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人源蛋白酶体α亚基6(Proteasome subunit alpha 6)在酿酒酵母表面展示 被引量:4
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作者 唐语谦 叶茂 +4 位作者 林影 韩双艳 郑泓 王小宁 梁世中 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第9期984-990,共7页
为构建人源蛋白酶体α亚基6(α6)的酵母展示体系,研制其单克隆抗体用于抗体表位分析和研究泛素-蛋白酶体途径,建立绕过重组抗原表达及纯化制备、将展示重组抗原直接应用于抗体检测的方法.在酵母展示表达载体pICAS中引入His.tag标签,将... 为构建人源蛋白酶体α亚基6(α6)的酵母展示体系,研制其单克隆抗体用于抗体表位分析和研究泛素-蛋白酶体途径,建立绕过重组抗原表达及纯化制备、将展示重组抗原直接应用于抗体检测的方法.在酵母展示表达载体pICAS中引入His.tag标签,将编码α6的基因PSA6_HUMAN克隆到酵母表面展示载体pICAS-H上,用流式细胞仪检测其抗原表位活性,以表面展示α6的重组酵母细胞,结合酶联吸附免疫检测技术,建立酵母(yeast)-ELISA检测技术,应用于检测小鼠单克隆抗体及单抗效价.酵母细胞培养48h后获得抗原α6的高效表面展示,展示的α6具有良好的抗原活性和特异性,将α6的展示酵母用于yeast-ELISA的初步实验结果显示可有效检测和筛选到抗α6抗体. 展开更多
关键词 泛素-蛋白酶体途径 人源蛋白酶体α亚基6 酵母表面展示体系 抗体检测
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CopE and TLR6 RNAi-mediated tomato resistance to western flower thrips
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作者 Jelli VENKATESH Sung Jin KIM +3 位作者 Muhammad Irfan SIDDIQUE Ju Hyeon KIM Si Hyeock LEE Byoung-Cheorl KANG 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2023年第2期471-480,共10页
The western flower thrips(WFT;Frankliniella occidentalis)is a mesophyll cell feeder that damages many crops.Management of WFT is complex due to factors such as high fecundity,short reproduction time,ability to feed on... The western flower thrips(WFT;Frankliniella occidentalis)is a mesophyll cell feeder that damages many crops.Management of WFT is complex due to factors such as high fecundity,short reproduction time,ability to feed on a broad range of host plants,and broad pesticide resistance.These challenges have driven research into developing alternative pest control approaches for WFT.This study analyzed the feasibility of a biological control-based strategy to manage WFT using RNA interference(RNAi)-mediated silencing of WFT endogenous genes.For the delivery of RNAi,we developed transgenic tomato lines expressing double-stranded RNA(dsRNA)of coatomer protein subunit epsilon(CopE)and Toll-like receptor 6(TLR6)from WFT.These genes are involved in critical biological processes of WFT,and their dsRNA can be lethal to these insects when ingested orally.Adult WFT that fed on the transgenic dsRNAexpressing tomato flower stalk showed increased mortality compared with insects that fed on wild-type samples.In addition,WFT that fed on TLR6 and CopE transgenic tomato RNAi lines showed reduced levels of endogenous CopE and TLR6 transcripts,suggesting that their mortality was likely due to RNAi-mediated silencing of these genes.Thus,our findings demonstrate that transgenic tomato plants expressing dsRNA of TLR6 and CopE can be lethal to F.occidentalis,suggesting that these genes may be deployed to control insecticide-resistant WFT. 展开更多
关键词 coatomer protein subunit epsilon(CopE) Frankliniella occidentalis insect resistance RNA interference Toll-like receptor 6(TLR6) TOMATO TRANSGENICS
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膀胱癌组织中脂肪酸结合蛋白6、核苷酸还原酶M1亚基的表达及与临床病理特征的相关性
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作者 王莉莉 《中国医学创新》 CAS 2023年第13期152-155,共4页
目的:探究膀胱癌(bladder cancer)组织中脂肪酸结合蛋白6(fatty acid-binding protein6,FABP6)、核苷酸还原酶M1亚基(ribonucleotide reductase regulatory subunit M1,RRM1)的表达水平及其与膀胱癌患者临床病理特征的相关性。方法:回... 目的:探究膀胱癌(bladder cancer)组织中脂肪酸结合蛋白6(fatty acid-binding protein6,FABP6)、核苷酸还原酶M1亚基(ribonucleotide reductase regulatory subunit M1,RRM1)的表达水平及其与膀胱癌患者临床病理特征的相关性。方法:回顾性分析2020年2月-2021年12月大冶市人民医院收治的并接受手术切除的40例膀胱癌患者的临床资料。采用免疫组化法检测各组织中的FABP6和RRM1蛋白表达水平,并分析FABP6和RRM1蛋白与各项临床特征的关系。结果:膀胱癌组织中FABP6和RRM1高蛋白表达水平占比均高于癌旁正常组织(P<0.05)。FABP6和RRM1蛋白高表达和低表达膀胱癌患者的性别、年龄、肿瘤类型、肿瘤直径比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。FABP6和RRM1蛋白高表达和低表达膀胱癌患者的分化程度、TNM分期、淋巴结转移比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:FABP6、RRM1在膀胱癌组织中表达水平高于癌旁正常组织,且两者均参与了膀胱癌的发生、发展进程。 展开更多
关键词 膀胱癌 脂肪酸结合蛋白6 核苷酸还原酶M1亚基 临床病理特征
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人工合成小麦中HMW-GS 6+8和1.5+10的品质效应 被引量:4
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作者 汤永禄 杨武云 +2 位作者 田纪春 李俊 陈放 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期3465-3476,共12页
【目的】研究人工合成小麦中6+8、1.5+10HMW-GS对小麦主要品质性状的影响。【方法】选用一份含6+8和1.5+10HMW-GS的人工合成六倍体小麦Syn-CD780,与栽培品种川育12-1(CY12-1)(亚基组合为1、7+8、2+12)杂交,构建F8重组近交系群体(RIL),... 【目的】研究人工合成小麦中6+8、1.5+10HMW-GS对小麦主要品质性状的影响。【方法】选用一份含6+8和1.5+10HMW-GS的人工合成六倍体小麦Syn-CD780,与栽培品种川育12-1(CY12-1)(亚基组合为1、7+8、2+12)杂交,构建F8重组近交系群体(RIL),分别在3个环境下种植(G05、G06、J06),测定16个品质参数。【结果】(1)2个亲本之间除FY之外,其他品质性状均存在显著差异。籽粒和蛋白质参数(TW、GH、GPC、FY、WGC、SED等)的群体均值在G06、J06环境下介于亲本之间;粉质仪参数表现不一,群体均值或处于亲本之间(FWA、SOF)或亲本范围之外(DST、BRT、QN、NS、LOV等)。(2)所有品质性状在不同亚基组合之间均存在显著差异,尤其是GH、SED和大部分粉质仪参数。同一HMW-GS编码位点上不同等位变异之间的差异,因品质参数而异,并受其它位点的影响。多数品质性状6+8优于7+8,1.5+10与2+12差异不明显。(3)不同亚基组合对小麦品质影响较大,LOV和BS以(1、6+8、1.5+10)最高;NS以(1、7+8、1.5+10)最高。NS与FN呈正相关,与其它品质参数的相关性因试验地点不同而存在较大差异;LOV与SOF呈显著负相关、与多数品质参数呈显著正相关。【结论】来自人工合成六倍体小麦中的HMW-GS6+8优于普通小麦中的7+8,1.5+10则依品质参数和亚基组合方式而异。含HMW-GS6+8和1.5+10的人工合成小麦在普通小麦品质改良上具有一定潜力。 展开更多
关键词 人工合成小麦 重组近交系 6+8亚基 1.5+10亚基 HMW-GS 亚基组合 品质性状
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IL-6受体α亚单位mRNA和蛋白在人白血病细胞中的表达 被引量:3
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作者 刘爽 奚永志 +5 位作者 郭斯启 刘楠 梁飞 金荔 陈兴国 孔繁华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期22-26,共5页
为了探讨IL 6R的α亚单位基因与蛋白在人白血病细胞中的表达 ,为临床利用IL 6 /IL 6R系统介导重组IL 6 PE4 0外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞提供可靠依据 ,采用RT PCR半定量技术、直接免疫荧光标记及流式细胞术检测了IL 6R的α亚单... 为了探讨IL 6R的α亚单位基因与蛋白在人白血病细胞中的表达 ,为临床利用IL 6 /IL 6R系统介导重组IL 6 PE4 0外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞提供可靠依据 ,采用RT PCR半定量技术、直接免疫荧光标记及流式细胞术检测了IL 6R的α亚单位基因及蛋白在多种人白血病细胞细胞系中的表达。结果表明 ,粒系、单核系、红白血病细胞系HL 6 0 ,KG 1,U937和TF 1均高表达IL 6R的α亚单位基因和蛋白 ;淋巴系白血病细胞系Raji亦有一定量的基因表达 ;而淋巴系细胞等CEM和HuT2 8以及慢性粒细胞白血病细胞系K5 6 2无论是IL 6Rα亚单位的基因还是蛋白均为阴性。相对表达丰度依次为KG 1>TF 1>U2 6 6 >U937>HL 6 0 >Raji。鉴于粒系、单核系、红白血病细胞高表达IL 6Rα亚单位的基因和蛋白 ,而IL 6Rα亚单位蛋白在正常人外周血细胞均为阴性表达这一事实 ,提示可以利用IL 6 /IL 6R系统介导重组IL 6 PE4 0外毒素融合蛋白进行靶向杀伤和治疗这些白血病 。 展开更多
关键词 IL-6受体 α亚单位mRNA 基因表达 白血病细胞 白血病
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结核分枝杆菌亚单位疫苗Ag85b-ESAT-6+Hsp65-IL-2的安全性评价研究 被引量:3
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作者 路延之 王丽梅 +5 位作者 康健 杨锐 张鑫 姚庆港 柏银兰 徐志凯 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期945-951,共7页
目的评价结核分枝杆菌亚单位疫苗Ag85b-ESAT-6+Hsp65-IL-2在小鼠和豚鼠体内的安全性。方法小鼠慢性毒性实验:C57BL/6J小鼠间隔2周、皮下3次注射100μg亚单位疫苗(Ag85b-ESAT-6和Hsp65-IL-2各50μg),观察临床症状表现和器官病理学改变。... 目的评价结核分枝杆菌亚单位疫苗Ag85b-ESAT-6+Hsp65-IL-2在小鼠和豚鼠体内的安全性。方法小鼠慢性毒性实验:C57BL/6J小鼠间隔2周、皮下3次注射100μg亚单位疫苗(Ag85b-ESAT-6和Hsp65-IL-2各50μg),观察临床症状表现和器官病理学改变。小鼠急性毒性实验:C57BL/6J小鼠皮下注射100μg亚单位疫苗(Ag85b-ESAT-6和Hsp65-IL-2各50μg),观察小鼠临床症状、体重、摄食摄水量、器官的脏器系数和病理学表现。豚鼠全身过敏实验:Hartley豚鼠间隔2d、皮下3次注射1 000μg、100μg、10μg亚单位疫苗(Ag85b-ESAT-6和Hsp65-IL-2均按质量1∶1混合),16d后用二倍剂量足背静脉注射激发,观察体重变化和全身过敏症状。结果小鼠慢性毒性实验表明,亚单位疫苗多次注射后不引起临床症状和病理损伤;小鼠急性毒性实验表明,亚单位疫苗对小鼠不产生临床症状,对小鼠体重、摄食摄水量、脏器系数、器官病理学改变影响无统计学意义;豚鼠全身过敏实验表明,疫苗短期多次致敏对豚鼠的体重无明显影响,低剂量疫苗不引起豚鼠产生全身过敏反应。结论亚单位疫苗Ag85b-ESAT-6+Hsp65-IL-2在小鼠和豚鼠体内均表现出良好的安全性,可用于进一步TB预防和治疗性疫苗的研制。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 亚单位疫苗 安全性评价 Ag856-ESAT-6+Hsp65-IL-2
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线粒体ATPase-6基因多态性与男性精子活力的关系 被引量:3
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作者 莫毅 梁方方 +3 位作者 谢伟 王娟 叶健 谢丹尼 《山东医药》 CAS 2013年第17期15-17,共3页
目的探讨线粒体ATP合成酶6亚基(ATPase-6)基因多态性与男性精子活力的关系。方法选择弱精子症患者319例(观察组)及精子活力正常者344例(对照组),采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性分析技术检测其线粒体ATPase-6基因(+9 052 bp)... 目的探讨线粒体ATP合成酶6亚基(ATPase-6)基因多态性与男性精子活力的关系。方法选择弱精子症患者319例(观察组)及精子活力正常者344例(对照组),采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性分析技术检测其线粒体ATPase-6基因(+9 052 bp)的HaeⅡ酶切位点多态性,并对两组的基因型分布及等位基因频率进行Hardy-Weinberg平衡检测,分析ATPase-6突变基因频率与精子活力的关系。结果观察组的hh、Hh、HH基因型分布分别为19.74%、1.25%、79.01%,对照组分别为4.94%、0.58%、94.45%,两组基因型分布均处于Hardy-Weinberg平衡范围;但观察组的突变型基因(h)频率明显高于对照组(P<0.01)。结论 ATPase-6基因(+9 052bp)HaeⅡ酶切位点突变可能影响ATPase-6基因的翻译效率,进而影响男性精子活力,引起弱精子症。 展开更多
关键词 弱精子症 精子活力 ATPase-6基因 ATP合成酶6亚基 聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析
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蛋白酶体α6亚单位基因多态性与冠心病的相关性研究 被引量:4
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作者 李俊男 陈敬洲 +8 位作者 宋卫华 边云飞 于辉 娄可佳 张银辉 宋燕 刘改珍 惠汝太 肖传实 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2008年第2期95-98,共4页
目的研究中国人群蛋白酶体α6亚单位基因PSMA6单核苷酸多态性与冠心病的关系。方法从北京同仁医院和北京朝阳医院选取冠心病患者369例和匹配的对照组360例。并记录所有研究对象的病史、体格检查等临床资料及其它流行病学资料,采取聚合... 目的研究中国人群蛋白酶体α6亚单位基因PSMA6单核苷酸多态性与冠心病的关系。方法从北京同仁医院和北京朝阳医院选取冠心病患者369例和匹配的对照组360例。并记录所有研究对象的病史、体格检查等临床资料及其它流行病学资料,采取聚合酶链式反应和限制性酶切片断长度多态性分析方法(PCR-RFLP)检测各组PSMA6基因rs1048990位点C/G的基因型并统计各组的基因型频率。结果冠心病组rs1048990 G等位基因型频率显著低于对照组(48.0%vs 57.8%,P=0.011,OR值=0.674)。将冠心病组进行疾病分层后发现,冠心病亚组与对照组之间的基因型频率分布差异也有统计学意义(42.4%vs 57.8%,P=0.001,OR值=0.669),而在心肌梗死亚组中未发现差异有统计学意义。结论PSMA6基因rs1048990位点C/G多态性与冠心病的发病密切相关,其中G等位基因可能是中国人冠心病的保护因素之一。 展开更多
关键词 PSMA6基因 泛素-蛋白酶体 蛋白酶体d6亚单位 基因多态性 冠状动脉疾病
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miR-6803和PPP6R1在食管鳞状细胞癌组织和细胞中的表达及其甲基化状态与患者临床病理特征的关系 被引量:3
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作者 沈素朋 徐凤楼 +4 位作者 刘江惠 卢帆 梁佳 郭炜 董稚明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期972-978,共7页
目的:探讨微小RNA-6803(mi R-6803)及其宿主基因蛋白磷酸酶6调节亚单位1(protein phosphatase 6 regulation subunit 1,PPP6R1)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达和PPP6R1基因启动子区甲基化状态及其在ESCC发生及发展中的作用。方法:采用2... 目的:探讨微小RNA-6803(mi R-6803)及其宿主基因蛋白磷酸酶6调节亚单位1(protein phosphatase 6 regulation subunit 1,PPP6R1)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达和PPP6R1基因启动子区甲基化状态及其在ESCC发生及发展中的作用。方法:采用2013年至2014年间河北医科大学第四医院生物标本库的72例ESCC手术患者癌组织及对应的癌旁组织标本,用实时荧光定量PCR法检测mi R-6803和PPP6R1在ESCC组织及其癌旁组织和DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-d C)处理前后的ESCC细胞株TE1、TE13、Eca109、T.TN、Kyse170中的表达水平。用甲基化特异性PCR(MSP)法检测ESCC细胞系和组织及其癌旁组织中PPP6R1的甲基化状态,分析其与患者临床病理特征的关系。结果:ESCC组织中mi R-6803和PPP6R1的表达水平显著低于癌旁组织(0.318±0.156,0.408±0.177 vs 1.000±0.001,均P<0.05),mi R-6803表达水平与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期密切相关(均P<0.05);PPP6R1表达水平与TNM分期和组织学分化程度密切相关(均P<0.05)。ESCC组织中mi R-6803和PPP6R1基因的表达具有显著相关性(P<0.05)。ESCC组织中PPP6R1的启动子区甲基化率显著高于癌旁组织(56.94%vs 36.11%,P<0.05),并与TNM分期和组织学分化程度密切相关(均P<0.05),mi R-6803和PPP6R1基因的低表达与PPP6R1启动子区甲基化明显相关(P<0.05)。经5-Aza-d C处理后,5种ESCC细胞中mi R-6803和PPP6R1的表达均升高,并且TE1、TE13、Kyse170细胞中PPP6R1基因甲基化程度降低,非甲基化程度增加,其余2种细胞中PPP6R1基因均表现为非甲基化状态。结论:mi R-6803及其宿主基因PPP6R1的低表达可能与ESCC的发生发展密切相关,其启动子区甲基化可能是mi R-6803和PPP6R1表达沉默的机制之一。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 微小RNA-6803 蛋白磷酸酶6调节亚单位1(PPP6R1)基因 甲基化
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PSMA6基因rs1048990位点多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的相关性分析 被引量:3
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作者 赵西耀 何芳梅 《温州医科大学学报》 CAS 2016年第2期97-101,共5页
目的:研究陕西汉族人群中蛋白酶体α6亚单位(PSMA6)基因rs1048990(-8C/G)位点的多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的关系。方法:采用病例对照研究,选择2012年1月至2013年12月在西安医学院第一附属医院神经内科住院的162例动脉粥样硬化性脑... 目的:研究陕西汉族人群中蛋白酶体α6亚单位(PSMA6)基因rs1048990(-8C/G)位点的多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的关系。方法:采用病例对照研究,选择2012年1月至2013年12月在西安医学院第一附属医院神经内科住院的162例动脉粥样硬化性脑梗死患者(病例组)和同期159例健康体检者(对照组)。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测PSMA6基因rs1048990位点单核苷酸多态性,并分析其基因型及等位基因频率在脑梗死患者及正常人群中的分布特点。结果:与对照组比,病例组GG基因型频率差异无统计学意义(P=0.054),G等位基因频率差异亦无统计学意义(P=0.05)。分别依据有无高血压和糖尿病病史进行分层分析,病例组各基因型及等位基因频率间差异均无统计学意义(均P>0.05),对照组亦如此。logistics回归分析发现,PSMA6基因rs1048990位点GG基因型在病例组和对照组间差异无统计学意义(P=0.059)。结论:PSMA6基因rs1048990位点可能与动脉粥样硬化性脑梗死发病不相关,但P值接近有统计学意义,值得进一步研究。 展开更多
关键词 蛋白酶体 α6亚单位 单核苷酸多态性 动脉粥样硬化性脑梗死
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亚洲黑熊四川亚种线粒体NADH脱氢酶亚基5和亚基6基因的克隆与初步分析 被引量:1
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作者 杜玉杰 侯怡铃 侯万儒 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第4期1748-1751,共4页
[目的]克隆与分析亚洲黑熊四川亚种线粒体NADH的脱氢酶亚基5和亚基6基因(ND5和ND6)。[方法]根据已报道的部分熊科动物ND5和ND6基因序列的相关信息设计引物,运用PCR技术,首次从亚洲黑熊四川亚种的肌肉组织总DNA中成功克隆了ND5和ND6基因... [目的]克隆与分析亚洲黑熊四川亚种线粒体NADH的脱氢酶亚基5和亚基6基因(ND5和ND6)。[方法]根据已报道的部分熊科动物ND5和ND6基因序列的相关信息设计引物,运用PCR技术,首次从亚洲黑熊四川亚种的肌肉组织总DNA中成功克隆了ND5和ND6基因的编码序列,分析了其序列特征,并与已报道的9种熊科动物进行比较分析。[结果]该克隆片段包括ND5和ND6两个基因共2456bp,共编码781个氨基酸,与9种熊科动物的ND5和ND6具有很高的同源性;该克隆片段ND5和ND6的蛋白分子量分别为68.2621和19.0386kDa,等电点分别为9.19和4.25,与9种熊科动物的均十分接近。[结论]四川黑熊与9种熊科动物的ND5和ND6基因及其编码蛋白具有很高的相似性,在功能上具有一致性,尤其与东北黑熊在功能上具有高度一致性。 展开更多
关键词 亚洲黑熊四川亚种 线粒体NADH脱氢酶亚基5和亚基6基因 克隆 序列分析
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内质网膜蛋白复合物亚单位6调控细胞增殖和凋亡对宫颈癌Hela细胞放射线敏感性的影响 被引量:1
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作者 马焱 尹骏 +2 位作者 马尔克亚·卡马力拜克 郭润梅 李莉 《中国医药》 2022年第10期1534-1537,共4页
目的探讨内质网膜蛋白复合物亚单位6(EMC6)调控细胞增殖和凋亡对宫颈癌Hela细胞放射线敏感性的影响。方法将宫颈癌Hela细胞分为CON组(正常宫颈癌Hela细胞)、shCtrl组(EMC6基因空白质粒转染宫颈癌Hela细胞)和shEMC6组(EMC6基因短发夹RNA... 目的探讨内质网膜蛋白复合物亚单位6(EMC6)调控细胞增殖和凋亡对宫颈癌Hela细胞放射线敏感性的影响。方法将宫颈癌Hela细胞分为CON组(正常宫颈癌Hela细胞)、shCtrl组(EMC6基因空白质粒转染宫颈癌Hela细胞)和shEMC6组(EMC6基因短发夹RNA干扰表达质粒转染宫颈癌Hela细胞),给予2、4、6、8 Gy X线外照射处理,照射处理后采用定量聚合酶链反应法检测EMC6 mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测EMC6蛋白表达水平,克隆形成实验检测细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平和细胞周期。结果shEMC6组EMC6 mRNA表达水平低于shCtrl组[(0.530±0.017)比(1.004±0.108)](P=0.002),EMC6的敲减率为47.24%。shEMC6组EMC6蛋白表达水平低于shCtrl组[(0.506±0.012)比(0.528±0.005)](P=0.023)。2、4 Gy X线照射处理后,shEMC6组细胞增殖水平均低于shCtrl组和CON组(均P<0.05)。2 Gy X线照射后4、8、12 h,shEMC6组细胞凋亡率均高于shCtrl组[(45.71±0.66)%比(34.86±1.16)%、(13.85±0.24)%比(12.85±0.19)%、(22.74±0.14)%比(17.77±0.40)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。2 Gy X线照射前0 h,shEMC6组S期细胞比例低于shCtrl组,G_(2)期细胞比例高于shCtrl组(均P<0.05);照射后4 h,shEMC6组S期细胞比例低于shCtrl组(P<0.05),G_(2)期细胞比例与shCtrl组比较差异无统计学意义(P>0.05);照射后8 h,shEMC6组S期细胞比例高于shCtrl组,G_(2)期细胞比例低于shCtrl组(均P<0.05);照射后12 h,shEMC6组S期细胞比例与shCtrl组比较差异无统计学意义(P>0.05),G_(2)期细胞比例低于shCtrl组(P<0.05)。结论宫颈癌Hela细胞沉默EMC6后,细胞增殖减少,同时细胞凋亡和G_(2)期细胞数量显著增加,对放射线的敏感性显著提高。 展开更多
关键词 宫颈癌 内质网膜蛋白复合物亚单位6 HELA细胞 细胞自噬 放射线敏感性
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胃癌组织中CSN6的表达及临床意义 被引量:1
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作者 卓长华 阮强 +2 位作者 林瑞榕 张和军 杨春康 《吉林医学》 CAS 2021年第6期1294-1298,共5页
目的:观察组成型光形态发生因子9信号复合体亚基6(Constitutive photomorphogenesis 9 signalosome subunit 6,CSN6)在胃癌组织中的表达,并探讨其临床价值。方法:收集2019年11月~2020年2月手术切除的30例新鲜胃癌及癌旁组织,采用Western... 目的:观察组成型光形态发生因子9信号复合体亚基6(Constitutive photomorphogenesis 9 signalosome subunit 6,CSN6)在胃癌组织中的表达,并探讨其临床价值。方法:收集2019年11月~2020年2月手术切除的30例新鲜胃癌及癌旁组织,采用Western blot检测30例新鲜胃癌及癌旁组织中CSN6表达量。选取2013年1月~2015年9月病理科存档的170例胃癌石蜡组织及癌旁组织,采用免疫组化检测CSN6的表达情况。结果:新鲜组织胃癌中CSN6表达量为1.821±0.421,高于癌旁组织的0.976±0.311,差异有统计学意义(P<0.05)。石蜡组织中,CSN6在胃癌组织中的阳性率为55.3%,高于癌旁正常组织的28.8%。CSN6的阳性表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、病理分期有关。CSN6阳性患者的5年生存率为41.6%,低于阴性患者的60.1%,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析表明CSN6、肿瘤大小、分化程度、神经浸润、脉管癌栓、浸润深度、淋巴结转移、病理分期与患者预后有关。多因素分析表明,CSN6、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、病理分期是胃癌预后的独立危险因素,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CSN6参与胃癌的发生及发展,是判断胃癌预后及靶向治疗的重要分子标志物。 展开更多
关键词 胃癌 CSN6 预后
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白介素-6对NMDA损伤的小脑颗粒神经元NR1和IP3R1蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 方小霞 刘展 +2 位作者 马颂华 邱一华 彭聿平 《南通大学学报(医学版)》 2011年第6期420-422,共3页
目的:观察白介素-6(IL-6)对N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)损伤小脑颗粒神经元NMDA受体亚单位1(NR1)和三磷酸肌醇受体1(IP3R1)蛋白表达的影响。方法:取出生后8 d SD大鼠小脑进行小脑颗粒神经元(CGNs)体外培养。在培养液中加入IL-6(40或120 n... 目的:观察白介素-6(IL-6)对N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)损伤小脑颗粒神经元NMDA受体亚单位1(NR1)和三磷酸肌醇受体1(IP3R1)蛋白表达的影响。方法:取出生后8 d SD大鼠小脑进行小脑颗粒神经元(CGNs)体外培养。在培养液中加入IL-6(40或120 ng/mL),培养8 d后,用NMDA(100μmol/L)损伤神经元30 min,建立神经元损伤模型。Western Blot法检测NR1和IP3R1蛋白的表达。结果:IL-6下调NR1的蛋白表达,并抑制NMDA诱导的IP3R1的蛋白表达增高。结论:IL-6通过抑制NMDA受体和IP3受体实现神经保护作用。 展开更多
关键词 小脑颗粒神经元 白介素-6 N-甲基-D-天门冬氨酸 NMDA受体亚单位1 三磷酸肌醇受体1 大鼠
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人源蛋白酶体α亚基6的酵母表面展示及表达优化(英文)
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作者 唐语谦 林影 +1 位作者 韩双艳 梁世中 《陕西科技大学学报(自然科学版)》 2007年第6期1-6,共6页
为构建人源蛋白酶体α亚基6(hPSA6)的酵母表面展示体系用于抗体表位分析和研究泛素-蛋白酶体途径,并优化hPSA6的展示表达,将基因PSA6_HUMAN克隆于表达载体pICAS-H,该载体带有His.tag标签可检测表达水平.经过重组酵母的培养,用抗His.tag... 为构建人源蛋白酶体α亚基6(hPSA6)的酵母表面展示体系用于抗体表位分析和研究泛素-蛋白酶体途径,并优化hPSA6的展示表达,将基因PSA6_HUMAN克隆于表达载体pICAS-H,该载体带有His.tag标签可检测表达水平.经过重组酵母的培养,用抗His.tag或抗hPSA6的单克隆抗体和荧光二抗进行免疫荧光染色,通过流式细胞仪和荧光显微镜检测到hPSA6已经成功地展示于酿酒酵母表面.通过对培养基中不同初始浓度的葡萄糖和酸水解酪素的诱导培养,发现hPSA6呈现出不同的展示水平,与对照相比,对His.tag进行免疫荧光检测观测到3%酸水解酪素诱导培养可获得超过70%的展示表达率,3%葡萄糖诱导培养可达到50%以上表达率,2%葡萄糖诱导也有接近40%表达率.考虑到葡萄糖效应和灭菌过程中高浓度的葡萄糖易碳化,采用2%葡萄糖进行诱导表达较3%更适合于hPSA6的展示表达. 展开更多
关键词 泛素α蛋白酶体途径 蛋白酶体α亚基6 酵母表面展示
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母婴分离应激导致青少年期大鼠抑郁并改变海马兴奋性突触传递
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作者 韦红巧 邱然 +4 位作者 王芳 林楚臻 莫景筌 陈业俊 杨林杰 《右江民族医学院学报》 2024年第2期153-158,共6页
目的明确母婴分离(MS)应激及GABAA受体α6亚单位(Gabra6)抑制剂对海马AMPA受体介导的兴奋性突触后电流的影响。方法将新生的SD大鼠随机分为对照组和MS组,MS乳鼠与母鼠定期分离,建立母婴分离大鼠模型;新环境进食抑制、强迫游泳以及糖水... 目的明确母婴分离(MS)应激及GABAA受体α6亚单位(Gabra6)抑制剂对海马AMPA受体介导的兴奋性突触后电流的影响。方法将新生的SD大鼠随机分为对照组和MS组,MS乳鼠与母鼠定期分离,建立母婴分离大鼠模型;新环境进食抑制、强迫游泳以及糖水偏爱实验检测青少年期大鼠抑郁行为;全细胞脑片膜片钳方法检测对照及大鼠海马CA1区椎体神经元诱发的兴奋性突触后电流(eEPSC)。结果青少年期MS大鼠在新环境中进食潜伏期(P<0.01)以及强迫游泳漂浮不动时间均延长(P<0.01),Gabra6拮抗剂呋塞米可显著增强海马脑片CA1区锥体细胞中记录到的eEPSC(P<0.001),呋塞米对慢性MS应激大鼠海马脑片CA1区锥体细胞eEPSC的增强作用较弱(P<0.05)。结论MS应激可作用于海马Gabra6,改变兴奋性突触后电流,并导致大鼠抑郁,在此基础上研究作用于GABA受体的药物有望成为抑郁症治疗的新策略。 展开更多
关键词 母婴分离 海马 兴奋性突触后电流 GABAA受体α6亚单位
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CSN6在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义
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作者 陈智伟 林海凤 +1 位作者 刘晓丽 刘芳芳 《齐齐哈尔医学院学报》 2021年第20期1749-1753,共5页
目的探讨食管鳞状细胞癌中组成型光形态发生因子9信号复合体亚单位6(CSN6)的表达及临床意义。方法选择2019年1月—2020年12月本院80例食管鳞状细胞癌患者、68例Barrett食管患者、120名健康体检者作为研究对象,收集所有研究对象的血清,... 目的探讨食管鳞状细胞癌中组成型光形态发生因子9信号复合体亚单位6(CSN6)的表达及临床意义。方法选择2019年1月—2020年12月本院80例食管鳞状细胞癌患者、68例Barrett食管患者、120名健康体检者作为研究对象,收集所有研究对象的血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中CSN6蛋白的表达量,采用电化学发光法检测癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌相关抗原(SCCA)的表达量。绘制ROC曲线比较上述指标的诊断价值。采用免疫组织化学实验检测2013年9月—2016年1月本院病理科存档的食管鳞状细胞癌手术标本共180例,检测癌及癌旁石蜡组织标本中CSN6的表达,分析CSN6与临床病理特征及预后的关系。结果食管鳞状细胞癌患者血清中CSN6的表达量高于Barrett食管患者和健康体检者,差异具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线表明:CSN6、CEA和SCCA的诊断效能低于三者联合检测,差异具有统计学意义(P<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中CSN6的阳性率与癌旁正常组织比较,差异具有统计学意义,CSN6的阳性表达与肿瘤大小、病理分期、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05)。CSN6阳性表达患者的5年生存率与阴性表达比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素分析表明CSN6阳性表达是判断食管鳞状细胞癌不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论CSN6可能作为食管鳞状细胞癌早期诊断、预测不良预后的分子标志物。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 组成型光形态发生因子9信号复合体亚单位6 预后
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基于线粒体ND6基因检测犬感染细粒棘球绦虫的粪便PCR方法 被引量:5
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作者 詹佳飞 宋宏宇 +5 位作者 王凝 郭承 李春燕 谢跃 古小彬 杨光友 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期626-632,共7页
目的旨在了解动物包虫病流行区内犬细粒棘球绦虫的感染情况。方法本研究利用Qiagen DNeasy Powersoil试剂盒对犬粪提取DNA,并从细粒棘球绦虫线粒体全基因组中筛选出完整线粒体ND6基因作为靶基因,建立一种可对犬粪中细粒棘球绦虫同时进... 目的旨在了解动物包虫病流行区内犬细粒棘球绦虫的感染情况。方法本研究利用Qiagen DNeasy Powersoil试剂盒对犬粪提取DNA,并从细粒棘球绦虫线粒体全基因组中筛选出完整线粒体ND6基因作为靶基因,建立一种可对犬粪中细粒棘球绦虫同时进行检测及基因分型的PCR方法。结果该法特异性很高,仅能扩增出细粒棘球绦虫的目的条带而对照组均无条带扩增。其灵敏度达到4pg的DNA含量。当犬人工感染约50000只原头蚴时,该法最早可以扩增出感染第13d粪便中的ND6目的基因。同时,对40份随机采自包虫病流行区的待检犬粪进行PCR检测,共有6份样品可扩增出目的条带且其基因型均属G1型,其检测及分型结果均与经典基因分型依据(COX1基因片段)的结果一致。结论本研究建立的粪便PCR方法具有很高的特异性和灵敏度,并可用于检测犬的细粒棘球绦虫早期感染情况。对于PCR检测阳性者,其产物经测序分析后也可用于细粒棘球绦虫的基因分型及种群遗传结构的分析研究。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 线粒体ND6基因 PCR检测 基因分型
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剪接因子SF3b6通过MAPK信号通路促进胃癌细胞的增殖和迁移 被引量:1
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作者 杨晨萌 王春梅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期247-253,共7页
目的:探讨剪接因子3b亚基6(splicing factor 3b subunit 6,SF3b6)对胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等的影响及其作用机制。方法:通过组织芯片检测SF3b6在胃癌和癌旁组织中的表达,采用WB和q PCR检测SF3b6在正常永生化胃上皮细胞(GES-1)... 目的:探讨剪接因子3b亚基6(splicing factor 3b subunit 6,SF3b6)对胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等的影响及其作用机制。方法:通过组织芯片检测SF3b6在胃癌和癌旁组织中的表达,采用WB和q PCR检测SF3b6在正常永生化胃上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞系(HGC27、AGS、BGC823、MGC803、SGC7901、MKN45)中的表达水平。选取AGS和MGC803细胞转染SF3b6-siRNA、BGC823和SGC7901细胞转染SF3b6过表达质粒进行功能实验,CCK-8实验检测SF3b6对胃癌细胞增殖的影响,Transwell迁移和侵袭实验检测SF3b6对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡水平,WB检测凋亡和迁移相关分子及MAPK信号分子在蛋白水平的变化。结果:SF3b6在胃癌细胞MGC803和AGS表达水平高于正常胃上皮细胞GES-1,而在BGC823和SGC7901细胞中低于GES-1细胞(P<0.05或P<0.01)。敲低SF3b6的表达抑制了胃癌细胞系AGS和MGC803的增殖、迁移和侵袭,并促进了细胞凋亡(P<0.05或P<0.01);过表达SF3b6促进了胃癌细胞系BGC823和SGC7901的增殖、迁移和侵袭(P<0.05或P<0.01)。机制研究表明,敲低SF3b6表达促进了JNK和P38的活化,以及凋亡相关蛋白cleaved caspase-9、cleaved PARP、Bax的表达(P<0.05或P<0.01),同时抑制胃癌细胞上皮间质转化的进程。结论:剪接因子SF3b6通过MAPK信号通路增强胃癌细胞增殖和迁移,促进胃癌的发展进程。 展开更多
关键词 剪接因子3b亚基6 胃癌 增殖 迁移 凋亡 MAPK信号通路
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腺病毒介导的EMC6基因通过下调FAK信号通路抑制胃癌细胞迁移
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作者 夏艳 李日勇 +4 位作者 王晓琨 洪杜北琪 林欣 于佳弘 陈英玉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期285-292,共8页
内质网膜蛋白复合物亚单位6(endoplasmic reticulum membrane protein complex subunit 6,EMC6),也称穿膜蛋白93(transmembrane protein 93,TMEM93)是我们首次报道的一个人类自噬相关分子。EMC6基因进化保守,表达广泛,在胃癌组织中表达... 内质网膜蛋白复合物亚单位6(endoplasmic reticulum membrane protein complex subunit 6,EMC6),也称穿膜蛋白93(transmembrane protein 93,TMEM93)是我们首次报道的一个人类自噬相关分子。EMC6基因进化保守,表达广泛,在胃癌组织中表达下调或缺失。本研究利用构建的重组腺病毒5型EMC6(Ad5-EMC6)载体,感染胃癌细胞系BGC823和SGC7901,分析了其在肿瘤细胞的表达以及抗肿瘤活性。研究证明,Ad5-EMC6能够显著抑制胃癌细胞的克隆形成、细胞划痕修复、以及迁移和侵袭的能力。进一步的研究提示,Ad5-EMC6能够降低胃癌细胞局部黏着斑激酶(FAK)的Y576/577磷酸化水平,FAK下游的基质金属蛋白酶MMP2和MMP9的蛋白质水平也同时下调。在裸鼠的腹膜扩散模型中,Ad5-EMC6处理组的小鼠腹膜结节数量明显减少或缺失。这些研究数据提示,Ad5-EMC6介导的FAK信号灭活可能是其抑瘤活性的机制之一,其分子机制还需要进一步探讨。 展开更多
关键词 内质网膜蛋白复合物亚单位6(EMC6) 胃癌 迁移 侵袭 局部黏着斑激酶
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