透骨草提取物诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其相关机制研究

目的:探讨透骨草提取物诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其相关机制。方法:荧光显微镜观察Hela细胞形态,透射电镜观察Hela细胞超微结构,流式细胞术检测Hela细胞凋亡率,Western blot检测Bcl-2蛋白和Caspase-3蛋白表达水平。结果:100μg/ml透骨草提取物处理的Hela细胞后,荧光显微镜显示Hela细胞皱缩,细胞核浓缩呈新月状边集。透射电镜可见Hella细胞表面突起和微绒毛减少,核断裂、染色质凝聚且边缘化,有"出芽"现象。流式细胞术显示透骨草提取物处理的Hela细胞凋亡率为(25.90±1.13)%,明显高于对照组(P<0.01)。Western blot结果显示透骨草提取物处理的Hela细胞Bcl-2蛋白和Caspase-3蛋白表达达明显低于与对照组(P<0.05)。结论:透骨草提取物可诱导Hela细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白和Caspase-3蛋白表达有关。

透骨草提取物对人肺癌A549细胞凋亡及其PUMA/Bcl-2/Caspase-3蛋白表达的影响

目的:观察透骨草提取物对人肺癌A549细胞PUMA(P53上调凋亡调空因子)、Bcl-2(B淋巴细胞瘤-2)、Caspase-3(天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3)蛋白表达的影响,从凋亡诱导的角度探讨透骨草提取物抑制A549细胞增殖的作用机制。方法:将A549细胞分为实验组和对照组;吖啶橙染色观察透骨草提取物对A549细胞形态的影响;免疫组化法检测透骨草提取物对A549细胞PUMA、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响。结果:吖啶橙染色结果显示,39.7 mg/L透骨草提取物处理的A549细胞皱缩,胞核固缩、呈边集,出现凋亡小体。免疫组化检测结果显示,39.7 mg/L透骨草提取物处理的A549细胞PUMA蛋白显著高于对照组(P<0.05),而Bcl-2蛋白和Caspase-3蛋白表达显著低于对照组(P<0.05)。结论:透骨草提取物对A549细胞具有凋亡诱导作用,机制与促进A549细胞PUMA蛋白表达、抑制Bcl-2和Caspase-3蛋白表达有关。

透骨草提取物对肿瘤细胞体外增殖的影响

目的:探讨透骨草提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌Hela细胞、人肝癌HepG-2细胞、人肺癌A549细胞体外增殖的影响。方法:用不同浓度的透骨草提取物分别处理肿瘤细胞,采用MTT法和集落形成试验观察透骨草提取物对肿瘤细胞体外增殖的影响。结果:3.125～100μg/mL透骨草提取物处理的肿瘤细胞增殖抑制率与对照组相比显著增加(P<0.05)。3.125～100μg/mL透骨草提取物处理的肿瘤细胞集落形成率与对照组相比显著降低(P<0.05)。结论:透骨草提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌胞Hela细、人肝癌HepG-2细胞、人肺癌A549细胞增殖有显著的抑制作用,且呈一定的剂量依赖性。

透骨草水提物与抗菌药对产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的体外联合抑菌作用研究

为了探究透骨草水提物与抗菌药联合对产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的体外抑菌作用。采用二倍微量肉汤稀释法与微量方阵棋盘法来测定各抗菌药与透骨草的最低抑菌浓度(MIC)及二者联合作用后的分级抑菌浓度指数(FICI)。结果显示,透骨草水提物与头孢曲松钠、头孢他啶、头孢噻肟钠、头孢噻呋钠、阿莫西林、阿米卡星、阿奇霉素、磷霉素、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶、利福平、环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、痢菌净、林可霉素联合作用后的FICI分别为0.75、0.75、1.00、0.75、0.53、0.51、0.75、4.5、4.5、4.5、4.5、2.5。结果表明,透骨草水提物与头孢曲松钠、头孢他啶、头孢噻肟钠、头孢噻呋钠、阿莫西林、阿米卡星、阿奇霉素、磷霉素、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶、利福平联合作用时有相加作用;与环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、痢菌净、林可霉素联合作用时有颉颃作用。

透骨草提取物对人卵巢SKOV-3细胞Caspases蛋白表达的影响

目的:研究透骨草提取物对人卵巢SKOV-3细胞凋亡的影响及其机制。方法:吖啶橙染色法观察透骨草提取物对SKOV-3细胞形态的影响;免疫组化法检测透骨草提取物对SKOV-3细胞Caspases蛋白表达的影响。结果:37.8μg/ml透骨草提取物作用于SKOV-3细胞24h后,SKOV-3细胞形态不规则,细胞核固缩、呈月牙形紧贴在核膜周围。SKOV-3细胞Caspase-9、Caspase-3、Caspase-7蛋白表达明显低于与对照组(P<0.05),表明透骨草提取物可下调SKOV-3细胞Caspase-9、Caspase-3、Caspase-7蛋白的表达。结论:透骨草提取物可以通过Caspases依赖途径诱导SKOV-3细胞凋亡。

透骨草组织培养的研究

以透骨草的嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽生根、试管苗的移栽、试管苗扦插、试管苗移植的研究,成功的建立起透骨草的嫩茎无性系。结果证明：1/2MS＋BA0.5mg/L＋2,4-D1.2 mg/L＋NAA0.2-0.8 mg/L为嫩茎愈伤组织的的理想培养基;1/2MS＋AgNO31.2 mg/L＋BA0.6 mg/L＋NAA0.1 mg/L为愈伤组织和不定芽分化的理想培养基;1/3MS＋IAA0.4 mg/L为不定芽生根培养和生根继代培养的理想培养基;炉灰渣是试管苗移栽和扦插的理想基质。移植试管苗后期出现生长旺盛、长势整齐的性状,翌年春季出现萌发早5d、根系相当于野生植株2倍的性状。

透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关因子的影响

[目的]观察透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,探讨透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的分子机制。[方法]流式细胞术检测透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的影响;免疫组化法检测透骨草提取物对SMMC-7721细胞caspase-9、-3、-7和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响。[结果]40.91μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞凋亡率为(26.84±1.23)%,明显高于对照组(P<0.05)。40.91μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞Caspase-9、-3、-7蛋白表达明显低于与对照组(P<0.05),而XIAP蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。[结论]透骨草提取物能通过XIAP/Caspase信号通路抑制SMMC-7721细胞凋亡。

透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞p53和PUMA蛋白表达的影响

目的观察透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞形态和p53和p53上调凋亡调控因子(PUMA)蛋白表达的影响,探讨透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的分子机制。方法用倒置显微镜观察透骨草提取物对SMMC-7721细胞形态的影响;采用免疫组化方法检测透骨草提取物对SMMC-7721细胞p53和PUMA蛋白表达的影响。结果倒置显微镜观察可见,40.91μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞体积减小,形态轮廓不清晰,细胞皱缩变形,细胞脱壁增加。免疫组化检测结果显示,40.91μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞p53蛋白和PUMA蛋白表达均明显高于与对照组(P<0.01)。结论透骨草提取物可能通过上调p53和PUMA蛋白表达,诱导SMMC-7721细胞凋亡。

透骨草含药血清与西药联合对产ESBLs E.coli的体外抑菌作用

为了探讨透骨草含药血清与抗菌药联合对产ESBLs大肠杆菌的抑菌作用,采用棋盘法测定透骨草含药血清与抗菌药联合的FIC指数。透骨草含药血清与头孢曲松钠、头孢他啶、头孢噻肟钠、头孢噻呋钠、阿莫西林、阿米卡星、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、乙酰甲喹、克林沙星、加替沙星、林可霉素、强力霉素、氟苯尼考、阿奇霉素、磷霉素联合作用后的FIC分别为:0.75、1.00、0.28、0.75、>2.00、0.75、>2.00、>2.00、0.26、0.26、0.26、0.50、0.50、1.00、0.50、>3.00、0.26、0.38、1.25。结果显示:透骨草含药血清与环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、乙酰甲喹、克林沙星、林可霉素、氟苯尼考、阿奇霉素、头孢噻肟钠体外联合作用为协同作用;与头孢曲松钠、加替沙星、阿米卡星、头孢他啶、头孢噻呋钠体外联合作用为相加作用;与阿莫西林、强力霉素、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶体外联合作用为拮抗作用;与磷霉素体外联合作用为无关作用。