙基)-1-十烷铵、溴化N,N-二甲基-N-(2-苯氧乙基)-1-十四烷铵平均回收率分别为99.74%、100.08%、99.19%、98.79%,RSD分别为0.56%、1.12%、0.91%、1.42%(n=12)。结论 所建立的方法操作便捷,结果准确,灵敏度高,专属性强,可用于度米芬原料有关物质的质量控制。

Chemical and Sensory Properties of Olive Oil as Influenced by Different Sources of Irrigation Water

This research was conducted throughout the years 2008-2010 to study the influence of irrigation water quality on oil quality of ＂Nabali Muhassan＂ olive trees. Reclaimed municipal wastewater and fresh water were used twice a week using drip irrigation system. Rainfed olive trees of the same farm were taken as control. No significant differences were observed between rainfed, fresh water and reclaimed wastewater treatments in terms of acidity, peroxide values and UV absorbance of the extracted olive oil. Heavy metals and microbiological pathogens were not detected in all tested olive oil samples. Oleic acid was significantly higher in olive oil obtained from rainfed trees than irrigated trees. Linoleic acid content was significantly higher in reclaimed wastewater irrigated trees than the rainfed trees. Total polyphenol contents were significantly higher in oil obtained from rainfed olive trees than oil obtained from the irrigated olive trees. Results of organoleptic analysis showed no significant differences in the fruity attribute within treatments, while the bitter and pungent attributes were higher in olive oil obtained from rainfed trees as compared to that obtained from irrigated trees. No negative attributes were observed in oil obtained from the irrigated or rainfed trees and they were all classified as extra virgin grade.

HPLC同时检测葡萄酒中10种单体酚的方法

本研究建立了用HPLC同时测定葡萄酒中没食子酸、(+)-儿茶素等10种单体酚的方法。色谱条件为:Hibar RT Lichrospher反相C_18柱,流动相A为水:乙酸(98:2),流动相B为乙腈,梯度洗脱,流速为1.0ml/min,检测波长为280nm。在该色谱条件下各个单体酚在30min内得到了良好的分离,各物质的含量与峰面积呈良好的线性关系,且回收率较高,重复性好,且具有定量准确、快速等特点。结果表明,三种葡萄酒均被检测到了这10种单体酚,且它们在红葡萄酒中的含量显著高于白葡萄酒。

HPLC法测定不同葡萄品种成熟过程中单体酚的变化

建立了用HPLC法同时测定黑比诺、梅尔诺、霞多丽葡萄成熟过程中6种酚(没食子酸、安息香酸、儿茶素、丁香酸、芦丁、阿魏酸)的方法,测定了其含量,并比较了其变化差异。结果表明,采用Hibar RT Lichrospher C18柱(250 mm×4．0 mm×5μm),16％乙腈水溶液(含1％乙酸),1．0 mL／min等压洗脱,可以较好地分离测定葡萄中的主要单体酚。在葡萄成熟过程中,红葡萄(梅尔诺和黑比诺)中单体酚含量均高于白葡萄(霞多丽)。儿茶素、芦丁和丁香酸含量随着葡萄成熟逐渐减少,其中儿茶素含量减少幅度最大;安息香酸含量在葡萄成熟前期迅速减少,其后下降缓慢,采收前1周迅速增加;在梅尔诺中没食子酸含量先增加后减少,而在黑比诺和霞多丽中呈先增加后减少再增加的趋势。在供试葡萄品种中,儿茶素含量最高,阿魏酸含量最低,依次为儿茶素>安息香酸>没食子酸>芦丁>丁香酸>阿魏酸。

骨肽注射液中苯酚含量的RP-HPLC法测定

目的:建立高效液相色谱法测定骨肽注射液中苯酚的含量。方法:采用 ZORBAX C_(18)柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-水(25:75);流速1.0 mL·mm^(-1);检测波长:270nm;进样量:10μL。结果:方法的线性范围为0.001-1.0mg·mL^(-1)(r=0.9998);检测限为0.2μg·mL^(-1);精密度 RSD 为0.23%(n=7);高、中、低浓度回收率(n=3)分别为98.8%(RSD为0.5%)、99.2%(RSD 为0.2%,)、99.0%(RSD 为0.3%)。结论:本法具有专属、灵敏、快速、准确的特点,可用于骨肽注射液中的苯酚测定。