余甘子(Phyllanthus emblica L.)Vc含量分析

采用2,6-二氯酚靛酚滴定法分析比较了余甘子各器官之间、同品种不同植株之间、不同余甘子品种之间以及与野生资源之间的Vc含量以及不同预处理方法对Vc测定的影响。结果表明,Vc在余甘子各器官中均有分布,以果实与初生幼叶中居多,茎、根中含量较低;皇帝甘与粉甘含量较多,但与其它品种的差异不大;5个野生资源单株Vc含量差异极显著,其中有3个野生单株的果肉Vc含量高于主栽品种粉甘。

余甘(Phyllanthus emblica L.)大小孢子发生及雌雄配子体发育研究

采用常规石蜡切片技术,对平丹1号余甘大小孢子发生及雌雄配子体发育进行研究。结果表明:药壁发育为双子叶型;绒毡层为腺质绒毡层;小孢子母细胞减数分裂时胞质分裂为同时型;产生四面体形四分体;成熟的花粉粒为二细胞型花粉;平丹1号余甘的雌蕊为上位子房,3心皮3室,每室含倒生胚珠2枚,为厚珠心,具珠心喙,胚囊为蓼形;平丹1号余甘部分大孢子母细胞、大孢子及胚囊发育异常,致使不能形成正常的卵细胞,不能进行受精。

Effect of Total Flavonoids from Phyllanthus emblica L. on Tumor Proliferation and Immune Function

[Objectives]To explore the effect of total flavonoids from Phyllanthus emblica L.on tumor proliferation and immune function.[Methods]The effects of total flavonoids of P.emblica L.on the proliferation of 6 different tumor cell lines(human hepatoma cell line HepG-2,human cervical cancer cell line Hela,human gastric cancer cell line SGC7901,human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-2,human lung cancer cell line H460 and human ovarian cancer cell line A2780)were compared by SRB method.The effect of total flavonoids from P.emblica L.on the proliferation of mouse lymphocytes induced by concanavalin(ConA)or lipopolysaccharide(LPS)in vitro was detected by CCK-8 method.[Results]The results of SRB assay showed that compared with the normal group,the total flavonoids of P.emblica L.had obvious inhibitory effect on 6 kinds of tumor cells.Among them,the inhibitory effect on H460 cells and CNE-2 cells was the most significant,and the IC50 was(471.36±50.66),(463.26±40.75)μg/mL,respectively.The high dose group of total flavonoids from P.emblica L.had the same inhibitory effect as the positive drug 5-Fu.The results of CCK-8 assay showed that compared with the blank group,the total flavonoids of P.emblica L.significantly inhibited the proliferation of mouse lymphocytes induced by ConA or LPS(*P<0.05,**P<0.01).[Conclusions]The total flavonoids of P.emblica L.had significant anti-tumor activity.

Investigation of Antidiabetic Effect of Ethanolic Extract of <i>Phyllanthus emblica</i>Linn. Fruits in Experimental Animal Models

Hypoglycemic effects were investigated in the ethanolic extract of fruits of Phyllanthus emblica Linn. with long evans rats (100-120 g). Residual gut sucrose content, gut perfusion and disaccharidase activity studies were carried out to assess these activities. The residual gut sucrose content study was carried out to reveal the amount of sucrose remaining in the gastro intestinal tract (GIT) at six different segments. The ethanolic fruit extract of Phyllanthus emblica Linn. significantly increases the residual sucrose content throughout the gut after sucrose ingestion. Study on intestinal enzyme activity showed that the extract caused a significant (p 0.05), dose dependent inhibition of intestinal disaccharidase enzyme activity. Evaluation of the effect of the plant extract on intestinal enzyme activity showed significant inhibition of intestinal disaccharidase activity, suggesting that reduction of sucrose absorption may be partly related to the inhibition of disaccharidase activity in the gut. The gut perfusion analysis showed that the extract significantly reduced intestinal glucose absorption. The results of the present study suggest that ethanolic extract of Phyllanthus emblica Linn. has significant antidiabetic effects in a dose dependent manner and this may be effective in the treatment of diabetes.

余甘子斑点病病原菌鉴定、生物学特性及防治药剂筛选

【目的】明确余甘子果实斑点病的病原菌种类,了解其生物学特性,筛选有效的防治药剂,为余甘子果实斑点病的科学诊断和田间防治提供理论依据。【方法】从广东省汕尾市陆河县余甘子产业园种植基地采集发生斑点病的余甘子果实,采用组织分离法对余甘子斑点病病果进行病原菌分离,通过形态学特征和基于多基因(ITS、TUB和EF1-α)的系统发育进化分析对病原菌进行鉴定;采用针刺接种法测定病原菌菌株的致病力;采用菌丝生长速率法测定不同培养条件对病原菌菌丝生长的影响;通过室内毒力测定评估12种常见杀菌剂对病原菌的抑菌活性。【结果】从余甘子病果中分离出1株病原真菌菌株PE3,致病性测定结果表明,该菌株为余甘子斑点病致病菌,其形态特征与间座壳菌Diaporthe phoenicicola相似,且其ITS、TUB和EF1-α基因系统发育进化树分析显示与D.phoenicicola聚在同一分支。生物学特性测定结果显示,菌株PE3菌丝生长的最适温度为25℃,最适p H为7,最适生长碳源为甘油和蔗糖,最适生长氮源为酵母提取物。室内毒力测定结果显示,450 g/L咪鲜胺乳油对菌株PE3菌丝生长的抑制作用最强,抑制中浓度(EC_(50))为0.019 mg/L;其次是8%氟硅唑微乳剂、10%苯醚甲环唑微乳剂和25%吡唑醚菌酯悬浮剂,EC_(50)分别为0.023、0.124和0.194 mg/L;而2%春雷霉素水剂对菌株PE3菌丝生长的抑制效果最差,EC_(50)为402.336 mg/L。【结论】间座壳菌D.phoenicicola是引起余甘子果实斑点病的病原菌,450 g/L咪鲜胺乳油、8%氟硅唑微乳剂、10%苯醚甲环唑微乳剂和25%吡唑醚菌酯悬浮剂能有效防治余甘子果实斑点病,可在余甘子种植中推广应用。

余甘子提取物及其复配物改善大鼠的功能性消化不良症状

该研究通过《保健食品功能检验与评价方法(2022年版)》中的促进消化功能检验方法中小鼠小肠运动、大鼠增重、摄食量、食物利用率、胃蛋白酶测定等试验研究了余甘子单方和四种复方的促消化效果。结果表明,余甘子(单方组),余甘子、山楂、茯苓和陈皮(复方1组),余甘子、山楂、白术和麦芽(复方2组),余甘子、山楂、茯苓、白术和陈皮(复方3组),余甘子、山楂、茯苓、白术、麦芽和陈皮(复方4组)小鼠小肠推进率分别提高了65.99%、80.53%、107.91%、67.47%、90.47%(P<0.05,P<0.01,P<0.0001,P<0.05,P<0.001),大鼠胃蛋白酶活性分别增强了89.24%、60.42%、103.07%、74.56%、106.84%(P<0.01,P≥0.05,P<0.01,P<0.05,P<0.01),大鼠胃蛋白酶排出量分别增强了89.30%、60.39%、103.14%、74.69%、106.98%(P<0.01,P≥0.05,P<0.01,P<0.05,P<0.01)。此外,复方4组大鼠食物利用率增加了15.35%(P<0.05),体质量增长、摄食量无显著差异(P≥0.05),其他组别的上述3项指标均无显著影响(P≥0.05)。研究表明余甘子提取物及其复配物可有效改善大鼠功能性消化不良症状。该研究为余甘子及其复配物促消化功能产品的开发和推广提供了相应的理论参考。

基于模糊数学和响应面法优化余甘子果汁饮料生产工艺

以新鲜余甘子果实为原料制备余甘子果汁饮料。在单因素试验的基础上,以综合得分为指标,通过正交试验优化纤维素酶酶解工艺;再在单因素试验的基础上,以综合感官评分为指标,通过响应面法优化余甘子果汁饮料配方。结果表明:最佳酶解工艺为纤维素酶添加量0.15%(以余甘子原汁质量计)、酶解温度55℃、酶解时间40 min;最佳饮料配方为以余甘子果汁饮料质量为基准,余甘子原汁添加量30%、白砂糖添加量11%、食盐添加量0.13%、柠檬酸添加量0.18%,在此条件下制得的余甘子果汁饮料色、香、味佳,综合感官评分为88.10。

余甘子多酚提取工艺及测定方法研究进展

余甘子是我国常用的药食同源植物,多酚类成分是余甘子的主要活性成分之一。现代药理学研究表明,余甘子多酚具有抗氧化、抗炎、抗病毒、抗肿瘤及保肝护肝等作用。因此,余甘子中多酚类成分的高效提取及含量测定研究对于深度开发利用余甘子及其相关功能保健产品开发具有重要意义。本文对近年来关于余甘子多酚的提取工艺及测定方法的研究进行综述,以期为余甘子多酚的进一步开发利用提供参考依据。

响应面法优化余甘果百香果低糖复合果冻配方

为丰富果冻种类,提高余甘果和百香果的附加值,以余甘果和百香果为主要原料,以感官评分、色泽及质构特性为指标,通过单因素实验探究百香果汁添加量、复配胶添加量、赤藓糖醇添加量对余甘果百香果复合果冻品质的影响,在此基础上,以感官评分为响应值,通过响应面法优化余甘果百香果复合果冻配方。结果表明,余甘果百香果复合果冻的最佳配方为百香果汁添加量19%、复配胶添加量2.0%(可得然胶、魔芋胶和黄原胶三者的质量比为30:3:7)、赤藓糖醇添加量26.8%;在此条件下制得的复合果冻呈橘黄色,富有光泽,口感细腻,余甘果和百香果的特征风味突出,风味协调,酸甜可口,回甘悠长,硬度、弹性及咀嚼性适中,总体可接受性非常好,感官评分为8.65分。本研究可为零添加香精、色素和蔗糖的余甘果百香果低糖复合果冻的开发提供参考。

余甘子提取工艺优化及体外抑菌研究

目的采用正交设计法优选余甘子的提取工艺并进行体外抑菌实验考察。方法以余甘子鲜果为原材料,以氢氧化钠溶液为提取溶剂,根据单因素试验进行正交实验优化工艺,并以出膏率、抑菌强度的综合评价结果为指标。结果余甘子最优的提取工艺条件为A_(2)B_(1)C_(1)D_(2),即提取溶剂pH值为8.0、料液比为1∶6、提取时间为1 h、提取次数为2次。结论该实验所优选出的提取工艺条件稳定,重现性好,可为余甘子抗菌作用更广泛运用于临床提供生产条件依据。

余甘子提取物及其复配物对功能性消化不良小鼠的改善作用

探讨余甘子提取物及余甘子、山楂、茯苓等五种复配物对功能性消化不良小鼠的改善作用,为余甘子改善功能性消化不良提供理论依据。构建小鼠功能性消化不良模型,随机分为模型组、对照组、余甘子提取物处理组和复配物处理组,分别采用余甘子提取物低、中、高剂量以及余甘子、山楂等五种复配物连续三周灌胃造模后的小鼠。研究结果显示,余甘子中、高剂量(150mg/kg、300 mg/kg)提取物及复配物可以增加造模后小鼠的体质量及摄食量;提高小鼠胃排空率和小肠推进率,其中高剂量处理组分别比模型组提高45.16%和58.43%(P<0.05);增加胃蛋白酶活性,其中中剂量处理组增加39.33%(P<0.01);提高小鼠胃动素和胃泌素含量,以高剂量处理组效果最为显著,分别提高了149.89%和86.06%(P<0.01);降低血清活性肠肽含量,其中复配物处理组效果显著,降低了34.12%(P<0.05)。由此可知,余甘子提取物及其复配物均有改善小鼠功能性消化不良的作用,该研究结果可为促进胃肠道功能的产品开发提供新思路,为后续产品开发奠定基础。

余甘果生物活性成分的研究进展

余甘果(Phyllanthus emblica L.)最早记载于《太平御览》,历史悠久,常用作治疗胆道疾病、支气管炎、糖尿病等。现代研究表明,余甘果的生物活性成分有余甘多糖、单宁、酚酸、黄酮、木脂素等,具有抗氧化、抗炎、抗癌、护肝、降血糖等功效。目前,对余甘果生物活性物质的研究大多集中在余甘多糖和余甘多酚方面,随着研究越来越深入,其提取技术也逐渐向绿色、经济、高效可循环的方向发展,使得余甘果的应用也越来越广。本文对余甘果生物活性成分的种类与组成、结构、提取技术和功效进行归纳与论述,为余甘果在食品和医药的研究和精深加工利用提供理论依据。

高效液相色谱法测定不同采收期余甘子叶中5种酚酸类成分含量变化

目的:建立同时测定不同采收期余甘子叶药材中5种酚酸类成分含量的方法,研究其变化规律,确定最佳采收期。方法:利用高效液相色谱法测定不同采收期余甘子叶药材中表没食子儿茶素、柯里拉京、诃子联苯酸、鞣花酸和诃子酸的含量并计算5种酚酸类成分的积累总量。色谱柱为Inertsil ODS-3 C18色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,使用二极管阵列检测器全波长扫描,流速为1.0 mL·min^(-1),进样量为10μL。并用SPSS 24.0软件进行主成分分析,选取了3个主成分,计算综合得分。结果:上述5种酚酸类成分线性关系良好,相关系数均大于0.998。平均加样回收率介于98.30%~101.22%,RSD为0.43%~2.66%。不同采收期余甘子叶中5种酚酸类成分含量存在一定差异。含量分别为0.2317~1.5074、1.9517~4.6593、2.5105~6.3325、2.2440~5.3386、13.5570~39.1897 mg·g^(-1)。不同采收期5种酚酸类成分总含量变化为7月>5月>8月>6月>1月>9月>4月>2月>10月>12月>3月>11月,以7月份总含量最高,含量达到(55.158±0.83)mg/g,呈现先降后升的动态变化趋势。主成分分析结果表明综合得分最高的月份为7月。结论:建立的方法可用于同时测定不同采收期余甘子叶中5个酚酸类成分的含量。最适宜采收期为7月。

余甘子的回甘风味研究进展

余甘子具有特殊的“回甘”风味,通过对其风味物质的分析,发现至少有两方面原因。一是苦甜与“涩甜”对比效应会放大对甜味的感受,二是余甘子中水解性单宁、黄酮醇类和有机酸物质在前期主导酸涩苦风味的同时,也会增添甜味和果香风味。后期糖类和鲜甜味氨基酸逐渐占据优势地位,会带来甜味感受。该文总结了现有余甘子风味研究面临的问题,为后续风味研究与产品开发提供理论基础。

余甘子水提物对糖尿病模型大鼠脂质代谢紊乱和胰岛素抵抗的改善作用及机制研究

目的 探讨余甘子水提物改善糖尿病模型大鼠脂质紊乱和胰岛素抵抗(IR)的作用及可能机制。方法 雄性SD大鼠进行IR造模,并随机分为模型组、阳性对照组和余甘子水提物高、中、低剂量组,另设空白组,每组各10只。余甘子水提物高、中、低剂量组大鼠分别给予800、400、200 mg/kg余甘子水提物稀释液,阳性对照组大鼠给予2.7 mg/kg吡格列酮溶液,空白组和模型组大鼠给予等体积生理盐水,每日灌胃1次,连续4周。观察大鼠一般状态并测定其体质量及血清脂代谢指标[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]水平;应用酶联免疫吸附法测定并计算其血清空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(IRI)及胰岛素敏感指数(ISI);通过苏木素-伊红染色观察其肝组织病理形态;通过碘酸-雪夫(PAS)染色法观察其肝组织糖原表达情况,并计算染色面积;采用Western blot法检测其肝组织中氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)、核因子κB(NF-κB)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠多饮、多食、多尿现象明显,其血清中TC、TG、LDL-C、FINS水平和IRI显著升高(P<0.05),ISI显著降低(P<0.05);肝小叶结构明显紊乱,肝细胞多发变形、肿大,且有许多脂质沉积和脂肪空泡;糖原PAS染色面积显著减小(P<0.05);PPARγ、p-AMPK蛋白表达水平显著降低(P<0.05),NF-κB蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,余甘子水提物高、中剂量组大鼠精神状态、肝组织病理形态及糖原表达情况均明显好转,以上指标水平均显著逆转(P<0.05)。结论 余甘子水提物可能通过激活PPARγ/AMPK/NF-κB信号通路,改善IR模型大鼠的糖脂代谢紊乱、肝功能和IR。

不同产地、不同提取方法对余甘子多酚含量及抗氧化活性的影响

本文选用广东、广西、福建、云南、海南五地的余甘子,采用亚临界水提取法、微波-热水提取法、溶剂浸提法、微波提取法、超声波提取法提取余甘子多酚,对比分析多酚含量及抗氧化活性。结果表明,在不同产地中,云南余甘子提取所得多酚含量最高(345.24 mg GAE/g),广东余甘子提取所得多酚含量最低(198.83 mg GAE/g)。选取云南余甘子,采用不同方法提取多酚,其中亚临界水提取所得余甘子多酚含量最高(387.33 mg GAE/g),微波提取所得余甘子多酚含量最低(223.45 mg GAE/g);抗氧化活性研究表明,不同产地中,云南余甘子提取所得多酚对·OH的清除率高于其它地区(P<0.05),为85.99%,不同产地余甘子提取所得多酚对ABTS^(+)自由基清除率无显著性差异,清除率均在97%以上,但云南余甘子提取所得多酚对DPPH·的清除率较低(70.01%);不同提取方法中,亚临界水提取所得余甘子多酚对DPPH·、ABTS^(+)·和·OH的清除率均高于其它方法,多酚浓度与自由基清除率呈明显量效关系。因此,选用云南余甘子,采用亚临界水提取是提高余甘子多酚产率和抗氧化活性的一种较好的选择。

余甘子化学成分研究

目的研究余甘子Phyllanthus emblica L.的化学成分。方法余甘子60%丙酮提取物采用Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备液相进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到9个化合物,分别鉴定为1-O-(3-methoxyl-galloyl)-β-D-glucopyranose(1)、裂环异落叶松脂醇-9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、1-O-trans-cinnamoyl-β-D-glucopyranose(3)、(9S,11S)-1-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid(4),nonialkaloid A(5)、1-O-trans-cinnamoyl-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranose(6)、1-O-trans-cinnamoyl-α-L-arabinopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranose(7)、没食子酸(8)、1-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖苷(9)。结论化合物1为新化合物,化合物2~7为首次从该植物中分离得到。

余甘果的生物活性物质及其功效研究进展

余甘果有清热凉血、健胃消食、生津止咳等作用。余甘果含有多种氨基酸、矿物质元素、蛋白质、维生素和有机酸等,这些物质赋予余甘果独特的口感和营养。余甘果中同时含有丰富的黄酮类物质、鞣质等多酚物质和多糖等活性成分,与余甘果的健康功能息息相关。该文综述余甘果抗氧化、降血糖、护肝、抗炎等生理活性及其作用机理、研究现状,以期为余甘果的综合应用及其产品开发提供参考依据。

基于化学模式识别及多指标定量分析评价余甘子叶的质量

目的建立余甘子叶的指纹图谱及多指标含量测定方法,为余甘子叶的质量标准提升提供实验依据。方法本实验采用HPLC法,色谱柱为Inertsil ODS-3 C_(18)(5μm,4.6 mm×250 mm),乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;全波长扫描;柱温为30℃;流速为1 mL·min^(-1);进样量为5μL。用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012版)对23批余甘子叶进行评价,建立指纹图谱和余甘子叶药材中表没食子儿茶素、柯里拉京、诃子联苯酸、鞣花酸及诃子酸5种成分的含量测定方法。用化学计量学评价余甘子叶质量。结果建立了23批余甘子叶HPLC指纹图谱,共标示出了14个共有峰,指认了表没食子儿茶素、柯里拉京、诃子联苯酸、鞣花酸和诃子酸,5种成分线性关系良好,相关系数r>0.9990。平均加样回收率分别为100.63%、99.37%、99.82%、98.88%、99.29%。聚类分析将23批余甘子叶分为2类,通过主成分分析,进一步评价不同产地间质量的差异。结论建立的余甘子叶HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法准确、重复性好,可为余甘子叶的质量评价提供参考。

基于网络药理学的余甘子保健作用机制研究

【目的】探索余甘子(Phyllanthus emblica L.)具食疗保健作用的有效成分和保健作用机制,为余甘子的开发利用提供参考。【方法】首先分别以“余甘子”、“Phyllanthus emblica”或我国台湾地区和香港地区的余甘子拉丁名“Phyllanthi fructus”为关键词,在中药化学数据库、传统中药化学成分及靶标数据库和台湾地区传统中药化学成分数据库中对其化学成分进行检索;在此基础上,筛选出口服利用度≥20%的有效成分,进而通过STRING数据库、BioGRID数据库、STITCH数据库和CTD数据库对有效成分的蛋白靶标进行筛选,最后通过靶标的基因本体论(gene ontology,GO)、KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)代谢通路和疾病本体论(disease ontology,DO)的富集分析,阐明余甘子保健功效成分的潜在作用机制。【结果】对余甘子化学成分初步的检索与核定发现,其含有亚油酸、并没食子酸、没食子酸、诃子次酸、诃子酸等10种具不同结构的化合物;经口服利用度筛选后,确定油酸、没食子酸、并没食子酸和诃子酸是余甘子中具潜在保健功效的有效成分;进一步的药物靶标互作分析发现,这些功效成分可作用于前列腺素G/H合酶、维甲酸类受体、内源激素类受体和谷胱甘肽硫转移酶。GO富集分析结果表明,在生物学过程中,余甘子有效成分的靶标在甾体类激素响应、谷胱甘肽及其衍生物的生物合成和代谢过程等条目下富集;分子功能中,余甘子有效成分的靶标在氧化还原酶活性、过氧化物酶活性和谷胱甘肽转移酶活性等条目下显著富集。基于KEGG代谢通路的富集分析结果显示,余甘子功效成分靶标与多重肿瘤生物学途径及动脉粥样硬化、抗病毒、乙型肝炎和丙性肝炎等通路相关。DO的富集分析结果显示,余甘子活性成分靶点与前列腺癌、腺体癌、头颈部肿瘤、神经胶质瘤等恶性肿瘤存在重要联系。【结论】余甘子的功效成分可以通过谷胱甘肽硫转移酶、前列腺素G/H合酶等途径发挥抗肿瘤耐药性和抗动脉粥样硬化等功效,是研发具有抗炎、抗衰老、降血脂和免疫调节疗效保健食品的重要植物资源。