琼脂糖凝胶CL-6B亲和色谱法一步纯化蚯蚓半乳凝素

环节动物的S型凝集素在结构和生化性质上都有别于一般的S型凝集素,其在抗癌等研究方面的潜在价值重大。根据环节动物S型凝集素的性质,采用惰性分子筛填料Sepharose CL-6B(琼脂糖凝胶CL-6B)作为亲和色谱介质对蚯蚓S型凝集素进行了纯化。以2mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)-MEPBS(4mmol/Lβ-巯基乙醇,150mmol/L NaCl,20mmol/L磷酸盐,pH7.2)溶液作为平衡液,以氨水(150mmol/L,pH10.5)作为洗脱液得到的蛋白质经SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)、凝血实验及荧光检测等证明了其即为蚯蚓S型凝集素。该方法只需一个步骤即可从蚯蚓提取液中分离到纯的S型凝集素,比传统方法更加快捷高效,优越性明显。该方法的应用将有利于对环节动物S型凝集素的深入研究。

大量分离叶绿素a和b的方法

在原有分离叶绿素a和b的DEAE SepharoseCL 6B和SepharoseCL 6B柱层析法的基础上 ,用较大的层析柱 ,在保持分离效果的前提下 ,提高流速 ,并对层析柱进行原位再生处理 ,实现循环分离 ,可节省装柱和平衡时间 ,快速大量分离纯化叶绿素并可循环再生。 10 0 g菠菜叶可分离得到叶绿素a约 5 0mg ,叶绿素b约 15mg。

高能炸药CL-20分子结构的理论模拟方法探究

采用量子化学方法,在HF/6-31G,DFT-B3LYP/6-31G和MP2/6-31G基组水平下全优化ε-CL-20分子的结构,对ε-CL-20的结构(包括键长、键角、二面角)分析得出B3LYP/6-31G水平下的理论值更接近实验值。采用B3LYP方法,不同基组3-21G,6-31G,6-31++G,6-311++G,6-31++G**水平下全优化ε-CL-20分子,基组选取基本不影响计算结果,表明B3LYP/6-31G基组水平下的计算结果能够满足ε-CL-20的结构优化要求。采用HF、B3LYP、MP2方法不同基组计算ε-CL-20原子的净电荷分布,结果表明充分考虑电子相关性的B3LYP方法计算结果最合理。

双歧杆菌22-5胞外多糖(EPS)的分离、纯化及纯度鉴定

为了得到双歧杆菌22-5胞外多糖(EPS)的纯品,对EPS分离纯化方法进行了摸索,得到EPS产量较高的分离条件:发酵上清液中加入3倍体积95%冷乙醇,-20℃沉淀12h以上,8000r/min离心4次,热水溶解后用Sevag法去蛋白6次,通过SephoroseCL-6B凝胶过滤得到的吸收峰,经紫外光谱扫描和HPLC分析,鉴定为单一多糖组分。

云芝胞内多糖CVP-Ⅱ的分离与初步鉴定

从液体发酵的云芝菌丝体中提取获得菌丝体胞内多糖,,经DEAE-SepharoseCL-6B洗脱分离出一种主要组分CVP-Ⅱ,该组分经凝胶层析显现单一峰,初步鉴定CVP-Ⅱ为较纯组分,对CVP-Ⅱ进行紫外分析,结果发现该组分呈现蛋白结合多糖的特征,从红外分析来看,明显呈现出多糖的官能团吸收.

疏水层析介质的制备及对谷胱甘肽转硫酶的分离纯化

通过向环氧氯丙烷活化的Sepharose CL-6B中引入苯基,制备了Phenyl-Sepha-rose CL-6B凝胶并优化了偶联条件,以该合成的层析介质分离纯化了猪肝中的谷胱甘肽转硫酶。结果表明,在NaOH浓度为0.25mol.L-1,苯酚加入量为0.5mL.g-1凝胶,60℃下反应4.5h的条件下,偶联效果最好,偶联率达到95.5%。用该疏水层析介质纯化猪肝中的谷胱甘肽转硫酶,活性回收率为54.54%,纯化倍数为2.6。