Research Progress of Pharmacognostical Identification and Chemical Composition of Pholidota cantonensis Rolfe.

Research progress of pharmacognostical identification and chemical composition of Pholidota cantonensis Rolfe. was reviewed. This paper will facilitate assurance of the safety of clinical treatment.

Study on Characteristic Fingerprint of Chemical Constituents in the Pholidota cantonensis Rolfe.

[Objectives] This study was conducted to establish a characteristic fingerprinting research method for the chemical constituents of the Zhuang medicine Pholidota cantonensis Rolfe.and its characteristic fingerprint of chemical constituents,in order to identify P.cantonensis.[Methods] Ten batches of P.cantonensis from different habitats in Guangxi and out of Guangxi (Shaoguan of Guangdong Province) were determined.The materials were extracted in 80% methanol ultrasonically for 1.5 h under the material-to-liquid ratio of 2.5 g/80 ml.The HPLC determination was carried out using an Agilent 1260 HPLP instrument equipped with an Agilent5 TC-C18 (2) column at the column temperature of 30 ℃,the wavelength of 280 nm and the injection volume of 10 μl using acetonitrile-0.4% phosphoric acid as the mobile phase and chlorogenic acid as the reference peak,and the detection took 58 min.[Results] The characteristic fingerprint of the chemical constituents of P.cantonensis were obtained,and the three chromatographic peaks of gallic acid,chlorogenic acid and syringaldehyde were compared.[Conclusions] This study can provide reference for the identification of the Zhuang medicine P.cantonensis and provide guarantee for the clinical use of Chinese medicine.

石仙桃与细叶石仙桃叶绿体基因组解析及其系统发育

石仙桃和细叶石仙桃均为珍稀濒危的附生兰,两者叶绿体基因组特征及其系统发育报道较少,本研究旨在揭示石仙桃和细叶石仙桃叶绿体基因组特征及其系统发育。2022年5月取驯化栽培的石仙桃和细叶石仙桃幼嫩叶片,基于Illumina测序平台分别获得石仙桃和细叶石仙桃叶绿体序列,用GetOrganelle组装、CPGAVAS2注释,利用生物信息学方法开展重复序列、密码子偏好性、四分体边界等叶绿体特征分析,并从NCBI上下载相关的序列开展基因组比较与系统发育分析。石仙桃叶绿体基因组大小为159122 bp(GC含量为37.41%),细叶石仙桃叶绿体基因组大小为158798 bp(GC含量为37.47%),两者均包括大单拷贝区(LSC)、小单拷贝区(SSC)和反向重复序列(IRa/IRb)。石仙桃与细叶石仙桃均注释了113个基因,其中编码蛋白质的基因79个,石仙桃中编码79个蛋白质基因使用22968个密码子,编码亮氨酸的UUA相对同义密码子使用频次(RSCU)达到1.90;细叶石仙桃中编码79个蛋白质的基因使用22923个密码子,编码亮氨酸UUA的RSCU达到1.91。石仙桃叶绿体基因组中共有44个简单序列重复(SSR)、47个散在重复、26个串联重复;细叶石仙桃有32个SSR、25个散在重复、30个串联重复。石仙桃属6个物种的四分体边界及共线性无大片段变化,但存在核苷酸多态性,trn K-UUU、trn Q-UUG、rpl16等基因可作为物种的分子标记候选基因。系统分析明确了石仙桃和细叶石仙桃等石仙桃属物种与蜂腰兰和流苏贝母亲缘关系较近,并同处于附生兰的分支中,叶绿体基因组大片段倒置等可能是兰科适应生活习性改变的原因之一。本研究明确了石仙桃和细叶石仙桃叶绿体基因组特征,探讨了其系统发育及兰科生活习性与叶绿体基因组之间的关系,为进一步分类和分子标记开发等相关研究奠定了基础。

基于茚三酮比色法测定闽产细叶石仙桃总氨基酸含量

目的:优化溶剂回流提取-茚三酮比色法测定福建省不同产地细叶石仙桃中总氨基酸含量。方法:以甘氨酸为对照品,采用茚三酮比色法测定细叶石仙桃中总氨基酸含量;考察不同影响因素对茚三酮法测定细叶石仙桃总氨基酸含量的影响,确定最佳检测条件;在单因素实验基础上,采用L9(34)正交试验考察溶剂用量、溶剂浓度、提取时间及提取次数对细叶石仙桃中总氨基酸提取工艺的影响,并以其为考察指标,优化筛选最佳提取工艺。结果:最佳检测条件为测定波长568 nm、2%茚三酮溶液用量3.0 mL、缓冲液pH值6、缓冲液用量2.0 mL、水浴加热温度80℃、水浴加热时间40 min;最佳提取条件为乙醇浓度85%,乙醇用量35.0 mL,提取时间60 min,提取2次。在所收集到的福建省4个产地的细叶石仙桃中总氨基酸含量由高到低依次为永泰县、上杭县、屏南县、永春县。结论:优选的提取工艺稳定可行,建立含量测定方法简便、准确、重复性好,为细叶石仙桃的质量评价和进一步开发利用提供依据。样品中以永泰县所产的细叶石仙桃质量最佳。

细叶石仙桃乙酸乙酯部位化学成分研究

目的:研究细叶石仙桃乙酸乙酯部位的化学成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI gel柱色谱及重结晶分离和纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果:从细叶石仙桃乙酸乙酯部位中分离纯化了10个化合物,分别鉴定为:batatasinⅢ(1)、orchinol(2)、ephmeranthoquinone(3)、densiflorol B(4)、3,5-二甲氧基-4-羟基-苯丙酮(5)、桂皮酸(6)、丁香脂素(7)、二十四亚甲基环阿尔廷醇(8)、麦角甾醇过氧化物(9)、β-谷甾醇(10)。结论:其中,化合物6、9为首次从石仙桃属植物中分离得到,化合物4、5、7为首次从该植物中分离得到。

细叶石仙桃的化学成分

目的:研究细叶石仙桃Pholidota cantonensis化学成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、Chro- matorex ODS柱色谱法分离化合物,运用波谱学和理化方法鉴定结构。结果:分离得到4个化合物:pholidonone(1),ephemeranthoquinone(2),orchinol(3),batatasinⅢ(4)。结论:4个化合物均为首次从细叶石仙桃中分离得到,化合物1为新化合物。

云南石仙桃的化学成分及其抑制NO生成的作用

目的 研究云南石仙桃全草的化学成分,并通过测定所得化合物抑制大鼠巨噬细胞中NO的生成量,以确定云南石仙桃中抑制NO生成的活性成分.方法 采用多种柱色谱法进行分离纯化,并根据理化常数和光谱分析进行结构鉴定.利用微板紫外比色法,体外测定各化合物对脂多糖（LPS）和γ-干扰素（IFN-γ）诱导的RAW 264.7大鼠巨噬细胞NO的生成量.结果 分离得到了7个化合物,分别为反式-3,3＇,5-三羟基-2＇-甲氧基二苯乙烯（trans-3,3＇,5-trihy-droxy-2＇-methoxystilbene,Ⅰ）、顺式-3,3＇-二羟基-5-甲氧基二苯乙烯（cis-3,3＇-dihydroxy-5-methoxystilbene,Ⅱ）、反式-3,3＇,5-三羟基二苯乙烯（trans-3,3＇,5-trihydroxystilbene,Ⅲ）、3,3＇-二羟基-5-甲氧基联苄（3,3＇-dihydroxy-5-methoxybibenzyl,batatasin-Ⅲ,Ⅳ）、3,4＇-二羟基-3＇,5-二甲氧基联苄（3,4＇-dih州roxy-3＇,5-dimethoxybibenzyl,gigantol,Ⅴ）、3,3＇,5-三羟基联苄（3,3＇,5-trihydroxybibenzyl,Ⅵ）、2,7-二羟基-4-甲氧基-9,10-二氢菲（贝母兰宁,2,7-dihydroxy-4-methoxy-9,10-dihydrophenanthrene,coelonin,Ⅶ）.结论 化合物Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ具有较强的抑制大鼠巨噬细胞NO生成的作用.化合物Ⅰ和Ⅱ为新化合物,化合物Ⅲ～Ⅶ为首次从该属植物中分离得到.

细叶石仙桃无菌播种与快速繁殖技术研究初报

为解决细叶石仙桃人工栽培种苗短缺问题,以细叶石仙桃蒴果为材料,应用植物组织培养技术,筛选不同阶段所需的最适培养基。结果表明其种子可在MS+20g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂培养基上萌发,发芽率可达70%以上;MS+50g·L-1土豆+20g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂培养基有利于原球茎分化小苗,低浓度6-BA和NAA组合适合原球茎增殖与芽的分化;在1/2MS+0.5mg·L-1 NAA+20g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂培养基上生根率达100%,通过以上系列培养基的培养可获得完整植株。

3种石斛属植物和细叶石仙桃的红外光谱分析和鉴定

利用傅里叶红外光谱仪和OMINI采样器直接迅速地测定3种石斛属常用原料药植物和常用伪品细叶石仙桃的红外光谱。结果表明,细叶石仙桃与石斛属组3种植物茎叶的红外光谱图存在较大差异,亲缘关系较远,而石斛属组内种间红外光谱图的差异较小。其中,铁皮石斛茎的特征峰为1 254、1 416、1 5453、365 cm-1等,铁皮石斛叶的特征峰为914、1 061 cm-1等。研究表明,铜皮石斛与铁皮石斛具有相似的红外光谱图,它可作为药用石斛品种代用品,而细叶石仙桃则不能作为药用石斛的代用品。

云南石仙桃氯仿萃取物活性部位对人肝癌细胞HepG2的周期抑制作用

目的通过体外实验研究云南石仙桃氯仿萃取物活性部位对人肝癌细胞株HepG2的细胞增殖抑制作用,并进一步研究其作用机理。方法采用噻唑兰(MTT)比色法测定对HepG2细胞生长增殖的影响;采用流式细胞仪技术和蛋白质电泳技术检测对HepG2细胞的细胞周期及相应的细胞周期蛋白表达的影响。结果云南石仙桃氯仿层活性部位通过下调周期蛋白Cyclin B1及其蛋白激酶p34cdc2的表达将HepG2细胞阻滞在G2/M期。结论云南石仙桃氯仿层活性部位对人肝癌细胞HepG2的细胞周期具有阻断作用。

细叶石仙桃挥发油成分的GC-MS分析

[目的]分析细叶石仙桃挥发油成分。[方法]采用水蒸气蒸馏法提取细叶石仙桃的挥发油成分,利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对其成分进行分析鉴定,并采用峰面积归一化法测定各成分的相对含量。[结果]共分离出31个色谱峰,并鉴定出其中18种化学成分,占化合物检出总量的88.56%,化合物类型包括脂肪族类、芳香族类及萜类,其中最主要的挥发油成分是棕榈酸(49.54%)。[结论]该研究首次鉴定出细叶石仙桃挥发油的化学成分,为进一步研究其活性成分提供了依据。

细叶石仙桃不同提取物体外抑菌作用的研究

目的研究细叶石仙桃醇提物不同萃取部位的体外抗菌活性。方法采用试管稀释法测定细叶石仙桃不同极性提取物的最低抑菌浓度（MIC）,用琼脂扩散法测定其抑菌圈的大小。结果细叶石仙桃不同极性提取物对白假丝酵母菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、消化链球菌的抑制作用明显。细叶石仙桃提取物对革兰阳性菌和白假丝酵母菌MIC范围为80～120 mg/mL,对革兰阴性菌的MIC范围为100～160 mg/mL。正丁醇萃取部分抑菌活性最强。结论细叶石仙桃提取物在体外有较好的抗菌活性。

细叶石仙桃地上部分脂溶性成分GC-MC分析

目的:对细叶石仙桃地上部分脂溶性成分进行初步研究。方法:冷浸法提取细叶石仙桃地上部分,分离出其脂溶性成分,采用气相色谱-质谱联用技术检测其化学成分。结果:从细叶石仙桃地上部分分离鉴定出19个化学成分,占色谱总馏分出峰面积的99.99%。结论:脂溶性成分有烯烃(11.07%)、脂肪酸酯(60.81%)和烷烃(28.11%)。

闽产细叶石仙桃显微鉴别及总氨基酸含量测定

目的:对闽产细叶石仙桃进行生药鉴定,测定其总氨基酸的含量。方法:采用常规显微鉴别方法,对细叶石仙桃的根、根状茎、假鳞茎、叶等显微特征进行对比研究,用紫外分光光度法测定细叶石仙桃中总氨基酸含量。结果:确定了细叶石仙桃的原植物形态、药材性状和不同器官显微组织构造的鉴别特征明显。规定药材中总氨基酸不得少于0.4%。结论:该研究可为细叶石仙桃提供科学准确的性状和显微鉴别特征,同时也为其药材开发利用和质量评价提供依据。

壮药细叶石仙桃的指纹图谱研究

目的:建立壮药细叶石仙桃化学成分的特征性指纹图谱研究方法和其化学成分特征性指纹图谱,用以鉴别壮药细叶石仙桃要的真伪优劣。意义:为中药的临床使用提供保障,减少中药材市场的混乱,为壮药细叶石仙桃的真伪优劣鉴别研究提供科学的参考依据。方法:应用Agilent 1260高效液相色谱仪测定,用80%甲醇提取,料液比为1:32,超声1.5h,色谱柱为Agilent5 TC-C18(2),进样量为10μL,柱温30℃,流动相为乙睛-0.4%磷酸,梯度洗脱,检测时间为58min,在280nm波长下以绿原酸为参照峰对广西区内及区外(广东韶关)10个不同产地的细叶石仙桃进行测定。创建细叶石仙桃化学成分的特征性指纹图谱,并按照其图谱的共有模式,标定7个共有峰。然后,采用指纹图谱相似度评价系统和SPSS 22.0对壮药细叶石仙桃化学成分的特征性指纹图谱进行相似度评价和聚类分析。结果:获得壮药细叶石仙桃化学成分特征性指纹图谱,并比对出没食子酸、绿原酸、丁香醛三个色谱峰,得出壮药细叶石仙桃的聚类分析图谱和。结论:运用HPLC指纹图谱的研究方法,能够明显鉴别壮药细叶石仙桃和劣质伪岳药材,并能依据其特征性化学成分的指纹图谱鉴别壮药细叶石仙桃的产地,本研究方法可为壮药细叶石仙桃的真伪优劣鉴别研究提供参考依据。

云南石仙桃辅助化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的探讨云南石仙桃辅助化疗治疗晚期非小细胞肺癌的疗效。方法将120例经病理检查确诊的晚期非小细胞肺癌患者随机分为对照组40例和治疗A组40例、治疗B组40例。对照组采用标准的GP方案进行化疗,3~4周为1个治疗周期,共进行2个周期的治疗;治疗A组及B组在对照组治疗方案的基础上加用云南石仙桃进行治疗,也进行2个周期的治疗。治疗后分别观察比较两组的近期疗效、中医临床主要证候变化及化疗毒副反应情况。结果治疗后,对照组和治疗A组及B组完全缓解率、部分缓解率分别为：12.5%、30.0%和25.0%、45.0%及22.5%、42.5%,并且治疗A组、B组及对照组结果存在明显差异（P〈0.05）。在改善临床症状,提高患者生存质量,减轻化疗毒副反应方面,治疗A组及B组比对照组更明显。结论针对晚期非小细胞肺癌,采用化疗结合云南石仙桃辅助治疗的方法明显优于单纯的化疗。

细叶石仙桃全草的化学成分研究

目的:研究细叶石仙桃的化学成分。方法:采用多种色谱方法对细叶石仙桃进行分离纯化,并通过波谱方法及核对文献鉴定化合物结构。结果:从细叶石仙桃乙酸乙酯部位分离得到8个化合物,分别鉴定为:methyl syringate(1)、isopimpinellin(2)、(24S)-豆甾-4-烯-3-酮(3)、香草醛(4)、邻苯二甲酸二丁酯(5)、欧前胡素(6)、bis(2-ethylhexyl)benzene-1,2-dicarboxylate(7)、dehydrovomifoliol(8)。结论:所有化合物均为首次从石仙桃属植物中分离得到。

细叶石仙桃石油醚部位自由基清除活性研究

[目的]研究细叶石仙桃提取物石油醚部位对自由基的清除活性。[方法]采用石油醚溶剂得到细叶石仙桃石油醚提取物,并研究其对DPPH自由基和羟自由基的清除能力。以芦丁为对照品,测定其总黄酮含量。[结果]细叶石仙桃石油醚提取物对DPPH清除率在高药液浓度时达到最大值,对羟自由基清除率最高可达到100%。[结论]细叶石仙桃石油醚提取物具有优异的自由基清除活性。

细叶石仙桃乙醇提取物抗氧化活性研究

研究细叶石仙桃乙醇提取物的抗氧化能力,并测定其总酚含量,研究其抗氧化活性和总酚含量之间的关系。采用冷浸法得到细叶石仙桃乙醇提取物,并采用ABTS体系和还原能力体系研究其抗氧化效果。细叶石仙桃乙醇提取物对ABTS自由基清除能力最高可达到98.9%。细叶石仙桃乙醇提取物具有良好的抗氧化性能。

细叶石仙桃乙酸乙酯部位自由基清除活性研究

测定细叶石仙桃乙酸乙酯部位总黄酮含量,并测定其自由基清除活性,探究两者之间的关系。以芦丁为对照品测定细叶石仙桃乙酸乙酯部位总黄酮含量,并采用DPPH自由基和羟自由基体系评价其对自由基的清除能力。细叶石仙桃乙酸乙酯部位总黄酮含量为39. 6 mg/g,其对DPPH自由基最高可达到85. 1%,对羟自由基清除率在较低提取物浓度即达到100%。细叶石仙桃乙酸乙酯部位具有优异的自由基清除活性。