菠菜磷酸丙糖转移蛋白在烟草中正义及反义表达及其对碳水化合物转运的影响

以菠菜 (SpinaciaoleraceaL .)为材料 ,取幼叶分离mRNA ,反转录合成cDNA ,以cDNA第一链为模板 ,通过PCR扩增 ,获得菠菜磷酸丙糖转移蛋白 (Triosephosphatetranslocator,TPT)cDNA目的片段。对其进行序列分析 ,结果表明 ,分离的目的片段核苷酸序列与文献报道相比同源率为 99 9% ,只有 1个碱基发生改变。将得到的菠菜tptcDNA与CaMV 35S启动子和NOS 3′终止子融合 ,分别构建了正义及反义表达载体。通过根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导转化烟草 (NicotianatabacumL .) ,在含有卡那霉素的抗性筛选培养基上再生的植株经PCR及Southern杂交检测 ,证明tpt基因已整合到烟草基因组上 ,菠菜丙糖磷酸转移蛋白基因导入烟草后使叶绿体中TPT的含量表现出明显差异 ,并导致烟草光合作用产物分配的变化 ,表现在叶绿体中淀粉含量的改变。

叶绿体内被膜上的磷酸丙糖转运器

叶绿体内膜上存在有磷酸丙糖转运器。本文着重对该转运器的结构和功能、转运特性及其对光合作用的调节等做一介绍。磷酸丙糖转运器能够催化磷、磷酸丙糖和 3 磷酸甘油酸的反向交换运输 ,从而使光合初级产物从叶绿体转运到胞质。在生理条件下 ,这种转运严格遵循 1∶1的反向交换原则 ,并且转运活性受光的调节。目前 ,已经从一些植物中分离到磷酸丙糖转运器蛋白 ,并克隆了它们的cDNA。近年来 ,利用基因工程手段对磷酸丙糖转运器功能的研究也取得了很重要的进展。