含吡啶的二芳醚类化合物的合成及其PDE4B抑制活性

磷酸二酯酶4B(PDE4B)是抗炎药物作用的重要靶标,以三嗪类PDE4B抑制剂A33为先导化合物,设计并合成了20个二芳醚类化合物.用1H NMR、^(13)C NMR等对化合物进行了结构表征,并对这些化合物进行了PDE4B抑制活性测试.结果表明:化合物3和4a表现出较好的PDE4B抑制活性,展现出它们作为进一步优化和开发更有效PDE4B抑制剂的先导化合物的潜力.

BVDV非结构蛋白NS4B的结构分析及其蛋白表达与鉴定

NS4B是牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的非结构蛋白,为研究BVDV在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,对ns4b进行了结构分析、表达载体构建及蛋白表达。采用Prot-Param、TExpasy和SignalP-4.1等软件分析NS4B蛋白的氨基酸组成、疏水性和空间结构。根据Genebank上公布的BVDVns4b基因序列设计引物,利用PCR方法获得ns4b基因片段,连接到p3×Flag-CMV10表达载体上,构建重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,经双酶切与测序鉴定正确后,将p3×FlagCMV10-ns4b转染到HEK-293T细胞中,利用Western blot检测NS4B蛋白的表达。结果表明BVDV NS4B蛋白分子量为38.4 kDa,不存在信号肽,有49个磷酸化位点和6个糖基化位点,是一种主要由α-螺旋和无规则卷曲结构组成的疏水性稳定蛋白。成功构建了重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,并且p3×Flag-CMV10-ns4b在HEK-293T细胞中成功表达,为今后研究NS4B蛋白在BVDV感染宿主细胞及其免疫逃逸机制奠定了基础。

miR-518b靶向调控LAPTM4B在稽留流产发病中的作用

目的:探讨miR-518b在稽留流产发病中的作用。方法:①利用双荧光素酶报告实验验证miR-518b与LAPTM4B的靶向关系。②HTR8/SVneo细胞分别转染miR-518b mimic及其阴性对照(NC)质粒,24 h后实时荧光定量PCR法及Western blot法检测细胞中miR-518b、LAPTM4B mRNA及蛋白的表达。③HTR8/SVneo细胞分别转染miR-518b mimic NC、miR-518b mimic和miR-518b mimic+LAPTM4B过表达质粒24 h后,与人脐静脉血管内皮细胞混合,行成管实验。④收集22例稽留流产患者及24例同期正常妊娠并自愿行人工流产者(对照组)的绒毛组织,实时荧光定量PCR法检测miR-518b、LAPTM4B mRNA,免疫组化法检测微血管密度(MVD),Western blot法检测LAPTM4B蛋白的表达。结果:①双荧光素酶报告实验证实miR-518b与LAPTM4B存在靶向关系。②与miR-518b mimic NC组比较,miR-518b mimic组细胞中LAPTM4B蛋白和mRNA表达水平均下降(P<0.05)。③miR-518b mimic NC组、miR-518b mimic组及miR-518b mimic+LAPTM4B过表达质粒组新生小管数分别为(31.00±1.00)、(16.33±2.08)、(32.67±2.08),3组比较,差异有统计学意义(P<0.001);miR-518b mimic组小于NC组和miR-518b mimic+LAPTM4B过表达质粒组(P<0.05)。④稽留流产组绒毛组织中miR-518b表达高于对照组,LAPTM4B mRNA、蛋白表达水平及MVD均低于对照组(P<0.05)。稽留流产组miR-518b与LAPTM4B mRNA的表达、MVD呈负相关(r=-0.546,-0.439,P<0.001);LAPTM4B蛋白表达与MVD呈正相关(r=0.686,P<0.001)。结论:miR-518b可能通过调控LAPTM4B的表达,抑制绒毛滋养层细胞血管成管能力,参与稽留流产的发病。

CUL4B、TRPM2在胰腺癌组织中的表达和临床意义

目的探讨胰腺癌组织中E3泛素连接酶Cullin4B(CUL4B)、人瞬时受体电位M2(TRPM2)的表达及临床意义。方法收集2019年3月—2020年3月在西安交通大学医学院附属3201医院接受手术治疗胰腺癌患者86例的癌组织和癌旁组织。采用免疫组织化学检测组织中CUL4B、TRPM2蛋白表达。采用实时荧光定量PCR检测组织中CUL4B、TRPM2 mRNA水平。Spearman秩相关分析CUL4B与TRPM2蛋白表达的关系。Kaplan-Meier曲线分析CUL4B、TRPM2蛋白表达对患者预后的影响。Cox比例风险模型分析胰腺癌预后影响因素。结果胰腺癌组织中CUL4B、TRPM2蛋白阳性率及mRNA基因的相对表达量高于癌旁组织(χ^(2)/t=70.245、60.224、15.741、10.976,P均<0.001)。胰腺癌组织中CUL4B与TRPM2蛋白表达呈显著正相关(r=0.720,P<0.001)。TNM分期ⅡB~Ⅲ期、淋巴结转移胰腺癌中CUL4B、TRPM2蛋白阳性率高于Ⅰ~ⅡA期、无淋巴结转移癌组织(χ^(2)=16.511、14.834,15.576、15.007,P均<0.001)。CUL4B阳性组和阴性组3年总生存率分别为9.68%(6/62)、41.67%(10/24),TRPM2阳性组和阴性组3年总生存率分别为8.33%(5/60)、42.31%(11/26),CUL4B阳性组、TRPM2阳性组患者3年累积生存率低于CUL4B阴性组、TRPM2阴性组患者(Log-Rankχ^(2)/P=9.933/0.002、11.102/0.001)。TNM分期ⅡB~Ⅲ期、淋巴结转移、CUL4B阳性、TRPM2阳性是影响胰腺癌不良预后的独立危险因素[HR(95%CI)=1.781(1.199~2.646),1.962(1.172~3.285),2.482(1.445~4.263),1.733(1.223~2.457)]。结论胰腺癌组织中CUL4B、TRPM2表达升高,两者表达与胰腺癌不良临床病理特征有关,是胰腺癌预后相关肿瘤标志物。

MeRIP-qPCR技术检测RNA m^(6)A甲基化修饰对t(8;21)AML细胞中KDM4B基因表达的调控作用

目的:通过MeRIP联合逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术,证明WTAP介导的RNA m^(6)A修饰对伴t(8;21)急性髓系白血病(AML)细胞中KDM4B基因的直接调控作用。方法:采用靶向WTAP或KDM4B基因的短发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体沉默t(8;21)AML细胞系Kasumi-1和SKNO-1中WTAP或KDM4B基因表达,以转染随机打乱序列(scramble)的shRNA的细胞为对照。用超纯RNA提取试剂盒(DNaseⅠ)提取细胞RNA,Magna MeRIP^(TM)m^(6)A Kit试剂盒富集甲基化修饰片段,并通过RT-qPCR检测m^(6)A甲基化修饰的RNA区域;采用蛋白免疫印迹实验(Western blot)和逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测细胞中WTAP、KDM4B蛋白和mRNA的表达水平。采用克隆形成实验检测细胞体外克隆形成能力。结果:沉默Kasumi-1细胞中WTAP的表达后,m^(6)A甲基化修饰在KDM4B mRNA 3’UTR的富集程度显著下降(P<0.01),沉默Kasumi-1和SKNO-1细胞中WTAP的表达可显著抑制KDM4B蛋白(P<0.001)和mRNA表达水平(Kasumi-1:P<0.001;SKNO-1:P<0.01)、细胞体外克隆形成能力下降(Kasumi-1:P<0.001;SKNO-1:P<0.01)。结论:t(8;21)AML细胞系中,WTAP通过调控KDM4B基因mRNA 3’UTR的m^(6)A修饰调控KDM4B的表达,沉默KDM4B表达可以抑制t(8;21)AML细胞增殖。

Multi-Plate Microbial Monitoring Terminal Based on Raspberry Pi 4B

We utilized Raspberry Pi 4B to develop a microbial monitoring system to simplify the microbial image-capturing process and facilitate the informatization of microbial observation results.The Raspberry Pi 4B firmware,developed under Python on the Linux platform,achieves sum verification of serial data,file upload based on TCP protocol,control of sequence light source and light valve,real-time self-test based on multithreading,and an experiment-oriented file management method.The system demonstrated improved code logic,scheduling,exception handling,and code readability.

基于RaspberryPi4b的智能化农作物生长数据采集处理系统

智慧农业是科技创新与农业的融合。在大数据时代,物联网、人工智能和计算机技术的发展,对传统农业的生产和管理方式进行了改革,推动了农业的信息化和智能化。目前,一个待解决的重要问题是如何运用科技手段实时了解农作物的生长状况。在此介绍了一个以Raspberry Pi 4b为核心控制节点的智能化农作物生长数据采集处理系统。该系统实现了对农作物远程环境的监控和管理,包括对温度、湿度、光照强度和二氧化碳含量等农作物生长必要影响因素的监测。同时,它还实现了对农作物的科学管理和对环境数据的统计分析。

弥漫大B细胞淋巴瘤内TNFAIP3、PDE4B对肿瘤细胞凋亡、侵袭的影响

目的:研究弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)内肿瘤坏死因子诱导蛋白3基因(TNFAIP3)、磷酸二酯酶4B(PDE4B)对肿瘤细胞凋亡、侵袭的影响。方法:选择2014年8月~2017年7月期间在广州四二一医院诊断为弥漫大B细胞淋巴瘤的68例患者作为研究的DLBCL组,选择同期因淋巴结肿大在广州四二一医院接受淋巴结穿刺活检且诊断为反应性淋巴结增生的34例患者作为对照组。测定淋巴结组织中TNFAIP3、PDE4B以及凋亡基因、侵袭基因的表达量。结果:DLBCL组病灶组织中TNFAIP3、PTEN、PTPL1、Bax的蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05),PDE4B、c-myc、AURKA、AURKB、PLK1、Ets-1、β-catenin、MMP7、MMP9、CD44的蛋白表达量显著高于对照组(P<0.05);DLBCL病灶组织中PTEN、PTPL1、Bax的蛋白表达与TNFAIP3的蛋白表达量呈正相关,与PDE4B的蛋白表达量呈负相关;c-myc、AURKA、AURKB、PLK1、Ets-1、β-catenin、MMP7、MMP9、CD44的蛋白表达量与TNFAIP3的蛋白表达量呈负相关,与PDE4B的蛋白表达量呈正相关。结论:弥漫大B细胞淋巴瘤内TNFAIP3的低表达以及PDE4B的高表达能够拮抗肿瘤细胞凋亡、促进肿瘤细胞侵袭。

鞘内注射PDE4B-siRNA对L5脊神经结扎大鼠痛觉高敏的影响

目的观察鞘内注射针对磷酸二酯酶4B(PDE4B)基因的小干扰RNA(siRNA)对L5脊神经结扎(SNL)大鼠的热痛觉及机械痛觉高敏的影响。方法雄性SD大鼠70只,随机均分为假手术组(Sham组)、生理盐水组(NS组)、单纯载体组(V组)、错配siRNA组(siRNA-M组)和PDE4B-siRNA组(siRNA-B组),分别于神经结扎术后即刻以及术后1、3、5、7d鞘内注射生理盐水、生理盐水、LipofectamineRNAiMAX、错配siRNA 2μg和PDE4B-siRNA 2μg,容量均为10μl。PDE4B-siRNA、错配siRNA与载体均在注射前30min混匀。于术前1d及术后2、4、6、8d分别测定五组大鼠的机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL);术后4、8d行为学测试结束后每组各处死6只大鼠,取腰段脊髓,采用实时定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)和western bolt分别测定PDE4B的mRNA和蛋白表达。结果与术前1d比较,术后2、4、6、8dNS组、V组、siRNA-M组和siRNA-B组大鼠MWT明显缩短、TWL明显减小(P<0.05)。与NS组比较,术后2、4、6、8dsiRNA-B组大鼠MWT明显延长、TWL明显增加(P<0.05)。与Sham组比较,术后4、8dNS组、V组、siRNA-M组、siRNA-B组大鼠脊髓组织的PDE4B mRNA、PDE4B蛋白表达升高(P<0.05)。与NS组比较,术后4、8dB组大鼠脊髓PDE4B mRNA、PDE4B蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论鞘内注射PDE4B-siRNA可显著抑制L5SNL大鼠腰段脊髓PDE4B的mRNA和蛋白表达,有效缓解机械和热痛觉高敏。

PDE4B、BCL-2在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及其意义

目的探讨PDE4B、BCL-2在不同类型B细胞非霍奇金淋巴瘤(B cell non-Hodgkin Lymphoma,B-NHL)中的表达及其意义。方法采用免疫组化方法检测93例不同类型B-NHL和10例反应性增生淋巴结中PDE4B、BCL-2的表达,并进行对比分析。结果 PDE4B、BCL-2在不同类型B-NHL中均有不同程度的表达,PDE4B在淋巴浆细胞淋巴瘤(LPL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、边缘区淋巴瘤(MZL)表达较高;伯基特淋巴瘤(BL)均为阴性表达,各组间比较无统计学意义(P>0.05)。BCL-2在FL与弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、淋巴母细胞性淋巴瘤(LBL)、黏膜相关淋巴组织结外边缘区淋巴瘤(MALT)各组表达比较有统计学意义(P<0.05)。PDE4B在DLBCL的GCB亚型、non-GCB亚型阳性表达分别为61.54%(16/26)3,1.43%(11/35),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PDE4B、BCL-2在不同类型B-NHL中均有不同程度的表达,二者在B-NHL的发生、发展中可能起着一定的作用。PDE4B表达与B-NHL的恶性程度和侵袭性可能存在负相关;BCL-2是诊断FL的一个重要指标。

H3K36me3及其表观遗传修饰蛋白质SETD2和KDM4B在结直肠癌中的临床病理意义

目的:组蛋白修饰是表观遗传调控的一种重要形式。其中,组蛋白甲基化是染色质状态的关键决定因素。组蛋白H3第36位赖氨酸三甲基化产物(histone H3 trimethylation at lysine 36,H3K36me3)可以介导多种转录相关事件,有助于DNA损伤修复。组蛋白赖氨酸三甲基转移酶SET结构域2(SET domain containing 2,SETD2)、赖氨酸特异性去甲基化酶4B(lysine-specific demethylase 4B,KDM4B)分别是H3K36me3甲基转移酶及去甲基酶,SETD2失活及KDM4B活化均可下调H3K36me3水平从而促进肿瘤的发生和发展。本研究主要探讨H3K36me3、SETD2、KDM4B在结直肠癌中表达的临床病理意义。方法:收集2018年10月至2020年10月就诊于福建中医药大学附属人民医院的80例结直肠癌患者术后石蜡包埋的组织样本。采用免疫组织化学染色法检测H3K36me3、KDM4B、SETD2及4种错配修复(mismatch repair,MMR)蛋白质(MSH2、MSH6、MLH1、PMS2)在结直肠癌及正常肠黏膜中的表达水平。采用多重荧光PCR-毛细管电泳检测结直肠癌及正常肠黏膜的微卫星状态,分为微卫星高度不稳定性(microsatellite instability-high,MSI-H)组与微卫星稳定(microsatellite stable,MSS)组,检测2组结直肠癌中H3K36me3及SETD2、KDM4B、MMR蛋白质表达情况并分析其临床病理意义。结果:STED2、H3K36me3表达与结直肠癌发生呈负相关(分别为r=-0.745,P<0.001;r=-0.160,P<0.05),KDM4B表达与结直肠癌发生呈正相关(r=0.660,P<0.001)。不同的患者性别、年龄,不同的肿瘤发生部位、大体类型、肿瘤最大径、浸润深度、淋巴结转移的临床病理参数之间SETD2及H3K36me的表达差异均无统计学意义(均P>0.05),除在不同的肿瘤浸润深度KDM4B的表达差异有统计学意义(χ^(2)=0.349,P<0.05)外,在其他临床病理参数上KDM4B的表达差异均无统计学意义(均P>0.05)。结直肠癌样本中检测出14例为MSI-H结直肠癌、66例为MSS结直肠癌;SETD2及H3K36me3的表达均与结直肠癌微卫星状态相关(分别为χ^(2)=3.916,P<0.05及χ^(2)=41.608,P<0.001);KDM4B的表达与结直肠癌微卫星状态无明显相关性(χ^(2)=0.067,P>0.05)。SETD2及H3K36me3表达与MSI-H结直肠癌发生呈负相关(分别为r=-0.221,P<0.05及r=-0.721,P<0.001)。KDM4B表达与MSS结直肠癌发生呈正相关(r=0.200,P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示13例(16.25%)为dMMR,67例(83.75%)为pMMR;PCR-毛细管电泳验证结果显示14例为MSI-H结直肠癌,其中13例为dMMR,1例为pMMR;66例为MSS结直肠癌。免疫组织化学染色与多重荧光PCR-毛细管电泳检测结果具有强一致率(Kappa=0.955)。结论:H3K36me3及其表观遗传修饰蛋白质SETD2和KDM4B蛋白质的不同表达程度与结直肠癌发生、发展具有相关性。

circPDE4B调控miR-7对骨关节炎中软骨ECM降解和细胞凋亡的影响

目的探讨circPDE4B调控miR-7对骨关节炎(osteoarthritis,OA)中软骨细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解和凋亡的影响及机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测circPDE4B和miR-7在OA软骨组织和软骨细胞中的表达水平。在OA软骨细胞中分别转染oe-NC和oe-circPDE4B,或者转染si-NC、si-circPDE4B和共转染si-circPDE4B+miR-7 inhibitors后,RT-qPCR和免疫蛋白印迹(western blot,WB)检测ECM相关分子SOX9、COL2A1、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)3和MMP13的表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况。采用双荧光素酶报告基因检测circPDE4B和miR-7的结合情况。结果circPDE4B的表达水平在OA软骨组织和软骨细胞中明显低于正常软骨组织和软骨细胞(P<0.05)。过表达circPDE4B能够明显抑制OA软骨细胞的凋亡和凋亡相关分子Cleaved-caspase-3蛋白的表达水平(P<0.05)。同时,过表达circPDE4B能够明显促进SOX9和COL2A1的表达水平(P<0.05),抑制MMP3和MMP13的表达水平(P<0.05)。荧光素酶报告基因检测结果显示circPDE4B能够靶向结合miR-7(P<0.05),过表达circPDE4B能够抑制miR-7的表达(P<0.05)。circPDE4B和miR-7在OA患者软骨组织中的表达水平呈负相关(P<0.05)。共转染si-circPDE4B和miR-7 inhibitors能够反转单独转染si-circPDE4B对OA软骨细胞凋亡和软骨ECM降解的促进作用(P>0.05)。结论circPDE4B在OA软骨组织和软骨细胞中明显低表达,circPDE4B能够通过靶向结合miR-7抑制OA软骨细胞凋亡和软骨ECM降解。

HDAC9通过下调PDE4b表达参与调控小鼠心肌肥厚

目的探讨心肌肥厚性重构可能分子机制。方法选取8周龄清洁级雄性C57小鼠18只,随机分为升主动脉缩窄术(TAC)组和对照组(SHAM组),每组9只。TAC组给予升主动脉缩窄术(TAC术)构建心肌肥厚模型。SHAM组给予假手术。术后4周,利用二氧化碳窒息处死实验小鼠,剖开胸腔后分离心脏组织,用于后续实验。H&E染色观察心脏组织结构;心室/体质量指数评估心室重构情况;荧光测定法测定心脏组织中组蛋白去乙酰化酶(HDACs)活性;qPCR检测MYH7、PDE4b、HDAC4、HDAC5及HDAC9的表达水平,Western blot检测PDE4b及HDAC9蛋白表达水平,ChIP-qPCR检测HDAC9与PDE4b启动子结合水平。结果与SHAM组相比,TAC组小鼠室间隔及左室壁明显增厚,心室/体质量指数明显升高(4.48±0.18 vs 5.50±0.23)(P<0.05),心肌肥厚标志物MYH7表达明显升高(0.91±0.04 vs 1.44±0.07)(P<0.05);PDE4b表达明显降低(mRNA水平0.75±0.09 vs 0.27±0.06;蛋白水平0.67±0.11 vs 0.34±0.05)(P<0.05);肥厚心肌组织中组蛋白去乙酰化酶活性显著增加(3.24±0.32 vs 5.03±0.58)(P<0.05),HDAC9表达显著升高(mRNA水平0.85±0.08 vs 1.35±0.07;蛋白水平0.77±0.10 vs 1.25±0.05)(P<0.05),而HDAC4、HDAC5表达与SHAM组无明显差异(P>0.05);HDAC9与PDE4b启动子结合水平明显升高(1.67±0.10 vs 2.47±0.20)(P<0.05)。结论心肌肥厚中HDAC9可能参与下调PDE4b表达,进而参与心室肌肥厚性重构。

人PDE4B2全长与截短突变体的重组表达及表征

目的:比较6His-SUMO融合的人全长环核苷酸磷酸二酯酶4B2(SF-h PDE4B2)及152-528aa截短突变体(STh PDE4B2)在大肠杆菌融合表达、亲和纯化及酶学特征,以明确ST-h PDE4B2用于筛选抗炎活性h PDE4B2抑制剂的优势。方法:分别将6His-SUMO融合到人全长PDE4B2基因编码区的N端和152-528aa截短突变体N端得到SF-h PDE4B2和STh PDE4B2;大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,Ni2+-NTA亲和层析纯化,用偶联碱性磷酸酶的孔雀绿定磷法测定酶活性。结果:纯化后ST-h PDE4B2比活性接近SF-h PDE4B2的40倍,活性收率超过100倍;SDS-PAGE和6His标签免疫印迹发现纯化后2种融合蛋白都有多种带6His标签的降解片段;测定咯利普兰[(R)-Rolipram]和罂粟碱的抑制常数表明,SF-h PDE4B2对(R)-Rolipram主要为高亲和力结合构象,而ST-h PDE4B2主要为低亲和力结合构象。结论:与SF-h PDE4B2相比,ST-h PDE4B2用于筛选抗炎活性h PDE4B2抑制剂可能更有优势。

PDE4B在酒精依赖中对PKA通路的调控作用分析

探讨PDE4B介导PKA通路在酒精依赖大鼠杏仁核中的表达。方法:6周龄雄性SPF级SD大鼠32只,体重240~260g,按照随机数字表法分为空白对照组(n=8)和模型组(n=24)。模型组大鼠采用双瓶20%酒精间断饮制备酒精依赖模型,造模成功后,对模型组大鼠进行转染。蛋白印迹技术检测转染后大鼠的杏仁核区磷酸二酯酶4B(PDE4B)、cAMP依赖蛋白激酶(PKA)、环磷腺苷效应原件结合蛋白(CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)的蛋白表达水平。结果:与SD-NosiRNA组相比,SD-PDE4BsiRNA组大鼠杏仁核的PDE4B蛋白表达下降,PKA蛋白表达下降,CREB蛋白表达下降,BDNF蛋白表达下降,而SD-CtrsiRNA组大鼠杏仁核各项指标无统计学差异。结论:PDE4B介导的PKA信号通路与酒精依赖的发生与发展密切相关。

猪瘟病毒非结构蛋白NS4B与宿主蛋白相互作用的研究进展

猪瘟病毒(CSFV)是一种可感染猪只并引起典型或慢性猪瘟(CSF)的单链RNA包膜病毒,严重影响动物的健康和养猪业的经济发展。CSFV自身编码的结构蛋白和非结构蛋白可与宿主蛋白相互作用,促进病毒自身的复制、翻译和增殖,并影响病毒毒力和免疫反应等。CSFV的非结构蛋白NS4B在病毒生命周期中发挥重要作用,其自身结构上含有多种特定区域靶点,可与多种蛋白发生相互作用;其作为CSFV复制体碳价结构最重要的组成部分,还可被非结构蛋白NS3切割,在细胞内与CSFV自身蛋白或其他宿主蛋白,如核糖体蛋白侧柄亚基P1(RPLP1)、铁蛋白重链(FHC)、Rab蛋白22a(Rab22a)、脂肪酸合成酶(FASN)、线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)、肿瘤易感基因101(Tsg101)蛋白和猪指环蛋白114(pRNF114)等相互作用。本文对CSFV非结构蛋白NS4B的结构功能以及与宿主蛋白发生相互作用的研究进展进行概述,以期为CSFV致病机理研究和感染防控提供理论帮助。

探究CUL4B在结直肠癌患者来源的肿瘤类器官中调控miRNAs

目的探究CUL4B在肿瘤患者来源的结直肠癌肿瘤类器官中调控miRNAs。方法利用干扰CUL4B的和其对照的PDOs样本,进行miRNA-seq,对差异miRNAs的靶基因进行KEGG和GO等分析。利用TargetScan和miRDB 2个数据库分别预测可能受CUL4B调控的并且评分≥85分的miRNAs,结合miRNA-seq差异miRNAs进行韦恩分析。结果miRNA-seq结果显示共有41个差异miRNAs。TargetScan和miRDB两个数据库和测序数据韦恩分析发现miR495-3p、miR381-3p和miR148b-5p 3个共同交集的miRNAs。KEGG结果显示代谢通路富集的基因个数最多,溶酶体富集基因Q值最小。GO分析结果显示单有机体过程、蛋白质结合和细胞质富集基因最多。流式细胞仪检测发现干扰CUL4B的表达并不影响PDOs的细胞周期。结论CUL4B可能是通过代谢通路和溶酶体2个信号通路调控miR495-3p、miR381-3p和miR148b-5p。

基于树莓派4B的云原生Kubernetes计算集群实验设计

基于三台树莓派4B单板计算机,搭建了包含一个Master节点和两个Node节点的Kubernetes计算集群,实现了云原生应用的便捷部署、自动编排和可靠运行。首先构建微服务组件,然后基于Docker实现组件程序容器化,最后将微服务系统部署于Kubernetes集群,实现了自动伸缩、负载均衡、资源调度和可观察性等服务治理特性。该实验涵盖了云原生程序从开发到容器化、再到集群部署并提供服务的全过程,并且以低成本的树莓派4B裸金属机器为集群硬件设施,实现了完整本地物理集群的构建。学生通过该实验的学习实践,能够更好地掌握云计算集群的设计思想和实践经验,更全面地理解云原生服务的概念、原理和构建方法。

基于树莓派4B的人脸表情实时识别系统

通过搭建硬件环境、安装软件环境、数据预处理、训练模型、实时识别人脸表情等步骤,实现基于树莓派4B的人脸表情实时识别系统。以树莓派4B作为载体,所需软件为Python3.7、OpenCV、Tensorflow和Keras。采用MiniVGG13卷积神经网络模型训练模型,在树莓派上实时识别人脸表情,以实现人脸表情的分类并通过显示器展示。该系统可以应用于人机交互、智能家居等多个领域。

Effects of TNFAIP3 and PDE4B on apoptosis and invasion of tumor cells in diffuse large B cell lymphoma

Objective: To study the effects of TNFAIP3 and PDE4B on apoptosis and invasion of tumor cells in diffuse large B cell lymphoma. Methods: A total of 68 patients who were diagnosed with diffuse large B cell lymphoma in Guangzhou 421 Hospital of PLA between August 2014 and July 2017 were selected as the DLBCL group of the study, and 34 patients who accepted lymph node biopsy due to lymphadenectasis and were diagnosed with reactive lymphoid hyperplasias in Guangzhou 421 Hospital of PLA during the same period were selected as the control group. The expression levels of TNFAIP3, PDE4B, apoptosis genes and invasion genes in lymph node tissue were determined. Results: TNFAIP3, PTEN, PTPL1 and Bax protein expression in lesion tissue of DLBCL group were significantly lower than those of control group whereas PDE4B, c-myc, AURKA, AURKB, PLK1, Ets-1, β-catenin, MMP7, MMP9 and CD44 protein expression were significantly higher than those of control group;PTEN, PTPL1 and Bax protein expression in DLBCL lesions were positively correlated with TNFAIP3 protein expression and negatively correlated with PDE4B protein expression;c-myc, AURKA, AURKB, PLK1, Ets-1, β-catenin, MMP7, MMP9 and CD44 protein expression were negatively correlated with TNFAIP3 protein expression and positively correlated with PDE4B protein expression. Conclusion: The low expression of TNFAIP3 and the high expression of PDE4B in diffuse large B cell lymphoma can antagonize tumor cell apoptosis and promote tumor cell invasion.