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Supplemental N-acyl homoserine lactonase alleviates intestinal disruption and improves gut microbiota in broilers challenged by Salmonella Typhimurium 被引量:1
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作者 Weiwei Wang Jingseng Ou +5 位作者 Hui Ye Qingyun Cao Changming Zhang Zemin Dong Dingyuan Feng Jianjun Zuo 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 SCIE CAS CSCD 2023年第4期1598-1616,共19页
Background Salmonella Typhimurium challenge causes a huge detriment to chicken production.N-acyl homoserine lactonase(AHLase),a quorum quenching enzyme,potentially inhibits the growth and virulence of Gram-negative ba... Background Salmonella Typhimurium challenge causes a huge detriment to chicken production.N-acyl homoserine lactonase(AHLase),a quorum quenching enzyme,potentially inhibits the growth and virulence of Gram-negative bacteria.However,it is unknown whether AHLase can protect chickens against S.Typhimurium challenge.This study aimed to evaluate the effects of AHLase on growth performance and intestinal health in broilers challenged by S.Typhimurium.A total of 240 one-day-old female crossbred broilers(817C)were randomly divided into 5 groups(6 replicates/group):negative control(NC),positive control(PC),and PC group supplemented with 5,10 or 20 U/g AHLase.All birds except those in NC were challenged with S.Typhimurium from 7 to 9 days of age.All parameters related to growth and intestinal health were determined on d 10 and 14.Results The reductions(P<0.05)in body weight(BW)and average daily gain(ADG)in challenged birds were alleviated by AHLase addition especially at 10 U/g.Thus,samples from NC,PC and PC plus 10 U/g AHLase group were selected for further analysis.S.Typhimurium challenge impaired(P<0.05)intestinal morphology,elevated(P<0.05)ileal inflammatory cytokines(IL-1βand IL-8)expression,and increased(P<0.05)serum diamine oxidase(DAO)activity on d 10.However,AHLase addition normalized these changes.Gut microbiota analysis on d 10 showed that AHLase reversed the reductions(P<0.05)in several beneficial bacteria(e.g.Bacilli,Bacillales and Lactobacillales),along with increases(P<0.05)in certain harmful bacteria(e.g.Proteobacteria,Gammaproteobacteria,Enterobacteriaceae and Escherichia/Shigel a)in PC group.Furthermore,AHLase-induced increased beneficial bacteria and decreased harmful bacteria were basically negatively correlated(P<0.05)with the reductions of ileal IL-1βand IL-8 expression and serum DAO activity,but positively correlated(P<0.05)with the increased BW and ADG.Functional prediction revealed that AHLase abolished S.Typhimurium-induced upregulations(P<0.05)of certain pathogenicity-related pathways such as lipopolysaccharide biosynthesis,shigellosis,bacterial invasion of epithelial cells and pathogenic Escherichia coli infection of gut microbiota.Conclusions Supplemental AHLase attenuated S.Typhimurium-induced growth retardation and intestinal disruption in broilers,which could be associated with the observed recovery of gut microbiota dysbiosis. 展开更多
关键词 BROILER Growth performance Gut microbiota Intestinal inflammation N-acyl homoserine lactonase Quorum quenching Salmonella Typhimurium
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Degradation of N-Acyl Homoserine Lactone Quorum Sensing Signals by Bacillus thuringiensis AHL Lactonase
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作者 Waeel H. Alramadhan Anthony Ejiofor Terrance Johnson 《Advances in Microbiology》 2023年第11期526-538,共13页
Bacterial cells rely on signaling molecules to communicate with others from the same species and induce certain genes in a process known as quorum sensing (QS). A common molecule is N-acyl homoserine lactone (AHL) whi... Bacterial cells rely on signaling molecules to communicate with others from the same species and induce certain genes in a process known as quorum sensing (QS). A common molecule is N-acyl homoserine lactone (AHL) which is responsible for the expression of virulence and other factors that allow the organisms to compete in a given environment. On the other hand, other bacteria produce certain enzymes such as AHL-lactonase that break down AHL molecules and prevent gene expression of these factors. The aim of this work was to examine the level of degradation of AHL molecules by AHL-lactonase in 62 Bacillus thuringiensis (Bt) strains isolated from Middle Tennessee, Mississippi, and Alabama. N-hexanoyl-homoserine lactone (C<sub>6</sub>-HSL) and N-3-oxo-hexanoyl homoserine lactone (3-oxo-C<sub>6</sub>-HSL), which cause Chromobacterium violaceum (CV026) to produce a purple pigment were tested at different concentrations to view the Bt lactonase activity. In addition, PCR was used to test for the presence of the lactonase gene. The results showed that among the 62 Bt strains, there were 58 that possessed the AHL-lactonase (aiiA) gene and 48 strains were able to degrade C<sub>6</sub>-HSL. At high concentrations of AHL, only 13 strains were able to completely degrade C6-HSL. In addition, degradation of 3-oxo-C<sub>6</sub>-HSL was weak compared to C<sub>6</sub>-HSL. The results also revealed that AHL lactonase was thermostable, and it was concluded that the level of degradation varies in Bt strains. Only 13 of the strains studied have potent inhibitory activity against C<sub>6</sub>-HSL, which may be good to be used in field applications to control agricultural pest. 展开更多
关键词 Quorum Sensing Quorum Sensing Inhibitor N-Acyl Homoserine Lactone AHL lactonase Bacillus thuringiensis CV026
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N-酰基高丝氨酸内酯酶在肉鸡中应用的耐受性评价
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作者 陈星 郑爱娟 +5 位作者 陈志敏 张广民 王泽栋 刘国华 常文环 蔡辉益 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期885-896,共12页
本试验依据《饲料和饲料添加剂畜禽靶动物耐受性评价试验指南(试行)》对N-酰基高丝氨酸内酯酶(AHLase)在肉鸡中的应用进行耐受性评价。采用双因素试验设计,选取健康、体重接近的1日龄科宝肉仔鸡360只,随机分为3组,每组6个重复,每个重复2... 本试验依据《饲料和饲料添加剂畜禽靶动物耐受性评价试验指南(试行)》对N-酰基高丝氨酸内酯酶(AHLase)在肉鸡中的应用进行耐受性评价。采用双因素试验设计,选取健康、体重接近的1日龄科宝肉仔鸡360只,随机分为3组,每组6个重复,每个重复20只鸡,公母各占1/2且分笼饲养。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加500(AHLase-500)和5000 mg/kg(AHLase-5000)的AHLase。试验期42 d。结果表明:1)与对照组相比,AHLase-5000组公鸡1~21日龄的平均日采食量显著提高(P<0.05),22~42日龄以及1~42日龄的料重比显著降低(P<0.05);AHLase-5000组母鸡22~42日龄末重显著提高(P<0.05),而AHLase-500、AHLase-5000组1~42日龄母鸡的平均日采食量显著降低(P<0.05)。2)试验期内公鸡的平均日增重、平均日采食量显著高于母鸡(P<0.05)。1~21日龄公鸡的料重比有高于母鸡的趋势(P=0.075)。性别对1~21日龄肉鸡末重表现出趋于显著的影响(P=0.079)。3)随着AHLase添加水平的增加,1~21日龄肉鸡的平均日采食量显著提高(P<0.05),平均日增重有提高的趋势(P=0.052),而料重比显著降低(P<0.05);22~42日龄肉鸡的末重显著提高(P<0.05)。4)AHLase添加水平和性别在1~21日龄平均日采食量、22~42日龄平均日采食量以及1~42日龄料重比中均表现出显著互作效应(P<0.05);在22~42日龄料重比(P=0.069)以及1~42日龄平均日增重(P=0.064)中表现出互作趋势。5)饲粮中添加AHLase对肉鸡血常规和血清生化指标无显著影响(P>0.05)。6)饲粮中添加AHLase对肉鸡器官指数无显著影响(P>0.05),组织未观察到形态结构变化。由此可见,饲粮中添加5000 mg/kg的AHLase改善了肉鸡生长性能,对血液生理生化指标和内脏器官发育无显著影响,表明肉鸡对AHLase的耐受剂量在5000 mg/kg以上。 展开更多
关键词 N-酰基高丝氨酸内酯酶 肉鸡 生长性能 器官指数 耐受性
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N-acyl homoserine lactonase attenuates the virulence of Salmonella typhimurium and its induction of intestinal damages in broilers
4
作者 Weiwei Wang Yiliang Chen +6 位作者 Hui Ye Zemin Dong Changming Zhang Dingyuan Feng Qingyun Cao Shujie Liang Jianjun Zuo 《Animal Nutrition》 SCIE CAS CSCD 2023年第3期334-342,共9页
This study aimed to investigate the potential mitigating effects of N-acyl homoserine lactonase(AHLase)on the virulence of Salmonella typhimurium and its induction of intestinal damages in broilers.In vitro study was ... This study aimed to investigate the potential mitigating effects of N-acyl homoserine lactonase(AHLase)on the virulence of Salmonella typhimurium and its induction of intestinal damages in broilers.In vitro study was firstly conducted to examine if AHLase treatment could attenuate the virulence of S.typhimurium.Then,an in vivo experiment was performed by allocating 240 broiler chicks at 1 d old into 3 groups(8 replicates per group):negative control(NC),positive control(PC),and PC supplemented with 10,000 U/kg AHLase.All chicks except those in NC were orally challenged by S.typhimurium from 8to 10 d of age.Parameters were measured on d 11 and 21.The results showed that treatment with 1 U/mL AHLase suppressed the biofilm-forming ability(including biofilm biomass,extracellular DNA secretion and biofilm formation-related gene expression),together with swarming motility and adhesive capacity of S.typhimurium.Supplemental 10,000 U/kg AHLase counteracted S.typhimurium-induced impairments(P<0.05)in broiler growth performance(including final body weight,average daily gain and average daily feed intake)during either 1-11 d or 12-21 d,and increases(P<0.05)in the indexes of liver,spleen and bursa of Fabricius on d 11,together with reductions(P<0.05)in ileal villus height and its ratio to crypt depth on both d 11 and 21.AHLase addition also normalized the increased(P<0.05)m RNA expression of ileal occludin on both d 11 and 21 in S.typhimurium-challenged broilers.However,neither S.typhimurium challenge nor AHLase addition altered(P>0.05)serum diamine oxidase activity of broilers.Noticeably,S.typhimurium challenge caused little change in the mRNA expression of ileal inflammatory cytokines except for an increase(P<0.05)in interleukin-8 expression on d 11,whereas AHLase addition normalized(P<0.05)this change.In conclusion,AHLase treatment could attenuate the virulence and pathogenicity of S.typhimurium,thus contributing to alleviate S.typhimurium-induced growth retardation and intestinal damages in broilers. 展开更多
关键词 Broiler Growth performance Intestinal health N-acyl homoserine lactonase Salmonella typhimurium VIRULENCE
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克雷伯氏菌中群体淬灭基因kplD6的克隆表达与酶学特性分析
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作者 刘栋 赵一竹 +2 位作者 杨惠婷 李亚茹 董新姣 《温州大学学报(自然科学版)》 2023年第1期44-53,共10页
群体淬灭酶是一类阻碍细菌间群体感应交流机制的重要物质,可以使信号分子降解或失活,从而阻止群体感应交流,进而破坏微生物多种行为和活动.前期研究中发现Klebsiella sp. Q2是具有群体淬灭能力的细菌,对其进行基因组测序分析后,选取该... 群体淬灭酶是一类阻碍细菌间群体感应交流机制的重要物质,可以使信号分子降解或失活,从而阻止群体感应交流,进而破坏微生物多种行为和活动.前期研究中发现Klebsiella sp. Q2是具有群体淬灭能力的细菌,对其进行基因组测序分析后,选取该菌株中一个预测具有群体淬灭功能的基因(命名为kpl D6)作为研究对象,进行基因克隆、异源表达、蛋白纯化、结构预测、活性检测和酶学特性分析.结果表明,kpl D6基因全长1 080 bp,编码蛋白质由334个氨基酸组成,相对分子质量37 kDa,理论等电点为5.25,是一种具有TIM-barrel结构的磷酸三酯酶类内酯酶,最适pH为7,最适温度为45℃,Mn^(2+)和Co^(2+)等金属离子可以显著增强该酶活性.这对阐明Q2菌的群体淬灭功能的分子调控机制提供了更多信息. 展开更多
关键词 群体淬灭 克雷伯氏菌 kpl D6 基因表达 磷酸三酯酶类内酯酶
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酰基高丝氨酸内酯酶SS10的酶学特性及其抗软腐病功能的初探 被引量:14
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作者 邱健 李承光 +3 位作者 贾振华 张霞 马宏 宋水山 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期629-636,共8页
N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)作为细菌群体感应中的信号分子参与调节植物病原细菌致病因子的表达。N-酰基高丝氨酸内酯酶(简称AHL内酯酶)通过水解AHL生成酰基高丝氨酸,使AHL失去活性,阻断病原菌的群体感应机制,使病原菌失去致病力。利用谷... N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)作为细菌群体感应中的信号分子参与调节植物病原细菌致病因子的表达。N-酰基高丝氨酸内酯酶(简称AHL内酯酶)通过水解AHL生成酰基高丝氨酸,使AHL失去活性,阻断病原菌的群体感应机制,使病原菌失去致病力。利用谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析柱和凝血酶处理获得纯化的重组AHL内酯酶SS10,分子量约为28 kD,其反应的最适pH值为8.0,在30℃以下稳定性很高。动力学和底物特异性分析表明:AHL内酯酶SS10对所检测的8种AHL具有很强的催化活性,表明该酶的底物谱可能较宽,并且具有催化裂解酰基高丝氨酸内酯键的特异性。纯化的AHL内酯酶SS10可以显著降低胡萝卜软腐欧文氏菌胞外果胶酶、多聚半乳糖醛酸酶的产生量。致病性测定表明,该重组蛋白对胡萝卜软腐病菌具有较强的抗病活性。 展开更多
关键词 群体感应 AHL内酯酶 软腐病
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淬灭酶AiiO-AIO6酶学性质及对嗜水气单胞菌毒力因子的表达调控 被引量:10
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作者 张美超 曹雅男 +2 位作者 姚斌 白东清 周志刚 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1720-1728,共9页
将N-乙酰高丝氨酸内酯酶基因(aiiO-AIO6)插入表达载体pET28a构建了原核表达载体pET28a/aiiO-AIO6。转化大肠杆菌后筛选具有活性的重组子并对纯化的目的蛋白AiiO-AIO6的酶学性质进行了研究,同时研究了纯化的酶液对嗜水气单胞菌ATCC7966... 将N-乙酰高丝氨酸内酯酶基因(aiiO-AIO6)插入表达载体pET28a构建了原核表达载体pET28a/aiiO-AIO6。转化大肠杆菌后筛选具有活性的重组子并对纯化的目的蛋白AiiO-AIO6的酶学性质进行了研究,同时研究了纯化的酶液对嗜水气单胞菌ATCC7966溶血素(Hemolysin,Hem)、细胞肠毒素(Cytotonic enterotoxin,Ast)、胞外蛋白酶(Extracellular protease,Ep)、丝氨酸蛋白酶(Serine protease,Sp)及磷脂酶Pho(Phospholipase A1,Pho)等5个毒力因子表达的影响。结果表明,pET28a/aiiO-AIO6在大肠杆菌中大量表达N-乙酰高丝氨酸内酯酶,纯化后的N-乙酰高丝氨酸内酯酶的最适作用条件为pH 8.0,30℃,在pH 6.0~11.0的范围内能够稳定的存在,在80℃条件下保温30 min后酶活力能够维持在65%以上;且该酶对多种金属离子、化合物和中性蛋白酶都具有很好的抗性;该酶对多种底物都具有一定的降解作用;以3-oxo-C8-HSL为底物时的Km值为0.015 mmol/L;比活力为583.33 U/mg。N-乙酰高丝氨酸内酯酶在培养8 h及12 h时对嗜水气单胞菌5个毒力因子的表达量都具有明显的下调趋势(P<0.05)。本实验通过测定AiiO-AIO6的酶学性质及证明AiiO-AIO6可以通过降解嗜水气单胞菌产生的信号分子来抑制其毒力因子的表达,从而为将其应用于水产环境及致病性嗜水气单胞菌的生物防治奠定理论基础。 展开更多
关键词 N-乙酰高丝氨酸内酯酶 原核表达 嗜水气单胞菌 毒力因子测定
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化学酶法合成D-泛解酸内酯的研究进展 被引量:10
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作者 汪钊 黄美娟 +3 位作者 高亮 应向贤 赵嫚 孙杰 《发酵科技通讯》 CAS 2016年第4期193-198,共6页
泛酸俗称维生素B5,是辅酶A合成的前体,而D-泛解酸内酯是D-泛酸合成的前体。D-泛解酸内酯的化学合成是以甲醛和异丁醛为起始原料,经醛缩合、腈化及内酯化等反应生成DL-泛解酸内酯,再经选择性拆分得到D-泛解酸内酯。化学法与酶法相结合有... 泛酸俗称维生素B5,是辅酶A合成的前体,而D-泛解酸内酯是D-泛酸合成的前体。D-泛解酸内酯的化学合成是以甲醛和异丁醛为起始原料,经醛缩合、腈化及内酯化等反应生成DL-泛解酸内酯,再经选择性拆分得到D-泛解酸内酯。化学法与酶法相结合有助于高效、绿色地合成高光学纯度的D-泛解酸内酯。内酯水解酶催化混旋泛解酸内酯的选择性拆分已经成功地实现了工业生产。对羰基还原酶、醇脱氢酶和羟基腈裂合酶等在化学酶法合成D-泛解酸内酯中的最新进展进行了综述。 展开更多
关键词 D-泛解酸内酯 氧化还原酶 羟基腈裂合酶 内酯水解酶
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群体感应信号分子及其抑制剂快速检测方法的建立 被引量:7
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作者 储卫华 刘永旺 朱卫 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期166-169,共4页
细菌能自发产生、释放一些特定的信号分子,并能感知其浓度变化,调节微生物的群体行为,这一调控系统称为群体感应。细菌群体感应参与包括人类、动植物病原菌致病力在内的多种生物学功能的调节,群体感应抑制剂成为抗感染药物开发的靶点。... 细菌能自发产生、释放一些特定的信号分子,并能感知其浓度变化,调节微生物的群体行为,这一调控系统称为群体感应。细菌群体感应参与包括人类、动植物病原菌致病力在内的多种生物学功能的调节,群体感应抑制剂成为抗感染药物开发的靶点。利用紫色色杆菌(Chromobacterium violaceum)和根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)作为指示菌,建立检测高丝氨酸内酯(AHLs)及其抑制剂的简便方法。结果表明,通过平板交叉划线接种,使用指示菌能够有效地检测AHLs,并且通过薄层层析(TLC)与细菌生物感应器相结合的方法可以快速、方便地鉴定AHLs的种类;通过双层平板法观察指示菌色素产生情况,能够有效地检测群体感应信号分子AHLs抑制剂,且该方法简单易行。 展开更多
关键词 群体感应 N-酰基-高丝氨酸内酯 群体感应抑制剂 检测
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芽孢杆菌酰基高丝氨酸内酯酶基因的克隆及表达 被引量:12
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作者 宋水山 马宏 +3 位作者 贾振华 高振贤 王艳敏 吴志国 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第1期7-10,共4页
N -酰基高丝氨酸内酯 (N -acyl-homoserinelactones,AHLs)作为细菌群体应答系统 (Quorum -sensing)中的关键信号分子 ,其浓度是决定许多动、植物病原菌致病基因的表达的关键因子。酰基高丝氨酸内酯酶基因可以水解AHLs分子的内酯键 ,使A... N -酰基高丝氨酸内酯 (N -acyl-homoserinelactones,AHLs)作为细菌群体应答系统 (Quorum -sensing)中的关键信号分子 ,其浓度是决定许多动、植物病原菌致病基因的表达的关键因子。酰基高丝氨酸内酯酶基因可以水解AHLs分子的内酯键 ,使AHLs失去生物活性 ,从而减弱致病菌的危害。该研究旨在从芽孢杆菌中克隆酰基高丝氨酸内酯酶基因并获得纯化蛋白。根据已知酰基高丝氨酸内酯酶基因的保守序列设计引物 ,利用PCR方法从 2株芽孢杆菌的基因组DNA中克隆出两个基因SS1和SS10。利用在基因库中进行同源比对 ,结果表明SS1和SS10编码的蛋白产物SS1和SS10均为酰基高丝氨酸内酯酶。将两个基因在大肠杆菌中诱导表达 。 展开更多
关键词 高丝氨酸内酯酶基因 群体应答系统 基因克隆 蛋白表达
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高丝氨酸内酯酶AI-96对嗜水气单胞菌NJ-1浸浴攻毒斑马鱼保护效应的研究 被引量:3
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作者 何夙旭 张美超 +3 位作者 徐俐 杨雅麟 李青 周志刚 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期94-100,共7页
为评价斑马鱼口服高丝氨酸内脂酶AI-96对嗜水气单胞菌NJ-1浸浴攻毒的保护效应,实验设置基础料与实验料两组饲料,实验料是在基础料中按3 U/g饲料添加N酰基高丝氨酸内酯酶AI-96(以下简称AI-96),通过高浓度(2.5×108cfu/mL)及低浓度(0.... 为评价斑马鱼口服高丝氨酸内脂酶AI-96对嗜水气单胞菌NJ-1浸浴攻毒的保护效应,实验设置基础料与实验料两组饲料,实验料是在基础料中按3 U/g饲料添加N酰基高丝氨酸内酯酶AI-96(以下简称AI-96),通过高浓度(2.5×108cfu/mL)及低浓度(0.7×108cfu/mL)两组剂量的嗜水气单胞菌NJ-1(以下简称NJ-1)分别浸浴攻毒斑马鱼,在12 h、24 h、3 d、7 d和14 d取鳃丝、肠道壁、肝和肾样,采用实时荧光定量PCR法检测取样器官中NJ-1量,并统计攻毒周期内的死亡率,来评价高丝氨酸内酯酶AI-96的保护力。结果显示:在攻毒周期内所取组织内均检测到NJ-1,按菌数肠>鳃>肝>肾,其中高NJ-1剂量未加酶组各组织NJ-1数量均分别明显高于低剂量处理组。在高剂量攻毒条件下,加酶组各组织NJ-1数量均显著低于未加酶处理组(P<0.05),鳃除外;在低剂量攻毒条件下,未加酶组的NJ-1数量在鳃(3 d)、肠(0.5、1、3、7及14 d)、肝(3 d)和肾(7 d)显著高于加酶组(P<0.05),其余差异不显著(P>0.05)。此外无论在高、低剂量攻毒条件下,加酶组的死亡率均低于未加酶组,其中低剂量攻毒7 d及以后其死亡率显著低于对照(P<0.05)。结果表明,口服AI-96可以有效预防NJ-1≤0.7×108cfu/mL范围内的侵袭。 展开更多
关键词 N酰基高丝氨酸内酯酶 嗜水气单胞菌 浸浴攻毒 实时荧光定量PCR
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海洋细菌密度感应淬灭酶及在水产养殖中的应用 被引量:3
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作者 于敏 刘娜 +1 位作者 赵友彬 张晓华 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第A01期34-43,共10页
许多病原菌通过密度感应现象(Quorum sensing,QS)调控毒力因子的产生,因此淬灭密度感应(Quorum quenching,QQ)在不影响病原菌生存条件下能够有效控制病原菌毒力因子的表达,是一种治疗水产养殖业细菌性病害的新策略。QQ是海洋细菌的一个... 许多病原菌通过密度感应现象(Quorum sensing,QS)调控毒力因子的产生,因此淬灭密度感应(Quorum quenching,QQ)在不影响病原菌生存条件下能够有效控制病原菌毒力因子的表达,是一种治疗水产养殖业细菌性病害的新策略。QQ是海洋细菌的一个普遍特征,主要通过QS小分子阻抑物(Quorum sensing inhibitors,QSIs)和QQ酶干扰QS过程,QQ酶降解信号分子是最常见的QQ方式。目前在海洋细菌中广泛存在N-酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactones,AHLs)内酯酶和AHL酰基转移酶两种QQ酶,在放线菌门、厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、浮霉菌门和疣微菌门的海洋细菌中均发现有AHL内酯酶,在α-变形菌纲、γ-变形菌纲、蓝细菌门、拟杆菌门的海洋细菌具有AHL酰基转移酶。目前已发现多种AHL降解酶可以降低病原菌毒力因子的产生,在水产养殖细菌病害防治方面潜力巨大,并且作为一种新型治疗手段受到广泛关注。 展开更多
关键词 海洋细菌 密度感应淬灭 AHL内酯酶 AHL酰基转移酶 抗细菌病害策略
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PON活性测定方法及其在疾病风险评估中的应用进展 被引量:1
13
作者 穆小静 于娜娜 宫玉华 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期620-624,共5页
对氧磷酶(PON)是人体内重要的水解酶。血清中PON的活性与动脉粥样硬化、肝脏损伤、有机磷中毒解毒、Ⅱ型糖尿病、癌症、抑郁症等多种疾病相关。血清PON的活性对预示疾病有积极的意义。综述了分别以乙酰苯酚类的芳香酯、有机磷酸酯、内... 对氧磷酶(PON)是人体内重要的水解酶。血清中PON的活性与动脉粥样硬化、肝脏损伤、有机磷中毒解毒、Ⅱ型糖尿病、癌症、抑郁症等多种疾病相关。血清PON的活性对预示疾病有积极的意义。综述了分别以乙酰苯酚类的芳香酯、有机磷酸酯、内酯为底物的PON酶活性测定的原理、选择性、优缺点及其在疾病检测中的应用。 展开更多
关键词 PON 底物 芳香酯酶活性 有机磷酸酯酶活性 内酯酶活性
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红球菌来源QsdA型N-酰基高丝氨酸内酯酶水产养殖饲用潜力分析 被引量:1
14
作者 张美超 杨雅麟 +3 位作者 宋水山 徐俐 姚斌 周志刚 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期540-548,共9页
通过研究Qsd A型N-酰基高丝氨酸内酯酶酶学性质来评估其饲用潜力。研究通过提取红球菌(Rhodococcus erythropolis)BLJF-1的基因组,利用PCR技术克隆得到N-酰基高丝氨酸内酯酶基因qsd Arh5。构建重组表达载体p ET28a/qsd A-rh5转化大肠杆... 通过研究Qsd A型N-酰基高丝氨酸内酯酶酶学性质来评估其饲用潜力。研究通过提取红球菌(Rhodococcus erythropolis)BLJF-1的基因组,利用PCR技术克隆得到N-酰基高丝氨酸内酯酶基因qsd Arh5。构建重组表达载体p ET28a/qsd A-rh5转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选得到具有N-酰基高丝氨酸内酯酶活性的转化子即为重组菌株,随后经Ni-NTA柱纯化得到的重组蛋白Qsd A-RH5进行补充酶学性质的研究。结果表明,克隆得到972 bp的目的基因。构建重组载体,筛选得到重组菌株经诱导表达后得到具有N-酰基高丝氨酸内酯酶活性的目的蛋白即Qsd A-RH5,经分析表明,该蛋白的理论分子量为36 k D,属于金属依赖性水解酶PET超家族。酶学性质研究表明:其最适作用p H为8.0,作用温度为35℃,在p H 6—11内能够稳定的存在,在10—40℃,酶活性能够维持在80%以上,且该酶对多种金属离子、化合物具有很好的抗性。该融合蛋白具有较为专一的底物特异性,只对没有取代基团的底物具有水解作用,以C7-HSL为底物时的Km值为0.0125 mmol/L。实验经酶学性质研究表明,该酶具有较为专一的底物特异性,因此可具有针对性的控制外源性病原菌毒性效应对维护畜禽(水产)消化道健康方面具有一定的应用前景。 展开更多
关键词 红球菌 N-酰基高丝氨酸内酯酶 重组表达 酶学性质
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苏云金芽胞杆菌酰基高丝氨酸内酯酶基因的克隆及分析 被引量:1
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作者 黄天培 潘洁茹 +1 位作者 姚帆 黄张敏 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2008年第4期374-378,共5页
利用pMD18-T克隆载体从苏云金芽胞杆菌菌株WB12中克隆了酰基高丝氨酸内酯酶基因(AHL-lactonase,aiiA).测序结果表明,该基因(GenBank登录号为DQ000642)由753个碱基组成,编码含有250个氨基酸残基的蛋白质.推测该蛋白质分子质量为28 ku,等... 利用pMD18-T克隆载体从苏云金芽胞杆菌菌株WB12中克隆了酰基高丝氨酸内酯酶基因(AHL-lactonase,aiiA).测序结果表明,该基因(GenBank登录号为DQ000642)由753个碱基组成,编码含有250个氨基酸残基的蛋白质.推测该蛋白质分子质量为28 ku,等电点为4.2,不含信号肽序列.利用DNAMAN软件构建同源关系树.结果表明,该蛋白与已报道具有减弱欧文氏菌胡萝卜亚种致病力的11个A iiA蛋白酶氨基酸序列总相似性为81.2%,并含有相同的氨基酸序列保守区.核苷酸序列的BLAST分析结果表明,与之同源性较高的基因均为蜡质芽孢杆菌组aiiA基因(86%-99%). 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 酰基高丝氨酸内酯酶基因 克隆 序列分析
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N-乙酰高丝氨酸内酯酶对肉鸡生产性能的影响 被引量:2
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作者 张广民 王振兴 +2 位作者 汤海鸥 李学军 于会民 《饲料工业》 北大核心 2015年第1期30-33,共4页
为研究新型生物饲料添加剂群体感应N-乙酰基高丝氨酸内酯酶(淬灭素)对肉仔鸡生产性能的影响,采用单因素随机设计,选择健康、体重接近的肉仔鸡256只,随机分成2个处理,每个处理8个重复,每个重复16只,试验周期42 d10结果表明试验组肉鸡在... 为研究新型生物饲料添加剂群体感应N-乙酰基高丝氨酸内酯酶(淬灭素)对肉仔鸡生产性能的影响,采用单因素随机设计,选择健康、体重接近的肉仔鸡256只,随机分成2个处理,每个处理8个重复,每个重复16只,试验周期42 d10结果表明试验组肉鸡在1~21日龄饲喂淬灭素组肉仔鸡比对照组料肉比显著降低了0.05(P〈0.01);试验组肉鸡在22~42日龄添加淬灭素组比对照组料肉比降低了0.04;试验组肉鸡1~42日龄肉鸡日增重比对照组平均值提高2.23 g,日增重提高3.37%(P〉0.05),饲喂淬灭素组比对照组料肉比显著降低0.04(P〈0.05),1~42日龄肉鸡试验组饲料转化率提高2.30%。试验结果表明,在本试验条件下在肉鸡饲料中添加500 g/t N-乙酰基高丝氨酸内酯酶可以提高肉仔鸡饲料转化率和日增重。 展开更多
关键词 淬灭素 N-乙酰高丝氨酸内酯酶 群体感应 肉仔鸡 生产性能
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N-酰基高丝氨酸内酯酶对断奶仔猪生产性能的影响 被引量:1
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作者 张广民 王振兴 +2 位作者 汤海鸥 李学军 周志刚 《中国饲料》 北大核心 2014年第23期19-21,共3页
为研究新型生物饲料添加剂N-酰基高丝氨酸内酯酶对断奶仔猪生产性能的影响,本试验采用单因素随机设计,选择健康,胎次、体重接近的"杜×长×大"断奶仔猪168头,随机分成3组,每组4个重复,每个重复14头猪,试验期35 d。对... 为研究新型生物饲料添加剂N-酰基高丝氨酸内酯酶对断奶仔猪生产性能的影响,本试验采用单因素随机设计,选择健康,胎次、体重接近的"杜×长×大"断奶仔猪168头,随机分成3组,每组4个重复,每个重复14头猪,试验期35 d。对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加100 g/t葡萄糖氧化酶和500 g/t N-酰基高丝氨酸内酯酶。试验结果表明:与对照组相比,葡萄糖氧化酶组和N-酰基高丝氨酸内酯酶组断奶仔猪日增重均提高11.76%(P<0.05),料肉比分别降低9.28%和8.25%(P<0.05),腹泻率分别降低7.20%和24.80%(P<0.05)。各试验组间皮毛指数差异不显著(P>0.05)。由此可见,N-酰基高丝氨酸内酯酶可改善仔猪的生产性能,降低仔猪腹泻率。 展开更多
关键词 N-酰基高丝氨酸内酯酶 断奶仔猪 生产性能 腹泻率
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内酯类化合物代谢中的微生物酶及其应用
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作者 郑莉莉 孙丙升 +1 位作者 杨平平 王燕 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第10期5-9,共5页
内酯类化合物在活生物体内经酶的作用产生代谢变化,可生成有利于生物体利用的物质。文中概述了近年来报道的几种有关内酯类化合物代谢中的微生物酶及其在生物技术中的应用情况和研究进展。
关键词 微生物酶 内酯类化合物 内酯酶 不对称合成
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磷酸三酯酶的同源模建及分子对接理论
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作者 郑文琦 赵丽 +1 位作者 宋亚伟 韩葳葳 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期514-517,共4页
利用同源模建和分子动力学模拟方法模建了来源于Thermaerobacter marianensis的磷酸三酯酶样内酯酶(PLLs)三维结构.通过与不同底物的对接可知,Arg44与两种底物(磷酸三酯和内酯)均形成氢键,从而Arg44是两种底物与酶结合时重要的氨基酸残基.
关键词 磷酸三酯酶 同源模建 分子对接
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N-酰基高丝氨酸内酯酶AiiA的分子改造及酶学特性
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作者 杨梅 简思美 +2 位作者 杨彩云 谢盼盼 曾世涌 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期453-461,共9页
革兰氏阴性细菌的群体感应系统利用N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactone,AHL)作为主要信号分子诱导致病因子表达,造成细菌性病害.N-酰基高丝氨酸内酯酶(N-acylhomoserine lactonase,AHLase)能水解AHL分子的内酯键,减弱致病菌... 革兰氏阴性细菌的群体感应系统利用N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactone,AHL)作为主要信号分子诱导致病因子表达,造成细菌性病害.N-酰基高丝氨酸内酯酶(N-acylhomoserine lactonase,AHLase)能水解AHL分子的内酯键,减弱致病菌的危害.本研究利用从苏云金芽孢杆菌克隆的N-酰基高丝氨酸内酯酶基因(auto inducer inactivation A,aiiA),根据Swiss-model模拟aiiA所编码的AiiA蛋白三维结构,预测可能形成的分子内盐桥、活性中心位点等,利用环状诱变方法对AiiA进行定点突变,以期提高其酶活力和热稳定性等酶学性能.对AiiA及其突变蛋白酶学特性分析结果发现,突变体AiiA-N65K-A206E酶活力要比野生型AiiA-wild提高87.4%,并表现出良好的热稳定性和储存稳定性;37℃温浴30 min后酶活力剩余73.9%,比AiiA-wild有了大幅提高;4℃储存120 h后酶活力剩余12.9%,而AiiA-wild丧失酶活力.酶动力学分析表明,AiiA-N65KA206E酶促反应的米氏常数Km为1.23 mmol/L,与野生型相当;最大反应速率Vmax为32.36μmol/L/min,比野生型有较大提高.本研究表明,利用定点突变技术改造AiiA的分子结构,可有效提升AiiA酶活力、热稳定性和储存稳定性.本研究结果为进一步阐明AiiA结构与功能的关系,促进AiiA在植物病害生物防治上的应用,提供了有益的参考和新的思路. 展开更多
关键词 N-酰基高丝氨酸内酯酶(AHLase) 定点突变 酶学特性
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