石楠藤饮片、标准汤剂及配方颗粒的质量相关性研究

目的:建立石楠藤饮片、标准汤剂、配方颗粒的质量控制方法,对其相关性进行分析,提供一个中药配方颗粒生产全过程质量控制方法。方法:采用超高效液相色谱针对其水溶性成分建立特征图谱方法,并结合石楠藤的功效从中选取绿原酸作为定量指标建立含量测定方法,选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱,以乙腈-0.5%乙酸为流动相,梯度洗脱,检测波长为320 nm。同时,结合指标成分转移率以及特征图谱结果,进行饮片-标准汤剂-配方颗粒物质传递过程的相关性分析。结果:含量测定方法精密度、重复性、中间精密度、准确度及稳定性考察的相对标准偏差均小于3.0%,绿原酸在4.873~487.275μg·mL^(-1)范围内线性关系良好,特征图谱方法精密度、重复性、中间精密度及稳定性考察的相对标准偏差均小于3.0%,表明建立的含量测定和特征图谱方法符合要求;石楠藤饮片-标准汤剂-配方颗粒的过程中的药效成分转移稳定,配方颗粒中绿原酸转移率均在标准汤剂20%~40%范围之内;特征图谱中的6个特征峰均可在饮片-标准汤剂-配方颗粒中得到追溯,并指认出新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸3种成分。结论:建立的含量测定和特征图谱方法可用于石楠藤饮片-标准汤剂-配方颗粒过程的监控,能够反映水溶性药理活性成分在石楠藤配方颗粒生产过程中的变化,阐明了物质传递情况,可为后续的石楠藤配方颗粒质量标准研究提供实验及理论依据。

两种石楠叶绿素荧光参数日变化的比较研究

以红叶石楠和光叶石楠为试验材料,研究了两种石楠叶绿素荧光参数的日变化。结果表明:随着日间光照强度的不断变化,即时最大荧光产量(Fm′)、光系统II实际量子产量(Yield)和光化学淬灭(qP)呈现出"V"型曲线;非光化学淬灭(qN)呈现出单峰曲线;表观光合电子传递速率(ETR)则呈现出双峰曲线;到黄昏时各参数基本恢复至早晨的水平,表明两种石楠均未发生光合机构的破坏。红叶石楠的Fm′、Yield、ETR、qP均高于光叶石楠,说明红叶石楠对光能的利用效率高于光叶石楠,表现出对当地环境更高的适应性。

20种植物提取液对黄瓜霜霉病的预防作用研究

用叶圆盘生测法测定了20种植物不同组织部位的甲醇提取液对黄瓜霜霉病菌(Pseudoperonosporacubensis)的抑菌效果,其中水蓼(PolygonumhydropiperL.)全草,合欢(AlbiziajulibrissinDurazz.)叶和石楠(PhotiniaserrulataLindl.)枝的甲醇提取液在离体叶圆盘的防效分别为98.33%,100.00%和100.00%,其它植物提取液均无明显抑菌效果。上述3种植物提取液的室内盆栽试验结果表明,7天后对黄瓜霜霉病的预防效果分别为54.19%,62.00%和78.93%,田间试验的防效则分别为25.57%,27.91%和48.84%。对防效较好的石楠枝甲醇提取物用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇依次进行萃取,并对各萃取物进行叶圆盘测定,结果表明,有效活性成分存在于正丁醇相和水相中;当浓度为30mg.ml-1时,两相萃取物对黄瓜霜霉病的抑制率分别为100.00%和87.87%。

RP-HPLC法测定石楠叶中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的 建立石楠叶中熊果酸和齐墩果酸的含量测定方法。方法 采用 RP- HPL C法测定 ,色谱柱为Zorbax ODS柱 ,用甲醇 - 1%醋酸水溶液 (88∶ 12 )为流动相 ,检测波长为 2 15 nm。结果 熊果酸和齐墩果酸的平均回收率分别为 98.5 % ,97.6 % (n=3) ,RSD分别为 1.6 2 ,1.89 (n=3)。结论 本法准确、灵敏、快速 ,可作为石楠叶药材的质量检测方法之一。

石楠不同部位提取物抗氧化活性

为考察石楠(Photinia serrulata Lindl.)抗氧化活性与总原花青素、总酚和总黄酮质量分数之间的关系以及提取溶剂对其抗氧化活性的影响,采用不同溶剂对石楠不同部位进行了超声提取;测定了总原花青素、总酚和总黄酮质量分数;以DPPH自由基清除活性、ABTS自由基清除活性、铁离子还原能力和铜离子还原能力综合评价了其抗氧化能力。结果表明:石楠不同部位抗氧化能力差异显著,枝-韧皮部和果序-轴抗氧化活性最强,这与高质量分数的总原花青素、总酚和总黄酮有关;不同溶剂的提取效果具有显著性差异,枝-韧皮部的总原花青素质量分数为(10.77±0.08)%^(29.31±0.69)%;总黄酮质量分数为(2.60±0.02)%^(7.02±0.01)%;总酚质量分数为(3.15±0.02)%^(6.42±0.07)%,其中85%甲醇提取总原花青素效果最好,70%丙酮提取总酚和总黄酮效果最好。相关性分析表明,石楠不同部位总原花青素、总酚和总黄酮质量分数与抗氧化活性之间呈现极显著正相关(P<0.01),说明石楠总原花青素、总酚和总黄酮可能作为石楠抗氧化成分协同发挥抗氧化活性。

石楠上白粉虱的药剂防治试验研究

试验用3%呋喃丹颗粒剂和40%氧化乐果乳油进行根施,10%吡虫啉可湿性粉剂、25%绿富隆乳油和20%氰戊菊酯乳油进行叶面喷雾防治石楠上的白粉虱成虫。结果表明:用20%氰戊菊酯2 000倍液和25%绿富隆2 500倍液叶面喷雾防效最好,其平均校正防效分别达100%和97.28%;其次为10%吡虫啉可湿性粉剂2 000倍液叶面喷雾和40%氧化乐果15 ml/株根施。

山东抗寒石楠茎段再生体系的建立

利用石楠茎段水培、种子无菌催芽建立无菌外植体,研究并筛选了嫩茎启动培养和嫩梢增殖培养基以MS+6-BA1．0mg/L+NAA0．1mg/L和MS+6-BA2．0mg/L+NAA0．5mg/L为好,经茎段再生诱导正交试验得出,最佳组合为MS+6-BA2．0mg/L+NAA0．1 mg/L,影响茎段再生分化的因素种类排列为6-BA＞NA．A＞茎段部位。

石楠嫩枝密封扦插育苗技术

石楠(Photinia serrulata Lindl.)是城市园林绿化中重要的观叶、观果树种,分布及栽培区域为华中、华东及其以南各省和华北南部(山东、河南)。石楠传统上采用播种育苗,但程序繁琐,且播种后长出的苗木较细,主干弯曲或呈丛生状态,不适合作为观赏苗木。若采用嫩枝密封扦插育苗,方法简单、产苗量高,培育出的苗木主干通直,可长成乔木,观赏性强。扦插苗与播种苗相比还能提早结实,满足园林景观中观果功能的需求。

石楠不同器官除草活性的研究

为了明确石楠不同器官的除草活性,给进一步开展活性化合物的研究提供依据,于室内测定了石楠不同器官对反枝苋、苘麻、生菜、黄瓜、野燕麦、稗草和小麦7种受体植物的除草活性。结果表明,在10 g.L-1的供试浓度下石楠不同器官粉末对7种植物幼苗均有明显的抑制作用,且以茎和叶的活性最高;进一步测定了石楠叶片粉末对7种植物胚根(或幼根)的有效中浓度EC50分别为0.73、0.78、0.91、1.44、0.96、1.03和2.65 g.L-1,对胚轴(或胚芽鞘)的EC50分别为3.87、2.42、2.50、0.47、3.98、10.80和6.75 g.L-1,可见双子叶植物的敏感性要高于单子叶植物。

超临界CO_2流体萃取石楠叶挥发油化学成分的研究

采用超临界CO2流体萃取石楠叶挥发油,平均出油率为1.32%。利用气相色谱—质谱联用仪对石楠叶挥发油成分进行分离和鉴定,共鉴定出51种化学成分,并用面积归一化法测定了各种成分的含量。

石楠叶药材-饮片-标准汤剂-配方颗粒量值传递规律研究

目的以标准汤剂的绿原酸含量和特征图谱为基准,研究石楠叶配方颗粒的量值传递规律。方法制备石楠叶标准汤剂样品,建立其指标成分绿原酸含量及特征图谱测定方法;收集不同来源15批次石楠叶药材、饮片及3批中试配方颗粒,检测绿原酸含量及特征图谱,分析药材-饮片-标准汤剂-配方颗粒特征图谱的相关性及指标成分绿原酸量值传递规律。结果15批标准汤剂的出膏率平均值为21.5%(20.0%~22.4%);绿原酸的平均质量分数为21.63 mg·g^(-1)(20.04~22.81 mg·g^(-1));共标定9个特征峰,以绿原酸(2号峰)为S1峰,芦丁(4号峰)为S2峰。石楠叶药材、饮片、配方颗粒中绿原酸质量分数分别为5.91~7.33、5.79~6.98、15.61~15.72 mg·g^(-1),药材-饮片绿原酸转移率为91.94%~99.05%,饮片-标准汤剂绿原酸转移率为64.22%~81.36%,饮片-配方颗粒绿原酸转移率为55.31%~61.71%。石楠叶药材、饮片、配方颗粒特征图谱中均检测出9个特征峰,且相对保留时间均在规定范围内。结论以石楠叶标准汤剂为基准,其药材-饮片-标准汤剂-配方颗粒中9个特征峰相对保留时间、绿原酸量值传递规律稳定,含量均在标准汤剂范围内,表明石楠叶配方颗粒制备工艺合理,质量稳定。

石楠叶斑病病原鉴定及对药物敏感性测定

石楠(Photinia serrulata Lindl.)是华中地区一种重要的绿化树种。近年来在武汉地区石楠上发现一种新的叶斑病。本文通过组织分离法、致病性测定等从病株分离得到致病病原菌,并通过形态学鉴定、分子生物学鉴定等,最终确定该致病菌为小孢拟盘多毛孢(Pestalotiopsis microspora)。在室内测定了P.microspora对7种常见杀菌剂的敏感性,结果表明,7种杀菌剂对P.microspora的菌丝生长均有抑制作用,但不同杀菌剂之间EC50值相差较大。450 g·L^(-1)咪鲜胺水剂、70%甲基托布津可湿性粉剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂EC50值分别为0.099、0.142和0.631μg·mL^(-1)。25%三唑酮可湿性粉剂EC50值在7种杀菌剂中最大,为37.625μg·mL^(-1)。这是国内外关于P.microspora引起石楠叶斑病的首次报道。