Determination of Total Polyphenols in Different Extraction Fractions of Pholidota chinensis Lindl.and Their Antioxidant Activity

[Objectives]This study was conducted to study the total polyphenol content and antioxidant capacity of different extraction fractions of Pholidota chinensis.[Methods]Different polar fractions of P.chinensis were obtained by ultrasonic extraction method,and determined for polyphenol contents by UV spectrophotometry,and their antioxidant activity was evaluated by DPPH free radical scavenging and ferric ion reducing antioxidant power(FRAP).SPSS analysis software was used to analyze the correlation between total polyphenol contents and antioxidant activity of different extracts.[Results]The contents of total polyphenols in different polar fractions ranged from 1.52 to 6.41 mg/g,and the order from low to high was:water<petroleum ether<ethyl acetate<95%ethanol.The reduction capacity of the total antioxidant capacity method ranged from 12.54 to 22.45μmol/L,and the order was 95%ethanol>ethyl acetate>petroleum ether>water.The DPPH median inhibition concentration ranged from 0.35 to 2.65 mg/ml,and the order was water>petroleum ether>ethyl acetate>95%ethanol.The total polyphenol content of P.chinensis was best in the 95%ethanol extraction fraction,which showed the strongest total antioxidant capacity,so the total polyphenol content of the 95%ethanol fraction was positively correlated with its antioxidant capacity,while the DPPH free radical-scavenging capacity was better in the water fraction,indicating that the free radical-scavenging capacity of the water fraction was better.[Conclusions]This study provides a theoretical basis for the further study of the chemical components of P.chinensis and the development and utilization of natural antioxidants.

Research Progress of Pholidota chinensis Lindl.

Pholidota chinensis Lindl. is a plant in Pholidota of Orchidaceae family~[1],as well as a traditional edible and medicinal plant in Guangxi Province,and has the effects of clearing away heat and nourishing yin,and preventing phlegm form forming and stopping coughing. In this paper,the research on the herbal medicine,medicinal identification,chemical composition and extraction process of some chemical components,trace elements,clinical application and pharmacological action,antibacterial effect were reviewed. The existing problems in the current research were analyzed,and its future research direction were prospected,with an attempt to provide reference for its future research and development and utilization.

Pharmacognosy Identification of Yi Crude Herb Pholidota chinensis Lindl.

[Objectives] To study the original plant,Crude herb and microscopic identification of Yi Crude herb Pholidota chinensis Lindl.,and provide experimental data for identification and application. [Methods]Plant identification,character identification,powder identification and paraffin section identification were adopted in the study. [Results]The characteristics of Yi Crude herb of Pholidota chinensis Lindl. were obvious in the original plant,Crude herb and microscopic characteristics. [Conclusions]This paper provided reference for developing quality standards of Yi Crude herb Pholidota chinensis Lindl. and original plant identification,and provided the basis for further research.

石橄榄组织培养外植体筛选及培养条件优化

【目的】建立石橄榄组织培养快繁技术体系。【方法】以石橄榄全株为试材,研究外植体的生长情况,筛选出最佳外植体及培养基,优化石橄榄种子萌发、壮苗增殖等培养条件。【结果】石橄榄组织培养最佳外植体为种子,其根、根茎、假鳞茎均未萌发,并出现长霉和化水的情况,而种子均可萌发。石橄榄种子萌发启动最佳培养基配方为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.8 mg/L+6-KT 0.1 mg/L,此条件下石橄榄原球茎变绿色。在基础培养基中分别加入香蕉泥(50 g/L)、土豆泥(50 g/L)、椰汁(50 mL/L)进行壮苗有机物筛选发现,添加香蕉泥的培养基中石橄榄整体长势良好、均一,假鳞茎多,株高与叶长均高于培养基添加土豆泥或椰汁的石橄榄,最终选出50 g/L香蕉泥作为最佳添加有机物加入后续试验的培养基中。石橄榄壮苗优化的最佳培养配方为1/2MS+50 g/L香蕉泥+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-KT 0.3 mg/L,此条件下石橄榄长势好、株高较高。石橄榄壮苗生根的最佳培养基配方为MS+50 g/L香蕉泥+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,此条件下石橄榄假鳞茎多、气生根多立于苗上下。【结论】建立适合石橄榄种子组织培养快繁技术体系,石橄榄种子最佳萌发启动培养基配方为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.8 mg/L+6-KT 0.1 mg/L;最佳壮苗优化培养基配方是1/2MS+50 g/L香蕉泥+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-KT 0.3 mg/L;最佳生根培养基配方是MS+50 g/L香蕉泥+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,为石橄榄的资源保护与利用及其规模化生产奠定基础。

通过改良RAPD技术获得黑毛石斛、蜂腰石斛和石仙桃的3条SCAR新标记

目的寻找快速区分黑毛石斛、蜂腰石斛和石仙桃的序列特征扩增区域(sequence characterized amplified regions,SCAR)新标记。方法在改良的随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)的基础上对10个物种进行基因组DNA随机扩增、分子克隆和测序,分别设计了可鉴别3个物种的SCAR标记。结果成功筛选出3个SCAR标记,其相应的特异性标记分别为N2-12、A2-17和A6-33;其中SCAR标记N2-12在黑毛种属中扩增出约750 bp的特异性条带,SCAR标记A2-17在蜂腰石斛中扩增出约750 bp的特异性条带,SCAR标记A6-33在石仙桃种属中扩增出约600 bp的特异性条带。结论N2-12、A2-17和A6-33这3对特异性SCAR新标记能快速、准确的区分出黑毛石斛、蜂腰石斛和石仙桃这3个物种,为今后进行该中药道地药材样品的鉴定提供了实验依据。

Box-Behnken响应面优化超声法提取节茎石仙桃多糖及其抗氧化活性研究

优化超声辅助提取节茎石仙桃多糖的工艺参数并探究其抗氧化活性。在单因素试验基础上,采用Box-Behnken设计试验方法,探讨料液比、浸取温度、超声时间3个因素及其交互作用对节茎石仙桃多糖提取率的影响,构建节茎石仙桃多糖提取率与提取过程中各因素的二次多元回归模型。以抗坏血酸为对照,考察节茎石仙桃多糖对·OH、O^(2-)、ABTS·+和DPPH·的清除活性。结果表明,超声辅助水提醇沉节茎石仙桃多糖的最佳工艺条件为:料液比1∶30(g/mL),浸取温度78℃(1 h),超声时间38 min(80℃),在此提取条件下节茎石仙桃多糖的提取率为11.31%,与预测值仅相差0.11%,验证了该模型的有效性。节茎石仙桃多糖对·OH、O^(2-)、ABTS·^(+)和DPPH·4种氧化因子的综合清除活性较强,平均清除率达到(56.00±0.26)%以上,且多糖浓度与清除活性呈正相关。说明该工艺对石仙桃属植物多糖纯品的制备和开发利用均具有良好的应用价值。

石仙桃多糖的提取工艺及纯化研究

采用单因素试验和L9(34)正交试验设计,研究了料液比、提取时间、提取温度对石仙桃多糖提取率的影响,筛选出了最佳提取工艺。采用盐析法除蛋白、乙醇反复沉淀的方法纯化石仙桃多糖。结果表明,影响多糖提取率的主次因素为提取时间、料液比及提取温度;石仙桃多糖最佳提取工艺条件为:提取温度80℃,浸提时间5h,料液比1:40。在此工艺条件下,石仙桃多糖的得率为2.25%。纯化后的多糖经纯度鉴定为均多糖。

石仙桃叶化学成分研究

目的研究兰科石仙桃属植物石仙桃叶的化学成分。方法应用色谱和光谱分析方法分离和鉴定化学成分。结果从石仙桃叶子醋酸乙酯部分分离到7个化合物，分别鉴定为：4-（4-羟基-苄基）苯酚①，原儿茶醛②，天麻苷元③，对羟基苯甲醛④，β-胡萝卜乎⑤，Cyclopholidone⑥，Cyclopholidonol⑦。结论化合物1～4为首次从该属植物分离得到；化合物5为首次从该种植物中分离得到。

超声波辅助提取石橄榄总黄酮的工艺

以石橄榄为原料,利用响应面法优化了超声波辅助提取总黄酮的工艺。在单因素试验基础上,以总黄酮提取率为响应值,选取乙醇浓度、液料比、超声温度、超声时间为自变量,采用BoxBehnken实验设计方法,研究各自变量及其交互作用对总黄酮提取率的影响,建立了总黄酮提取率与提取过程中各因素的二次多项式模型。结果表明,超声波辅助提取石橄榄总黄酮的最佳工艺条件为:乙醇浓度66%,液料比26mL/g,超声温度61℃、超声时间41min,该条件下总黄酮提取率为1.76%,与预测值相对误差为1.12%,验证了该模型的有效性。该工艺与热浸提法相比,大大缩短了提取时间,且提取率提高了43.09%,该研究为开发利用石橄榄资源提供了基础理论与参考。

野生石仙桃立地环境与生长特性研究

为了解石仙桃野生资源的立地条件、物候期及形态特征而进行研究。通过野外实地调查和室内样品分析的方法,对石仙桃野生环境温度、光照强度、湿度等主要环境因素进行测量,观察记录物候期,测定样品的叶长、叶宽、假鳞茎长度、单株假鳞茎数量、根状茎长、根状茎粗等形态特征。结果表明:石仙桃喜生于阴凉的小溪旁边;4~5月开花,10月到次年3月果实成熟;没有明显的休眠期。本研究为石仙桃的人工栽培奠定了基础。

微波消解-火焰原子吸收光谱法测定石仙桃中六种金属元素的含量

运用火焰原子吸收光谱法测定了石仙桃中Fe、Cu、Mg、Ca、Mn、Zn6种金属元素。用浓硝酸-双氧水微波消解样品,采用标准曲线法测定。所测定的石仙桃中含有丰富的人体必需金属元素,采用此方法回收率在94.5%～108.0%之间。本方法简单、准确,结果令人满意。

石仙桃中总黄酮的提取及含量测定

采用单因素试验及正交试验设计,利用乙醇溶剂浸提结合微波辅助提取法对石仙桃(Phoidotaof chinensis Lind L.)总黄酮的提取工艺进行优化,并用分光光度计比色法测定提取的总黄酮含量。结果表明,石仙桃总黄酮提取的最佳工艺条件为微波功率300 W,提取时间30 min,温度60℃,料液比(m∶V,g∶m L)1∶20,乙醇体积分数80%。按照最佳工艺条件进行提取,石仙桃总黄酮提取量达31.41 mg/g。

响应面优化微波辅助提取石橄榄总黄酮及其抗氧化研究

以石橄榄为原料,在单因素试验基础上,以总黄酮提取率为响应值,采用Box-Behnken实验设计方法,研究各自变量及其交互作用对总黄酮提取率的影响,并利用Design-Expert软件,建立了总黄酮提取率与提取过程中各因素的二次多项式模型。结果表明,微波辅助提取石橄榄总黄酮的最佳工艺条件为:液料比21 m L·g-1、乙醇浓度60%、微波功率800 W,微波时间63 s,该条件下总黄酮提取率为1.52%,与预测值相对误差为0.65%,验证了该模型的有效性。以维生素C为对照,考察了石橄榄总黄酮对·OH和DPPH·的清除能力。结果显示,石橄榄总黄酮具有较强的清除·OH和DPPH·的能力,并均呈一定的量效关系,说明石橄榄总黄酮可作为一种天然的抗氧剂。

石仙桃中总黄酮的提取方法的比较研究

探究石仙桃的总黄酮的提取方法的比较。以乙醇-水为提取体系,分别采用回流法、超声法,探究乙醇浓度、料液比、提取时间等对石仙桃中总黄酮提取的影响,确立最佳条件。通过正交试验证明,超声波辅助提取的最佳工艺为:温度40℃,料液比1∶40(g/mL),提取时间50 min,在此条件下提取的黄酮含量为26.12 mg/g;乙醇回流法提取最佳工艺为:温度60℃,料液比1∶50(g/mL),提取时间50 min,在此条件下提取的黄酮含量为22.03 mg/g。超声波辅助提取法提取石仙桃中总黄酮的提取率高于乙醇回流提取法提取。

石仙桃炮制工艺研究

目的研究石仙桃的最佳炮制工艺。方法采用不同炮制方法对石仙桃药材进行炮制,并采用正交试验优选最佳炮制工艺。结果采用水煮方法炮制的石仙桃中天麻素及天麻苷元总量最高,并以100℃水煮20分钟,60℃烘烤为最佳。结论优选出的炮制方法稳定可行。

石仙桃的镇痛作用的研究

目的 :研究石仙桃的镇痛作用。方法 :采用热板法、醋酸扭体法、电刺激致痛法观察药物的镇痛作用。结果 :石仙桃提取液明显抑制冰醋酸引起的小鼠扭体反应 ;显著提高热板法和电刺激致痛小鼠的痛阈 ;且呈剂量依赖性。结论 :石仙桃具有镇痛作用。

石仙桃提取物对小鼠运动疲劳和缺氧的影响

目的:观察石仙桃提取物对小鼠运动疲劳和缺氧的影响。方法:应用5种运动疲劳和缺氧实验,如:常压耐缺氧实验、特异性心肌缺氧实验、亚硝酸钠引起的缺氧实验、对抗脑缺血缺氧和耐力实验等。结果:①常压耐缺氧实验中,腹腔注射石仙桃提取物呈剂量依赖性,明显延长小鼠生存时间。②特异性心肌缺氧实验中,腹腔注射石仙桃明显延长小鼠生存时间。③在亚硝酸钠引起的缺氧实验中,预防性给石仙桃提取液可延长小鼠存活时间。④对抗断头术后脑缺血缺氧实验中,石仙桃提取液能显著性延长小鼠喘息时间。⑤在耐力实验中,石仙桃提取液呈剂量依赖性延长小鼠存活时间。结论:石仙桃具有抗疲劳作用、耐缺氧作用,其潜在的作用机制可能与提高肺泡液清除有关。

石仙桃人工栽培技术

石仙桃为兰科石仙桃属多年生草本植物,生长极其缓慢,随着人们对其过度采挖,逐步处于濒危状态,急需人工栽培以满足需求。根据生产实践,从栽培场地的选择、栽培基质、种植技术、采收等方面总结石仙桃人工栽培技术。

石仙桃对中枢神经系统抑制作用

目的 :研究石仙桃的镇静和催眠作用。方法 :观察石仙桃提取液对小鼠自发活动、戊巴比妥钠睡眠时间、阈下催眠剂量戊巴比妥钠的影响及其对小鼠电惊厥的影响。结果 :石仙桃提取液明显减少小鼠的自发活动 ,延长小鼠戊巴比妥钠催眠时间 ,增强阈下催眠剂量戊巴比妥钠的作用并有一定的抗惊厥作用且呈剂量依耐性。结论 :石仙桃提取液具有镇静。

石仙桃多糖提取工艺优化及含量测定

目的：优化石仙桃多糖提取工艺并对其进行含量测定。方法：采用紫外可见分光光度法测定石仙桃多糖含量，以D-无水葡萄糖标准品为对照，检测波长为485nm。通过单因素考察和正交实验确定石仙桃最佳的提取工艺并测定其含量。结果：采用回流提取法提取石仙桃多糖，确定最佳提取工艺为：粉碎粒度65目，料液比1：80，提取时间3h，在此条件下测得不同产地石仙桃多糖含量在3．22％～8．03％之间。结论：该方法结果准确、可靠，可用为石仙桃多糖的提取方法，为石仙桃的质量控制提供一定的实验数据。