磷脂酶A2在心血管疾病动物实验中的研究进展

磷脂酶A2(PLA2)是一类能催化脂蛋白和膜甘油磷脂水解的酶族,主要包括分泌型磷脂酶A2(s PLA2)、胞浆型磷脂酶A2(c PLA2)、钙离子非依赖型磷脂酶A2(i PLA2)和脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)。s PLA2,c PLA2,i PLA2和Lp-PLA2与多种疾病密切相关,尤其在心血管疾病中的研究成为近年来的热点。本文就近几年PLA2在心血管疾病动物中的实验研究作一综述。

急性缺血性脑卒中患者脂蛋白相关磷脂酶A2和同型半胱氨酸水平的变化分析

目的研究急性缺血性脑卒中患者脂蛋白相关磷脂酶A 2(Lp-PLA 2)和同型半胱氨酸(Hcy)水平的变化。方法选择2017年5月~2019年6月在我院治疗的103例急性缺血性脑卒中患者作为研究组,并对患者进行NIHSS(神经功能缺损)评分,将其中44例评分<4分者纳入A组,38例评分4~15分者纳入B组,21例评分>15分者纳入C组,同时选择健康体检者50例作为对照组,分别检测两组的Lp-PLA 2、Hcy、TC、TG、LDL、尿酸、肌酐、HDL、尿素氮以及超敏C反应蛋白水平。结果研究组的Lp-PLA 2、Hcy、TC、TG、LDL、尿酸、肌酐及超敏C反应蛋白水平均高于对照组(P<0.05),而HDL、尿素氮水平低于对照组(P<0.05)。研究组患者中C组的Lp-PLA 2、Hcy水平明显高于A、B组(P<0.05)。Logistic回归分析显示Lp-PLA 2>196 ng/ml、Hcy>17μmol/L是急性缺血性脑卒中发生的独立风险因素(P<0.05)。结论血清Lp-PLA 2、Hcy水平变化在急性缺血性脑卒中的发生、发展中具有重要意义,可作为该病诊断的主要指标。

间歇低氧运动对大鼠血脂及载脂蛋白的影响

目的:探讨间歇低氧运动对脂质代谢的影响状况。方法:40只SD雄性大鼠,随机分为安静2组和运动2组(分别为常氧对照和间歇低氧组),人工制造14.5%低氧(O2)环境,4周后对各组血清胆固醇(Ch)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)及载脂蛋白A-1(ApoA-1)、载脂蛋白B(ApoB)进行检测。结果:间歇低氧运动组Ch、TG、LDL-C明显低于常氧运动组(P<0.05),而HDL-C、ApoA-1则显著高于常氧运动组(P<0.05),ApoB只有间歇低氧运动组才出现显著下降;除Ch外,其余指标间歇低氧运动组的减少或增加与间歇低氧安静组相比均没有显著性。结论:间歇低氧运动可加强机体脂质代谢过程,并对心血管疾病治疗有一定的作用。

磷脂酶A_2及溴苯酰基溴化物在大鼠急性坏死性胰腺炎中的作用

为探讨磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）及其抑制剂溴苯酰基溴化物（ＢＰＢ）在急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）中的作用机理，采用切开十二指肠行胆胰管插管注入牛磺胆酸钠的方法诱导大鼠ＡＮＰ，检测胰腺微循环血流量变化、血ＰＬＡ２、血小板激活因子（ＰＡＦ）和血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）水平。进行基于光镜观察的组织学评分和腺泡细胞的超微病理检查。结果显示：急性胰腺炎（ＡＰ）组在诱导后胰腺血流立即剧烈下降，此后的３小时内轻度回升，３小时后持续下降至实验结束。随着病理改变持续加重，ＡＰ组血ＰＬＡ２，ＰＡＦ和ＴＸＢ２水平持续升高。超微结构所见以粗面内质网扩张、酶原颗粒增加为特征。ＢＰＢ治疗组的胰腺血流下降轻于ＡＰ组，与ＡＰ组相比较，其组织学评分表示的病理损害显著减轻，腺泡细胞粗面内质网扩张较轻，酶原颗粒较少。ＢＰＢ组的血ＰＬＡ２，ＰＡＦ和ＴＸＢ２水平显著低于ＡＰ组。结果表明：ＰＬＡ２在ＡＮＰ的发病中起重要作用。应用ＰＬＡ２抑制剂可能是治疗ＡＮＰ的一个有效的新方法。

心血管疾病研究者对动物实验伦理认知度调查与分析

目的了解不同层次心血管疾病研究者对于现有实验动物福利保护和动物伦理知识的认知,为动物实验伦理培训提供新策略,为进一步完善实验动物福利保护措施和伦理规制提供依据。方法选择从2009年1月1日至2012年6月30日在中国医学科学院阜外心血管病医院动物实验中心开展动物实验的197名研究者开展问卷调查,根据《北京市实验动物福利伦理审查指南》自行设计调查问卷,并对结果进行分析。结果对动物福利与伦理知识的认知得分,54.3%良好,35.5%合格,10.2%不合格,不合格者均为年龄20～30岁之间无动物实验科研经历的研究生。结论研究者对动物福利与伦理认知度参差不齐,有必要加强实验动物伦理培训,尤其是对有动物实验需求的新入学的研究生。

成人疾病发育起源的机制探讨

宫内生长发育是复杂的动态过程,这一过程受到胎儿本身遗传因素的控制和影响,只有当母亲营养充足,胎盘功能良好足以维持胎儿的高效增殖、生长和分化时,胎儿才能依其生长轨迹生长发育。健康和疾病发育起源或发育程序化概念的提出,反映了在生长发育关键时期的刺激或损伤可造成胎儿关键器官和组织长期的发育和生理性的改变。传统观念认为受到成人不良生活方式影响的疾病,如2型糖尿病、肥胖、高血压和心血管疾病在生命早期即被程序化。综述该领域的流行病学和动物模型研究,探讨其相关的机制。

脂蛋白相关磷脂酶A_(2)、脂蛋白a预测冠心病经皮冠状动脉介入治疗术后不良心血管事件的价值

目的探讨脂蛋白相关磷脂酶A_(2)(Lp-PLA_(2))与脂蛋白a[Lp(a)]对冠心病心绞痛急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后不良心血管事件的预测价值。方法回顾性分析河南大学第一附属医院2018年1月至2020年9月收治的475例冠心病心绞痛患者作为研究对象,根据患者术后6个月内是否出现不良心血管事件分为无不良心血管事件组(412例)与不良心血管事件组(63例),通过单因素分析与logistic回归分析评估冠心病心绞痛患者PCI术后不良心血管事件的危险因素,并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估其对不良心血管事件的预测价值。结果与无不良心血管事件组相比,不良心血管事件组患者术前Lp-PLA_(2)、Lp(a)水平升高(P<0.05)。logistic回归分析提示,Lp-PLA_(2)、Lp(a)均为冠心病心绞痛患者PCI术后不良心血管事件的独立危险因素(OR=3.622,95%CI=1.790~3.715,P<0.001;OR=1.344,95%CI=1.121~1.615,P<0.001)。ROC曲线分析提示,Lp-PLA_(2)曲线下面积(AUC)为0.815,敏感度为0.704,特异性为0.856,Lp(a)AUC为0.704,敏感度为0.754,特异性为0.629。结论冠心病心绞痛患者术前Lp-PLA_(2)、Lp(a)水平升高提示PCI术后存在较高的不良心血管事件风险,具有较高的临床应用价值。

辅酶Q_(10)经蛋白激酶A/胞浆型磷脂酶A_(2)信号通路抑制血小板血栓素A_(2)的生成

目的:血小板来源血栓素A_(2)(thromboxane A_(2),TxA_(2))可诱发动脉粥样硬化和血栓形成,辅酶Q_(10)(coenzyme Q_(10),CoQ_(10))可以抑制血小板活化、聚集和血栓形成。本实验旨在通过体外实验探讨CoQ_(10)对血小板TxA_(2)生成的影响及其调控机制。方法:用不同浓度(0、1、10、100μmol/L)CoQ_(10)与健康人纯化血小板在体外共同孵育50 min,在激动剂激活条件下,采用酶联免疫吸附测定法测定血小板分泌TxB_2水平;用Western blot蛋白免疫印迹法检测胞浆型磷脂酶A_(2)(cytosolic phospholipase A_(2),cPLA_(2))蛋白的磷酸化水平。结果:CoQ_(10)显著抑制多种激动剂(如凝血酶、胶原和Convulxin)诱导的血小板TxA_(2)生成;Western blot结果显示CoQ_(10)下调凝血酶和胶原诱导的血小板cPLA_(2)磷酸化水平;cPLA_(2)特异性抑制剂苯乙酮与CoQ_(10)联合使用时,对血小板TxA_(2)的生成没有协同效果;此外,蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)特异性抑制剂H89可完全逆转CoQ_(10)对激动剂诱导的血小板cPLA_(2)磷酸化和TxA_(2)生成的抑制作用。结论:CoQ_(10)具有显著抑制激动剂诱导的血小板TxA_(2)生成的作用,其机制主要是调控PKA/c PLA_(2)介导的信号通路。

沉默Salusin-β对糖尿病大鼠内皮功能障碍的影响及机制研究

目的分析短发夹RNA(shRNA)沉默心血管调节肽(Salusin-β)对糖尿病(DM)大鼠内皮功能障碍的影响及其潜在的机制。方法52只SD大鼠随机抽取12只为正常对照组(NC组),其余大鼠采用喂食高糖高脂饲料和腹腔注射链脲佐菌素的方法制备DM模型。将36只建模成功的大鼠分为DM组、Ad-Scr shRNA组和Ad-Salusin-βshRNA组,每组12只。Ad-Scr shRNA组大鼠尾静脉注射腺病毒空载体(Ad-scramble shRNA),Ad-Salusin-βshRNA组大鼠尾静脉注射编码Salusin-βshRNA的腺病毒载体(Ad-Salusin-βshRNA)。每2周注射1次,NC组和DM组注射等量生理盐水。4周后,检测大鼠空腹血糖(FBG)和血清Salusin-β水平以及胸主动脉血管舒张功能;酶联免疫吸附试验检测大鼠胸主动脉肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;二氢乙锭(DHE)染色检测胸主动脉中活性氧(ROS)水平;苏木精-伊红染色观察大鼠胸主动脉组织病理学变化;荧光定量PCR检测大鼠胸主动脉Salusin-β和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)mRNA表达水平;Western blot法检测大鼠胸主动脉NOX2、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。结果与NC组相比,DM组大鼠FBG、血清Salusin-β水平升高,胸主动脉TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS水平升高,胸主动脉内膜-中膜厚度增厚,Salusin-βmRNA、NOX2 mRNA和蛋白、细胞核NF-κB p65蛋白水平升高,Ach诱发的内皮依赖性血管舒张功能下降,胸主动脉SOD和细胞质NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.05)。与DM组和Ad-Scr shRNA组相比,Ad-Salusin-βshRNA组大鼠FBG和血清Salusin-β表达下降,胸主动脉TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS表达下降,胸主动脉内膜-中膜厚度变薄,Salusin-βmRNA、NOX2 mRNA和蛋白、细胞核NF-κB p65蛋白表达水平降低,Ach诱发的内皮依赖性血管舒张功能升高,胸主动脉SOD和细胞质NF-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论shRNA沉默Salusin-β可减轻DM大鼠内皮功能障碍,其作用机制可能与抑制NOX2/ROS/NF-κB信号通路活化有关。

脂蛋白相关磷脂酶A_(2)在动脉粥样硬化性心血管疾病诊治中的研究进展

动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD)是一类严重危害人类健康的疾病,冠心病和缺血性脑卒中是其中最常见且严重的疾病。脂蛋白相关磷脂酶A_(2)(Lp-PLA_(2))是一种新型的炎症标志物,参与了动脉粥样硬化的炎症机制,是ASCVD的独立危险因子。近年来,对于Lp-PLA_(2)在ASCVD的诊断和治疗方面的研究逐渐增多。目前Lp-PLA_(2)在冠心病、颈动脉狭窄和缺血性脑卒中的早期风险预测、危险程度评估、预后判定方面已具备一定的价值,也可作为辅助诊断的指标,但尚未成为有效的治疗靶点。

心系病证中医证候模型研究进展

中医证候动物模型是开展中医证候实验研究的必要条件,目前已越来越多地应用于中医心系疾病的实验研究,文章从应用概况、动物选择及造模方式对其进行综述。