三种鳞伞属(Pholiota)真菌的菌丝生物学特性初步研究

研究了多脂鳞伞（Pholiota adiposa）、翘鳞伞（P．squarosa）和多脂翘鳞伞（P．squarroso-adiposa）三种鳞伞属真菌的菌丝生物学特性。结果表明，多脂鳞伞和翘鳞伞菌丝生长的最适碳源为麦芽糖；多脂翘鳞伞最适碳源为蔗糖和麦芽糖。多脂鳞伞和翘鳞伞最适氮源均为牛肉膏和酵母膏；而多脂翘鳞伞最佳氮源为酵母膏和蛋白胨。三种菌丝生长的最适温度均为25℃。多脂鳞伞在pH值6-8均生长良好，最适pH值7-8，偏碱性；翘鳞伞和多脂翘鳞伞最适pH值均为6-7。

翅鳞伞深层发酵胞外多糖优化研究

采用Plackett Burman设计 (Plackett BurmanDesign ,P B)对影响翅鳞伞 [Pholiotasquarrosa (Pers.exFr.)Quel.]AS 5 2 4 5菌株发酵产糖的内在和外在相关因素进行了筛选 ,所选取的 2 0个相关因素为葡萄糖、果糖、麦芽糖、酵母膏、胰蛋白胨、KH2 PO4 、K2 HPO4 、(NH4 ) 2 SO4 、NaNO3、FeSO4 、MgSO4 、MnCl2 、ZnCl2 、FeCl3、CuSO4 ·5H2 O、维生素B1 、起始pH、发酵温度、时间和装液量。在此基础上 ,再采用响应曲面法 (ResponseSurfaceMethodology ,RSM)对影响发酵产糖的内在关键影响因素酵母膏、果糖、MgSO4 、麦芽糖、ZnCl2 和发酵基质起始pH值的最佳水平范围作了进一步的研究与探讨 ,通过对二次多项回归方程求解得知 ,在上述自变量分别为 6 0g L、11 5g L、0 5g L、9 6g L、38 6mg L和 5 3时 ,胞外多糖最大预测值为 876 32 μg mL发酵醪 ,此预测可信度不仅被统计分析所验证 ,也被实践所证实。

翅鳞伞培养条件响应面法优化研究

在Plackett Burman实验设计结果基础上 ,采用响应曲面法 (ResponseSurfaceMethodolo gy,RSM)对影响翅鳞伞 (Pholiotasquarrosa)AS 5 2 4 5发酵胞外多糖与菌丝生长的关键影响因子最佳水平范围进行了研究和探讨。通过对胞外多糖曲面方程以及菌丝干重二次多项回归方程求解得知 ,在自变量培养温度 ,培养时间和装液量分别为 2 8 0 7℃、 8 79d和 68 5 1mL时 ,翅鳞伞胞外多糖的最大预测值为 1 0 62 69μg·mL 1发酵醪 ;2 7 60℃、 9 42d和 5 4 2 0mL时 ,该菌菌丝浓度可达 1 1 32mg·mL 1发酵醪 ;而在 2 7 62℃、 9 1 9d和 64 1 0mL的工艺条件下 ,每毫升发酵醪则可同时获得 1 ,0 5 0 64μg的胞外多糖和 1 1 1 0mg的干菌丝。上述预测值不仅被统计学方法所验证 。

翅鳞伞AS5．245胞内粗多糖抗肿瘤作用的研究

初步研究了翅鳞伞AS5.245胞内粗多糖的抗肿瘤活性。从翅鳞伞AS5.245发酵的菌丝体中分离提取得到胞内粗多糖CIP,以KM系Heps荷瘤小白鼠为实验模型,用免疫器官重量法,进行高、中、低剂量CIP的腹腔注射实验。结果表明,CIP能明显提高小白鼠的免疫功能,具有较高的抑瘤活性,并表现出一定的剂量效应;中、高剂量组与空白对照组相比较,小白鼠所有脏器指数均有显著增加(p<0.05);低剂量组与空白对照组相比较,胸腺重及其指数有显著增加(p<0.01)。说明翅鳞伞AS5.245胞内多糖具有抗肿瘤和增强荷瘤小鼠免疫功能的作用。

翘鳞伞菌丝体生长培养研究

为了提高生产效率、缩短翘鳞伞的生长周期,对翘鳞伞菌丝体的生长培养条件进行优化。单因素试验以及Plackett-Burman试验结果表明:翘鳞伞菌丝体生长的最适碳源为麦芽糖,最适氮源为酵母粉,最适pH为5,最适温度为23℃;影响翘鳞伞生长的主要因素为麦芽糖、酵母粉和K2HPO4。通过最陡爬坡试验和正交试验确定翘鳞伞菌丝生长的最优培养基为:35g/L麦芽糖+1.5g/L酵母粉+0.5g/L K2HPO4+0.5g/L KH2PO4+0.5g/L MgSO4。在最佳培养条件下,菌丝体菌落直径由6.11cm增加到7.41cm。

翘鳞伞胞外多糖的抗肿瘤活性和对荷瘤小鼠免疫功能的影响

为考察翘鳞伞胞外多糖对荷瘤小鼠体内肿瘤的抑制及其免疫功能的影响;采用无机陶瓷膜从翘鳞伞(Pholiota squarrosa)AS 5.245液体发酵醪中分离得到的胞外粗多糖(Crude Extracellular Polysaccharide,CEP),以荷瘤S180小鼠为试验对象,用免疫器官重量法,进行高、中、低剂量CEP的腹腔注射试验;试验结果表明,CEP具有较高的抑瘤活性,并呈剂量相关性;中、高剂量组与对照组相比较,小鼠胸腺指数和脾脏指数均有显著增加(P<0.05);与低剂量组相比较,亦均有显著增加;表明CEP可以增强荷瘤小鼠的免疫功能对肿瘤进行抑制。

翘鳞伞胞外多糖无机陶瓷膜分离工艺研究

采用无机陶瓷膜分离提取翘鳞伞胞外多糖,考察不同孔径的膜对膜过滤的影响,优化膜通量影响因素,获得超滤膜分离最佳工艺条件。以微滤处理后的翘鳞伞发酵液为研究对象,测定了5种不同孔径超滤膜的膜通量以及多糖截留率;在5种陶瓷超滤膜中,截留分子量为50kDa的超滤膜最适合于翘鳞伞胞外多糖发酵液分离浓缩,当压力为0.1MPa～0.4MPa,温度为20℃～40℃时,压力和温度的提高均有利于超滤膜通量的增大;选择50kDa的超滤膜在0.3MPa、30℃的操作条件下,膜通量以及多糖截留率最佳。

翘鳞伞胞外多糖液体培养条件响应曲面法优化研究

采用Plackett-Burman设计法对影响翘鳞伞(Pholiota squarrosa)AS5.245深层发酵产胞外多糖的内在和外在因素进行了筛选,所选取的6个相关因素为:初始pH、培养温度、发酵时间、装液量、接种量、摇床转速。在此基础上,再采用响应曲面法(Response Surface Methodology,RSM)对影响翘鳞伞发酵胞外多糖的关键影响因素培养温度、发酵时间和接种量的最佳水平范围作了进一步的研究与探讨,通过对二次多项回归方程求解得知,在上述自变量分别为培养温度26.67℃、发酵时间7.44d和接种量9.60%时,胞外多糖产量的最大预测值为910.22μg/ml。

翘鳞伞驯化栽培研究

驯化研究表明,翘鳞伞（Pholiota squarrosa）可在以木屑、棉籽壳为主料,麸皮、玉米面、石膏、磷酸二氢钾为辅料的罐头瓶培养料上正常生长发育,一年两次栽培,接种到子实体采收约120~130 d,生物学效率达53%。

翘鳞伞胞外多糖无机陶瓷膜分离提取工艺优化研究

【研究目的】采用无机陶瓷膜分离提取翘鳞伞胞外多糖，考察不同孔径的膜对膜过程妁影响，优化膜通量影响因素，获得超滤膜分离最佳工艺条件；【方法】以微滤处理后的翘鳞伞发酵液为研究对象，测定了5种不同孔径超滤膜的膜通量以及多糖截留率，采用L9（3^4）正交实验优化了超滤工艺条件；【结果】在5种陶瓷超滤膜中，截留分子量为50kDa的超滤膜最适合于翘鳞伞胞外多糖发酵液分离浓缩，当压力在0．1～0．4MPa，温度在20～40℃时，压力和温度的提高均有利于超滤膜通量的增大，而料液质量浓度的增加对多糖截留率影响较小．【结论】选择50kDa的超滤膜在压力0．3MPa、温度40℃、料液质量浓度0．8g/L的条件下，其膜通量以及多糖截留率最佳。

食药用真菌翅鳞伞菌丝体蛋白活性的研究

对翅鳞伞菌丝体的胞内粗蛋白进行分离、纯化、筛选,获得了抗水稻纹枯病菌的翅鳞伞纯化菌丝体蛋白PSPB-2。通过荧光显微镜观察PSPB-2对人肺癌细胞株(A549)的影响,发现PSPB-2会引起A549出现典型的细胞凋亡现象。进一步研究发现PSPB-2有限制性核酸内切酶的活性。说明菌丝体蛋白PSPB-2具有抗真菌作用的同时又具有抗肿瘤作用。