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Alpha B-crystallin基因在结肠癌组织中的表达及其意义 被引量:1
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作者 杭晓声 汪道远 +1 位作者 王卫理 李莉华 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期140-143,共4页
目的探讨alpha B-crystallin基因在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌临床病理的相关性。方法采用RT-PCR方法检测64例结肠癌组织及其癌旁正常组织中alpha B-crystallin基因的表达,计算其阳性率;并用Western blot方法检测结肠癌组织及其癌... 目的探讨alpha B-crystallin基因在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌临床病理的相关性。方法采用RT-PCR方法检测64例结肠癌组织及其癌旁正常组织中alpha B-crystallin基因的表达,计算其阳性率;并用Western blot方法检测结肠癌组织及其癌旁正常组织中alpha B-crystallin蛋白的表达变化。结果alpha B-crystallin mRNA在结肠癌组织中表达的阳性率明显高于癌旁正常组织(P<0.01),在发生浆膜外转移者的表达阳性率明显高于浆膜内者(P<0.05),在较大肿瘤者中的表达阳性率明显高于较小肿瘤者,在有淋巴结转移者中的表达阳性率明显高于无淋巴结转移者(P<0.05),但与患者的性别、年龄、肿瘤的分化程度无关(P>0.05)。alpha B-crystallin蛋白在结肠癌组织中表达明显高于癌旁正常组织(P<0.01)。结论alpha B-crystallin基因的高表达可能与结肠癌的发生及侵袭转移有关。 展开更多
关键词 alpha b-crystallin 结肠癌 RT-PCR WESTERN BLOT
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Alpha B-crystallin基因在胃癌组织中的表达及其意义 被引量:1
2
作者 沈文香 李海 +2 位作者 沈刚 徐海源 周丽娜 《交通医学》 2008年第2期125-127,129,共4页
目的:探讨alpha B-crystallin基因在胃癌组织中的表达及其与胃癌的相关性。方法:采用RT-PCR方法检测64例胃癌组织及其癌旁正常组织中alpha B-crystallin基因的表达,计算其阳性率。结果:Alpha B-crys-tallin基因在胃癌组织中表达的阳性... 目的:探讨alpha B-crystallin基因在胃癌组织中的表达及其与胃癌的相关性。方法:采用RT-PCR方法检测64例胃癌组织及其癌旁正常组织中alpha B-crystallin基因的表达,计算其阳性率。结果:Alpha B-crys-tallin基因在胃癌组织中表达的阳性率明显高于癌旁正常组织(P<0.01),其浆膜外转移者的表达阳性率明显高于浆膜内者(P<0.05),较大肿瘤者的表达阳性率明显高于较小肿瘤者,有淋巴结转移者的表达阳性率明显高于无淋巴结转移者(P<0.05),但与患者的性别、年龄、肿瘤的分化程度无关(P>0.05)。结论:Alpha B-crystallin基因的高表达可能与胃癌的发生及转移有关。 展开更多
关键词 alpha b-crystallin 逆转录-聚合酶链反应 胃癌
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Alpha B-crystallin蛋白Ser^(59)磷酸化在肝细胞肝癌中的意义
3
作者 黄晓勇 柯爱武 +1 位作者 施国明 周俭 《中国临床医学》 2015年第6期734-737,共4页
目的:探讨alpha B-crystallin蛋白Ser^(59)磷酸化在肝细胞肝癌(肝癌)组织中的意义。方法:采用免疫组织化学染色法检测403例肝癌组织中磷酸化的alpha B-crystallin(Ser^(59))的表达水平,分析其与肝癌临床病理特征及预后的关系。结果:磷酸... 目的:探讨alpha B-crystallin蛋白Ser^(59)磷酸化在肝细胞肝癌(肝癌)组织中的意义。方法:采用免疫组织化学染色法检测403例肝癌组织中磷酸化的alpha B-crystallin(Ser^(59))的表达水平,分析其与肝癌临床病理特征及预后的关系。结果:磷酸化alpha B-crystallin的表达水平与肿瘤直径、肿瘤包膜、大血管侵犯及肿瘤组织分化有关(P<0.05、0.01),而与肝癌患者年龄、性别、乙肝表面抗原、肝硬化等无关(P>0.05)。多因素分析结果显示,磷酸化alpha B-crystallin的表达水平是肝癌的独立预后因素。结论:磷酸化alpha B-crystallin(Ser^(59))的表达水平与肝癌的恶性表型及不良预后相关。 展开更多
关键词 磷酸化alpha b-crystallin 肝细胞肝癌 预后
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Recombination and identification of human alpha B-crystallin 被引量:1
4
作者 Rui Wang Ze-Hua Chen +3 位作者 Yi Wang Hou-Bin Huang Si-Jun Fan Lan-Lan Chen 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2018年第12期1916-1921,共6页
AIM: To recombine the human alpha B-crystallin(αBcrystallin) using gene cloning technology and prokaryotic expression vector and confirm the biological activity of recombinant human αB-crystallin. METHODS: Cloning t... AIM: To recombine the human alpha B-crystallin(αBcrystallin) using gene cloning technology and prokaryotic expression vector and confirm the biological activity of recombinant human αB-crystallin. METHODS: Cloning the human αB-crystallin cDNA according to the nucleotide sequence of the human αBcrystallin, constructing the pET-28/CRYAB prokaryotic expression plasmid by restriction enzyme digestion method, and stably expressing transformed into the Escherichia coli(E. coli) DH5 alpha. The recombinant human αB-crystallin was purified by Q sepharose. By enzyme digestion analysis, Western blotting and sequencing, the recombinant human αB-crystallin was identified and the activity of its molecular protein was detected.RESULTS: Compared with the gene bank(GeneBank), the cloned human sequence of human αB-crystallin cDNA has the same open reading frame. Identification and sequencing of the cloned human αB-crystallin cDNA in prokaryotic expression vector confirmed the full length sequence, and the vector was constructed successfully. The E. coli containing plasmid pET-28/CRYAB induced by isopropyl-β-D-thiogalactoside successfully expressed the human αB-crystallin. Insulin confirmed that the recombinant human αB-crystallin has a molecular chaperone activity. CONCLUSION: The prokaryotic expression vector pET-28/CRYAB of recombinant human αB-crystallin issuccessfully constructed, and the recombinant human αBcrystallin with molecular chaperone activity is obtained, which lay a foundation for the research and application of the recombinant human αB-crystallin and its chaperone activity. 展开更多
关键词 human alpha b-crystallin GENE vector construction IDENTIFICATION recombination
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EFFECTS OF INTEGRIN ALPHAⅡb^(R995A) MUTATION ON RECEPTOR AFFINITY AND pp125 (FAK) PHOSPHORYLATION
5
作者 Xue-yuanTang Zai-fuJian +2 位作者 Guo-pingWang Hong-huiYang WeiLiu 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2004年第4期276-281,共6页
Objective To investigate the role of cytoplasmic domain of integrin alphaⅡb in platelet signal transduction. Methods Binding capacity of integrin alphaⅡb R995A to antibody platelet activation complex-1 (PAC-1) and p... Objective To investigate the role of cytoplasmic domain of integrin alphaⅡb in platelet signal transduction. Methods Binding capacity of integrin alphaⅡb R995A to antibody platelet activation complex-1 (PAC-1) and pp125 focal adhesion kinase (FAK) phosphorylation of cells were detected by flow cytometry, immune precipitation, and Western blotting. Results Without activation, wild-type alphaⅡbbeta3 Chinese hamster ovary (CHO) cells failed to bind to PAC-1, but mutant chimera alphaⅡb R995A beta3 CHO cells were able to bind with PAC-1. Furthermore, phosphorylation of pp125 (FAK) in wild-type alphaⅡbbeta3 CHO cells occured only when cells were adhered to fibrinogen, but could not be detected in bovine serum albumin suspension. However in the mutant chimera group, it could be detected in both conditions. Conclusion The mutation in integrin alphaⅡb R995A alters its affinity state as a receptor, thus also mediating cytoplasmic signal transduction leading to the phosphorylation of pp125 (FAK) without ligand binding. 展开更多
关键词 integrin alphaⅡbbeta3 signal transduction pp125 focal adhesion kinase phosphorylATION
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C2神经酰胺对帕金森病模型鼠多巴胺能神经元的保护作用
6
作者 李家慧 齐雪 +3 位作者 朱远峰 禹璐 刘立峰 王鹏 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第11期1653-1659,共7页
背景:C2神经酰胺可减少Alpha突触核蛋白(Alpha-Synuclein,α-Syn)寡聚体的形成,其作为蛋白磷酸酶2A激动剂在中枢神经系统对细胞老化具有重要调节作用。目的:探究C2神经酰胺对多巴胺能神经元的保护作用机制。方法:将25只C57BL/6系小鼠随... 背景:C2神经酰胺可减少Alpha突触核蛋白(Alpha-Synuclein,α-Syn)寡聚体的形成,其作为蛋白磷酸酶2A激动剂在中枢神经系统对细胞老化具有重要调节作用。目的:探究C2神经酰胺对多巴胺能神经元的保护作用机制。方法:将25只C57BL/6系小鼠随机分为对照组、模型组及C2神经酰胺低、中、高剂量组,每组5只。除对照组之外,其他各组均通过左侧纹状体注射突变型A53Tα-Syn寡聚体建立帕金森病小鼠模型,在纹状体注射第30天后,3个C2神经酰胺各剂量组小鼠一次性经胃灌注溶于生理盐水中的各剂量C2神经酰胺(1,5,10μg/g),对照组及模型组同法灌注等量生理盐水,于造模后第30-90天,连续每天给药,共60 d,期间观察各组小鼠行为学变化。在纹状体注射第90天后,在适度麻醉条件下对各组小鼠灌注取脑,以免疫组织化学染色分析小鼠中脑黑质多巴胺能神经元的变化,以ELISA法检测小鼠中脑α-Syn寡聚化和磷酸化水平,并分析影响α-Syn磷酸化的相关酶活性变化。结果与结论:①C2神经酰胺对经纹状体注射的突变型A53Tα-Syn寡聚体所导致的小鼠帕金森病样运动障碍具有改善作用,且C2神经酰胺高剂量组对帕金森病模型鼠运动障碍的改善作用更为明显(P<0.01);②突变型A53Tα-Syn寡聚体致使小鼠中脑黑质多巴胺能神经元数目明显减少(P<0.01),而C2神经酰胺高剂量组黑质多巴胺能神经元数目则明显增多(P<0.01);③与模型组相比,C2神经酰胺高剂量组小鼠中脑内α-Syn寡聚体和磷酸化α-Syn水平明显降低(P<0.01),而神经酰胺的水平增高(P<0.05),蛋白磷酸酶2A活力明显上调(P<0.01);④上述数据说明,C2神经酰胺可通过改善小鼠中脑组织α-Syn的磷酸化修饰环境,缓解了由寡聚的α-Syn所诱导的神经毒性作用,保护了小鼠中脑黑质多巴胺能神经元数量的减少,从而减轻帕金森病的运动障碍程度。 展开更多
关键词 C2神经酰胺 多巴胺能神经元 帕金森病 alpha突触核蛋白 蛋白磷酸酶2A 寡聚体 磷酸化 保护作用
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助脉二仙汤联合镇心膏穴位贴敷治疗缓慢型心律失常患者的临床研究
7
作者 夏艳斐 王艳敏 《中国合理用药探索》 CAS 2024年第4期5-11,共7页
目的:探讨助脉二仙汤联合镇心膏穴位贴敷治疗缓慢型心律失常患者的临床疗效及对患者心功能、炎症因子水平的影响。方法:选取2021年2月~2023年2月期间于某院就诊的120例缓慢型心律失常患者作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和观察... 目的:探讨助脉二仙汤联合镇心膏穴位贴敷治疗缓慢型心律失常患者的临床疗效及对患者心功能、炎症因子水平的影响。方法:选取2021年2月~2023年2月期间于某院就诊的120例缓慢型心律失常患者作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组60例。对照组患者给予硫酸阿托品片治疗,观察组在对照组治疗基础上加用助脉二仙汤口服、镇心膏穴位贴敷治疗,两组均治疗4周。比较两组患者临床疗效、中医证候积分、心功能[心脏指数(CI)、每搏输出量(SV)、左室射血分数(LVEF)]、炎症因子[白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化细胞核转录因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)]水平及不良反应发生情况。结果:治疗后,观察组患者治疗总有效率(96.67%)高于对照组(83.33%,P<0.05);两组患者心悸胸闷、短气乏力、身寒肢冷、面色晦暗、胸痛、腰膝酸软得分均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);两组患者CI、SV、LVEF均升高(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05);两组患者IL-6、IL-8、hs-CRP、NF-κB p65及p-IκBα均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);两组患者用药期间均未发生明显不良反应。结论:在硫酸阿托品片的治疗基础上联合助脉二仙汤口服、镇心膏穴位贴敷治疗缓慢型心律失常临床疗效较佳,可有效减轻患者临床症状,改善心功能,减轻炎症反应,且安全性较高。 展开更多
关键词 助脉二仙汤 镇心膏穴位贴敷 缓慢型心律失常 心功能 磷酸化细胞核转录因子κB抑制蛋白α
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Mechanism of alpha-lipoic acid in attenuating kanamycin-induced ototoxicity 被引量:2
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作者 Aimei Wang Ning Hou +2 位作者 Dongyan Bao Shuangyue Liu Tao Xu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第35期2793-2800,共8页
In view of the theory that alpha-lipoic acid effectively prevents cochlear cells from injury caused by various factors such as cisplatin and noise, this study examined whether alpha-lipoic acid can prevent kanamycin-i... In view of the theory that alpha-lipoic acid effectively prevents cochlear cells from injury caused by various factors such as cisplatin and noise, this study examined whether alpha-lipoic acid can prevent kanamycin-induced ototoxicity. To this end, healthy BALB/c mice were injected subcutaneously with alpha-lipoic acid and kanamycin for 14 days. Auditory brainstem response test showed that increased auditory brainstem response threshold shifts caused by kanamycin were significantly inhibited. Immunohistochemical staining and western blot analysis showed that the expression of phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase and phosphorylated c-Jun N-terminal kinase in mouse cochlea was significantly decreased. The experimental findings suggest that phosphorylated p38 and phosphorylated c-Jun N-terminal kinase mediated kanamycin-induced ototoxic injury in BALB/c mice. AIpha-lipoic acid effectively attenuated kanamycin ototoxicity by inhibiting the kanamycin-induced high expression of phosphorylated p38 and phosphorylated c-Jun N-terminal kinase. 展开更多
关键词 alpha-lipoic acid KANAMYCIN mouse COCHLEA p38 mitogen-activated protein kinase c-JunN-terminal kinase auditory brainstem response phosphorylation hearing loss western blot immunohistochemistry
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PPM1A和P-Smad2在原发性肝癌中表达及意义研究 被引量:3
9
作者 吴淑坤 王宝菊 +4 位作者 杨燕 鲍俊杰 田拥军 冯新华 杨东亮 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2007年第4期330-333,共4页
目的探讨肝癌及癌旁组织中P-Smad2蛋白与PPM1A的表达及意义。方法采用免疫组织化学技术检测31份肝癌(HCC)、25份癌旁组织及13份非癌性肝组织中P-Smad2蛋白和PPM1A的表达。结果①癌旁和病理分级小于Ⅱ级的癌组织中PPM1A表达以核为主,胞... 目的探讨肝癌及癌旁组织中P-Smad2蛋白与PPM1A的表达及意义。方法采用免疫组织化学技术检测31份肝癌(HCC)、25份癌旁组织及13份非癌性肝组织中P-Smad2蛋白和PPM1A的表达。结果①癌旁和病理分级小于Ⅱ级的癌组织中PPM1A表达以核为主,胞浆表达弱或不表达,病理分级大于Ⅲ级及以上的癌细胞中则以胞浆表达为主,正常、慢性肝炎和肝硬化组织中,PPM1A表达以核为主,胞浆无表达,差别有统计学意义(P<0.05)。②P-Smad2在正常肝细胞、慢性肝炎、肝硬化、癌旁和病理分级Ⅰ-Ⅱ级的癌组织中表达以胞核和胞浆明显,胞浆表达主要聚集在核周,病理分级分级Ⅱ-Ⅲ级及以上的癌组织中,P-Smad2表达则以核为主,差别有显著性(P<0.05)。③PPM1A和P-Smad2在癌组织的表达部位呈现负相关性(r=-0.345,P=0.001)。结论PPM1A与P-Smad2在肝癌组织的胞核和胞浆表达转位及强度与其组织病理改变有密切关系,二者可能通过其相互作用,共同参与肝癌的发生发展机制。 展开更多
关键词 原发性肝细胞癌 P-Smad2 PPM1A
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TNF琢对体外培养的人脂肪细胞葡萄糖摄取和IRS-1酪氨酸磷酸化的影响 被引量:3
10
作者 王竹晨 顾熊飞 +3 位作者 卢汉平 高锦辉 杨冬梓 邝健全 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期48-50,60,共4页
【目的】探讨肿瘤坏死因子琢(TNF琢)对体外培养的人脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取和胰岛素受体底物1(IRS-1)酪氨酸磷酸化的影响,为多囊卵巢综合征(PCOS)的胰岛素抵抗(IR)病因学研究提供新的实验依据。【方法】脂肪细胞葡萄糖摄取的测... 【目的】探讨肿瘤坏死因子琢(TNF琢)对体外培养的人脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取和胰岛素受体底物1(IRS-1)酪氨酸磷酸化的影响,为多囊卵巢综合征(PCOS)的胰岛素抵抗(IR)病因学研究提供新的实验依据。【方法】脂肪细胞葡萄糖摄取的测定采用3H标脱氧右旋葡萄糖(2-[3H]DG)吸收法,IRS-1酪氨酸磷酸化的检测采用免疫沉淀、Western印迹和增强化学发光蛋白免疫印迹法及图像分析。【结果】①胰岛素(100nmol/L)作用下,TNF琢刺激浓度分别为0、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL时,脂肪细胞2-[3H]DG的摄取分别为(652±203)U,(609±172)U,(511±135)U和(404±168)U,当TNF琢刺激浓度达20ng/mL时,脂肪细胞对葡萄糖摄取的降低有显著性差异(P<0.05)。②胰岛素(100nmol/L)刺激下IRS-1的酪氨酸磷酸化在TNF琢(5ng/mL)作用时(74.50%±16.86%)较无TNF琢作用(94.00%±14.70%)有所降低,但无显著性差异;当TNF琢刺激浓度分别为10ng/mL(31.16%±10.44%)和20ng/mL(27.33%±9.63%)时,胰岛素(100nmol/L)刺激后IRS-1的酪氨酸磷酸化明显降低(P<0.001)。【结论】①TNF琢刺激浓度的升高可抑制体外培养的人脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取。②TNF琢可抑制体外培养的人脂肪细胞胰岛素刺激的IRS-1的酪氨酸磷酸化,并存在一定的量效关系。 展开更多
关键词 IRS-1 TNFα 脂肪细胞 葡萄糖摄取 酪氨酸磷酸化 体外培养 胰岛素 刺激 蛋白免疫印迹法 信号传导
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知母-黄芪散复方通过TNF-α/JNK通路改善阿尔茨海默症大鼠认知障碍的研究 被引量:12
11
作者 刘静 高颖 +4 位作者 杨利 丁嘉华 高英 周欣欣 李卫民 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期320-326,共7页
目的研究知母-黄芪散复方通过TNF-α/JNK通路改善阿尔茨海默症大鼠认知障碍的作用机制及其药效初探。方法取雄性SD大鼠50只,根据基础血糖和体质量水平随机分为5组,每组10只,即正常组,模型组,知母组,黄芪散组,知母-黄芪散组;采用腹腔注... 目的研究知母-黄芪散复方通过TNF-α/JNK通路改善阿尔茨海默症大鼠认知障碍的作用机制及其药效初探。方法取雄性SD大鼠50只,根据基础血糖和体质量水平随机分为5组,每组10只,即正常组,模型组,知母组,黄芪散组,知母-黄芪散组;采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合喂食高脂饲料+AlCL_3灌胃的方法建立模型,连续灌胃20周。分别在给药第8、16周时,测定空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平;结合Barnes迷宫检测大鼠的认知状况;给药20周时,测定血浆TNF-α、P-JNK、Aβ_(1-42)蛋白及INS水平,结合Morris水迷宫检测大鼠的认知能力;给药20周结束,解剖保存大鼠脑组织、海马组织作病理形态学观察。结果给药8周、16周时,与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖(FPG)、TC、TG水平均显著性升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,知母-黄芪散组可有效降低模型大鼠FPG、TC、TG水平(P<0.05);给药20周,与正常组比较,模型组大鼠血浆TNF-α、P-JNK、Aβ_(1-42)水平也明显升高(P<0.01);与模型组比较,经连续给药后,知母组,知母-黄芪散组大鼠血浆TNF-α、P-JNK、Aβ1-42水平均显著降低(P<0.05,P<0.01);行为学实验结果显示,与模型组比较,知母-黄芪散组表现出较显著的改善记忆、认知行为的作用(P<0.05,P<0.01);组织形态学结果显示,正常组大鼠海马CAI区神经元排列整齐,形态规则,着色均匀;与模型组比较,知母组可有效改善大鼠海马组织神经元形态及细胞排列形态,修复神经损伤,大鼠胰腺病理形态改变与海马CAI区神经元病理改变具有一定正相关趋势。结论知母组及知母-黄芪散组不仅降糖效果明显,并且可以通过调节TNF-α/JNK通路改善STZ+高脂饲料+AlCL_3灌胃喂养诱导实验性阿尔茨海默症大鼠认知、记忆能力。 展开更多
关键词 知母 知母-黄芪散 阿尔茨海默病 3型糖尿病 AΒ1-42 TNF-Α P-JNK
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肝癌细胞中CDK2调控宿主限制性因子SAMHD1的磷酸化机制研究
12
作者 唐丹 胡杰 +4 位作者 乔淼 陈彦猛 周星 皮思碟 胡源 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期629-633,共5页
目的:主要研究乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染肝细胞后,细胞周期激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)调控宿主限制性因子SAMHD1(sterile alpha motif and histidine/aspartic acid domain-containing protein 1)磷酸化的分子... 目的:主要研究乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染肝细胞后,细胞周期激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)调控宿主限制性因子SAMHD1(sterile alpha motif and histidine/aspartic acid domain-containing protein 1)磷酸化的分子机制。方法:利用si RNA干扰技术,特异性处理肝癌细胞Huh7.0的对照组、干扰CDK1组和干扰CDK2组,分别用Southern blot检测这3组中乙肝病毒复制的变化,Western blot检测这3组中SAMHD1磷酸化水平的变化,流式细胞仪检测这3组中细胞周期的变化;进一步通过免疫共沉淀技术鉴定肝癌细胞中CDK2激酶和SAMHD1的相互作用。结果:在肝癌细胞Huh7.0中,与对照组相比,干扰CDK1组和干扰CDK2组的细胞周期明显有差异,分别停滞在G_2期(P=0.001)或G1期(P=0.001)。Western blot结果表明,干扰CDK2后,宿主限制性因子SAMHD1磷酸化水平下降48%,Southern blot结果表明病毒复制水平降低57%(P=0.003),而干扰CDK1后病毒复制水平没有明显变化(P=0.325)进一步通过免疫共沉淀发现在肝癌细胞Huh7.0中,CDK2激酶可与SAMHD1发生相互作用,并且相互作用发生在细胞核内。结论:HBV感染肝细胞后,募集CDK2调控宿主限制性因子SAMHD1的磷酸化,拮抗其抗病毒作用。 展开更多
关键词 乙肝病毒 SAHMD1 细胞周期激酶2 磷酸化
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Alpha B-crystallin在肺鳞状细胞癌中的表达及意义
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作者 仲楼 《临床医学》 CAS 2012年第2期59-60,共2页
目的探讨Alpha B-crystallin在肺鳞状细胞癌组织中的表达及其意义。方法通过RT-PCR方法检测44例肺鳞状细胞癌患者癌组织中及其癌旁相对正常组织中Alpha B-crystallin的表达情况。结果 Alpha B-crystallin mRNA在肺鳞状细胞癌患者癌组织... 目的探讨Alpha B-crystallin在肺鳞状细胞癌组织中的表达及其意义。方法通过RT-PCR方法检测44例肺鳞状细胞癌患者癌组织中及其癌旁相对正常组织中Alpha B-crystallin的表达情况。结果 Alpha B-crystallin mRNA在肺鳞状细胞癌患者癌组织中表达的阳性率显著高于其在癌旁相对正常组织中的表达阳性率(P<0.01),在有淋巴结转移患者癌组织中表达的阳性率明显高于其在无淋巴结转移患者癌组织中的表达阳性率(P<0.05),在较大肿瘤者中的表达阳性率明显高于其在较小肿瘤中的表达(P<0.05),但与患者的性别、年龄以及肿瘤的分化程度无关(P>0.05)。结论 Alpha B-crystallin在肺鳞状细胞癌组织中的高表达可能与肺鳞状细胞癌的发生、发展及侵袭转移相关。 展开更多
关键词 肺鳞状细胞癌 alpha b-crystallin RT-PCR
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病毒靶向人Ⅰ型干扰素受体1的负调控机制 被引量:1
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作者 陈邦涛 王誉雅 彭宜红 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期140-145,共6页
人Ⅰ型干扰素(type Ⅰ interferon,IFN-Ⅰ)的诱生和应答在机体抗病毒固有免疫中发挥重要作用。但病毒多可逃逸宿主此类抗病毒免疫,导致感染和致病。Ⅰ型干扰素受体(interferon alpha receptor,IFNAR)是识别及结合IFN-I的一种跨细胞膜蛋... 人Ⅰ型干扰素(type Ⅰ interferon,IFN-Ⅰ)的诱生和应答在机体抗病毒固有免疫中发挥重要作用。但病毒多可逃逸宿主此类抗病毒免疫,导致感染和致病。Ⅰ型干扰素受体(interferon alpha receptor,IFNAR)是识别及结合IFN-I的一种跨细胞膜蛋白受体,其IFNAR1亚型在干扰素发挥抗病毒效应的启动阶段发挥关键作用;本文从IFNAR1蛋白质的表达、降解及其功能等方面,概述病毒以IFNAR1为靶点负调控IFN-I的抗病毒机制,以期为该领域基础研究和临床抗病毒策略提供有益的参考依据。 展开更多
关键词 Ⅰ型干扰素 Ⅰ型干扰素受体1 病毒 磷酸化 泛素化
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Effect of moxibustion on mTOR-mediated autophagy in rotenone-induced Parkinson's disease model rats 被引量:21
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作者 Shu-ju Wang Qi Wang +3 位作者 Jun Ma Pei-hao Yu Zhong-ming Wang Bin Wang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第1期112-118,共7页
Defects in autophagy-mediated clearance of α-synuclein may be one of the key factors leading to progressive loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra. Moxibustion therapy for Parkinson’s disease has been ... Defects in autophagy-mediated clearance of α-synuclein may be one of the key factors leading to progressive loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra. Moxibustion therapy for Parkinson’s disease has been shown to have a positive effect, but the underlying mechanism remains unknown. Based on this, we explored whether moxibustion could protect dopaminergic neurons by promoting autophagy mediated by mammalian target of rapamycin (mTOR), with subsequent elimination of α-syn. A Parkinson’s disease model was induced in rats by subcutaneous injection of rotenone at the back of their necks, and they received moxibustion at Zusanli (ST36), Guanyuan (CV4)and Fengfu (GV16), for 10 minutes at every point, once per day, for 14 consecutive days. Model rats without any treatment were used as a sham control. Compared with the Parkinson’s disease group, the moxibustion group showed significantly greater tyrosine hydroxylase immunoreactivity and expression of light chain 3-II protein in the substantia nigra, and their behavioral score, α-synuclein immunoreactivity,the expression of phosphorylated mTOR and phosphorylated ribosomal protein S6 kinase (p-p70S6K) in the substantia nigra were significantly lower. These results suggest that moxibustion can promote the autophagic clearance of α-syn and improve behavioral performance in Parkinson’s disease model rats. The protective mechanism may be associated with suppression of the mTOR/p70S6K pathway. 展开更多
关键词 nerve regeneration NEURODEGENERATION Parkinson's disease acupuncture MOXIBUSTION ROTENONE alpha-SYNUCLEIN AUTOPHAGY phosphorylated mammalian target of rapamycin kinase phosphorylated ribosomal protein S6 kinase light chain 3-II neural regeneration
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颅痛颗粒对偏头痛模型大鼠行为学及NF-κB信号转导通路的影响 被引量:3
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作者 蒲玉婷 王小强 +1 位作者 杨思进 白雪 《广州中医药大学学报》 CAS 2019年第4期569-573,共5页
【目的】观察颅痛颗粒(袪风药合虫类药)对偏头痛模型大鼠行为学及核因子κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨其作用机制。【方法】将60只雄性大鼠随机分为正常组,模型组,西药组,中药高、中、低剂量组,每组10只。中药高、中、低剂量组大鼠分... 【目的】观察颅痛颗粒(袪风药合虫类药)对偏头痛模型大鼠行为学及核因子κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨其作用机制。【方法】将60只雄性大鼠随机分为正常组,模型组,西药组,中药高、中、低剂量组,每组10只。中药高、中、低剂量组大鼠分别给予颅痛颗粒(剂量为4.0、2.0、1.0 g·kg-1·d-1)灌胃,西药组给予舒马普坦(剂量为6.0 mg·kg-1·d-1)灌胃,正常组、模型组给予等体积蒸馏水灌胃,连续灌胃7 d后,给予大鼠颈背部皮下一次性注射10 mg/kg硝酸甘油复制偏头痛模型,观察大鼠行为学改变,Western blot法检测脑干NF-κBp65、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)的表达。【结果】(1)行为学变化:与正常组比较,模型组大鼠挠头及爬笼次数均明显增加(P <0.05),于造模后2~5 min出现双耳发红现象;与模型组比较,中药高、中、低剂量组及西药组大鼠挠头及爬笼次数均明显减少,耳红出现时间延后,耳红持续时间缩短(P <0.05),且中药各剂量组的治疗作用呈剂量依赖性。(2)NF-κBp65、p-IκBα的表达:与正常组比较,模型组脑干NF-κBp65、p-IκBα蛋白表达升高;与模型组比较,中药高、中、低剂量组及西药组NF-κBp65、p-IκBα蛋白表达均降低(P <0.05),且中药各剂量组的治疗作用呈剂量依赖性。【结论】颅痛颗粒可改善偏头痛大鼠的行为学变化,其作用机制可能与抑制脑干NF-κB信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 袪风药 虫类药 颅痛颗粒 偏头痛 行为学 NF-ΚB p-IκBα 疾病模型 动物 大鼠
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缺氧诱导因子1α对大鼠血管内皮细胞通透性的调控作用及相关机制 被引量:3
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作者 胡德林 余又新 +8 位作者 梁荣 周舜英 段声梁 蒋智永 孟承颖 蒋薇 王欢 孙业祥 方林森 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期209-217,共9页
目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对大鼠血管内皮细胞通透性的调控作用及相关机制。方法取12只雄性SD大鼠,35~38d龄,分离主动脉培养血管内皮细胞,4d后观察细胞形态,并取第2或3代细胞进行以下实验。(1)取大鼠血管内皮细胞,采用随机数字... 目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对大鼠血管内皮细胞通透性的调控作用及相关机制。方法取12只雄性SD大鼠,35~38d龄,分离主动脉培养血管内皮细胞,4d后观察细胞形态,并取第2或3代细胞进行以下实验。(1)取大鼠血管内皮细胞,采用随机数字表法(分组方法下同)分为空白对照组、阴性对照组、HIF-1α干扰序列1组、HIF-1α干扰序列2组和HIF-1α干扰序列3组,每组3孔。阴性对照组和HIF-1α干扰序列1组、HIF-1α干扰序列2组和HIF-1α干扰序列3组细胞经脂质体2000分别转染GV248空质粒和含HIF-1α干扰序列1、干扰序列2、干扰序列3的GV248重组质粒,空白对照组细胞仅加入脂质体2000。转染24h后,采用实时荧光定量反转录PCR法和蛋白质印迹法(检测方法下同)分别检测各组细胞HIF-1α的mRNA和蛋白的表达,选取干扰效率最高的序列。(2)另取大鼠血管内皮细胞,分为空白对照组、阴性对照组和HIF-1α低表达组,每组3孔。空白对照组细胞仅加入脂质体2000,阴性对照组和HIF-1α低表达组细胞经脂质体2000分别转染GV248空质粒及实验(1)中筛选的低表达HIF-1α重组质粒。培养14d,检测各组细胞HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平。(3)另取大鼠血管内皮细胞,分为空白对照组、阴性对照组、HIF-1α高表达组,每组3孔。空白对照组细胞仅加入脂质体2000,阴性对照组、HIF-1α高表达组细胞经脂质体2000分别转染GV230空质粒和HIF-1α高表达重组质粒。培养14d,检测各组细胞HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平。(4)取实验(1)中3组、实验(2)中3组细胞,检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)和带状闭合蛋白1(ZO-1)的mRNA和蛋白表达水平。对数据行单因素方差分析、t检验。结果培养4d,细胞呈梭形,成功培养出大鼠血管内皮细胞。(1)HIF-1α干扰序列1组、HIF-1α干扰序列2组和HIF-1α干扰序列3组细胞HIF-1α的干扰效率分别为47.66%、45.79%、62.62%,干扰序列3组细胞干扰效率最高。转染24h后,HIF-1α干扰序列3组细胞HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平明显低于空白对照组(t=18.404、9.140,P<0.01)及阴性对照组(t=15.099、7.096,P<0.01)。(2)培养14d后,HIF-1α低表达组细胞HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平明显低于空白对照组(t=21.140、5.440,P<0.01)和阴性对照组(t=14.310、5.210,P<0.01)。(3)培养14d后,HIF-1α高表达组细胞HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平明显高于空白对照组(t=19.160,7.710,P<0.01)及阴性对照组(t=19.890、7.500,P<0.01)。(4)转染24h后,HIF-1α低表达组细胞MLCK、p-MLC的mRNA表达水平显著低于空白对照组(t=2.709、4.011,P<0.05或P<0.01)和阴性对照组(t=2.373、3.744,P<0.05或P<0.01),HIF-1α低表达组细胞ZO-1的mRNA表达水平显著高于空白对照组和阴性对照组(t=4.285、5.050,P<0.01)。HIF-1α高表达组细胞MLCK、p-MLC的mRNA表达水平显著高于空白对照组(t=9.118、11.313,P<0.01)和阴性对照组(t=9.073、11.280,P<0.01),HIF-1α高表达组细胞ZO-1的mRNA表达水平显著低于空白对照组和阴性对照组(t=2.889、2.640,P<0.05)。(5)转染24h后,HIF-1α低表达组细胞MLCK、p-MLC的蛋白表达水平显著低于空白对照组(t=2.652、3.983,P<0.05或P<0.01)和阴性对照组(t=2.792、4.065,P<0.05或P<0.01),HIF-1α低表达组细胞ZO-1的蛋白表达显著高于空白对照组和阴性对照组(t=3.881、3.570,P<0.01)。HIF-1α高表达组细胞MLCK、p-MLC的蛋白表达水平为1.18±0.24、0.68±0.22,显著高于空白对照组的0.41±0.21、0.35±0.14(t=5.011、3.982,P<0.05或P<0.01)和阴性对照组的0.43±0.20、0.36±0.12(t=4.880、3.862,P<0.05或P<0.01)。HIF-1α高表达组细胞ZO-1的蛋白表达水平为0.08±0.06,显著低于空白对照组的0.20±0.09和阴性对照组的0.19±0.09(t=4.178、3.830,P<0.05或P<0.01)。结论HIF-1α通过上调MLCK、p-MLC,下调ZO-1的表达,从而增加大鼠血管内皮细胞通透性。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子 α亚基 血管 通透性 内皮细胞 肌球蛋白轻链激酶 磷酸化肌球蛋白轻链 带状闭合蛋白1
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α-Synuclein在功能性便秘患者结肠的表达及磷酸化修饰
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作者 宣琪 刘殿刚 +2 位作者 王爱磊 陈晶 崔叶青 《中国卫生检验杂志》 CAS 2017年第12期1679-1681,1685,共4页
目的研究α-Synuclein(α-syn)及磷酸化α-syn(P-syn)在功能性便秘患者结肠黏膜的表达。方法应用免疫荧光双重标记和显微图像分析技术,比较21例功能性便秘和22例对照组结肠黏膜α-syn和P-syn的表达情况。结果 2组肠黏膜神经元及胶质细... 目的研究α-Synuclein(α-syn)及磷酸化α-syn(P-syn)在功能性便秘患者结肠黏膜的表达。方法应用免疫荧光双重标记和显微图像分析技术,比较21例功能性便秘和22例对照组结肠黏膜α-syn和P-syn的表达情况。结果 2组肠黏膜神经元及胶质细胞均有α-syn和P-syn表达,存在共定位。功能性便秘组结肠黏膜层及黏膜下层α-syn积分光密度(IOD)分别为1 513.50±93.21和1 398.65±74.32,显著高于对照组(1 027.10±57.81和995.03±68.32),差异有统计学意义(P<0.05)。功能性便秘组结肠黏膜层及黏膜下层P-syn的IOD(790.25±39.41和432.09±18.99)显著高于对照组(535.87±35.72和310.90±27.26),差异有统计学意义(P<0.05)。结论结肠黏膜神经元及胶质细胞α-syn的聚集及磷酸化可能与功能性便秘发病机制相关。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 磷酸化 功能性便秘 结肠
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肿瘤坏死因子-α对α粒子致叙利亚地鼠胚胎细胞恶性转化的促进作用
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作者 朱茂祥 郭仁锋 +1 位作者 杨陟华 龚诒芬 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期6-10,共5页
目的阐明辐射致癌过程中肿瘤坏死因子α(TNFα)的作用及蛋白质酪氨酸磷酸化调节机理。方法以05Gyα粒子照射的叙利亚地鼠胚胎(SHE)细胞为靶细胞,观察细胞生长曲线、转化频率(TF)、软琼脂克隆形成率(CFE)... 目的阐明辐射致癌过程中肿瘤坏死因子α(TNFα)的作用及蛋白质酪氨酸磷酸化调节机理。方法以05Gyα粒子照射的叙利亚地鼠胚胎(SHE)细胞为靶细胞,观察细胞生长曲线、转化频率(TF)、软琼脂克隆形成率(CFE)和裸鼠致瘤性,并测定细胞中蛋白质酪氨酸激酶和酪氨酸磷酸酶活性。结果单纯0.5Gyα粒子照射或TNFα不能使SHE细胞发生恶性转化,600U/mlTNFα处理0.5Gyα粒子照射的SHE细胞后,细胞获得了长期传代的能力,TF、CFE以及细胞中蛋白质酪氨酸磷酸化水平均明显增高,裸鼠致瘤性试验为阳性。结论TNFα对α粒子致SHE细胞转化有显著促进作用。 展开更多
关键词 TNF-α SHE α粒子照射 细胞转化 PTP
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蛋白质磷酸化位点富集与鉴定方法的建立与应用 被引量:2
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作者 李蕾 邢昊 +3 位作者 胡家 杨慧 薛冰 赵君朋 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1348-1352,共5页
建立了一种用Ti O2填料,自制色谱小柱,从而实现磷酸化肽段富集的方法,填料负载量可根据需求调整等优势。质谱分析显示,Ti O2小柱可以实现标准磷酸化蛋白质修饰位点的识别,针对alpha-casein的分析显示,结合液相色谱串联质谱鉴定,可以获... 建立了一种用Ti O2填料,自制色谱小柱,从而实现磷酸化肽段富集的方法,填料负载量可根据需求调整等优势。质谱分析显示,Ti O2小柱可以实现标准磷酸化蛋白质修饰位点的识别,针对alpha-casein的分析显示,结合液相色谱串联质谱鉴定,可以获得15个磷酸化修饰位点。方法用于突触核蛋白(α-synuclein)磷酸化修饰位点的鉴定,确认了数据库中的S87,T125 2个修饰位点,同时发现了11个新的修饰位点。有望促进磷酸化蛋白质质谱分析技术在基础与临床研究实验室的推广应用。 展开更多
关键词 生物质谱 磷酸化修饰 磷酸化修饰位点 突触核蛋白
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