淡紫拟青霉·哈茨木霉微胶囊剂的制备及对苹果轮纹病菌的抑制作用

为延长微生物菌剂货架期,提高其在环境中存活率,保证其药效,本研究采用复凝聚法分别制备淡紫拟青霉和哈茨木霉微胶囊剂。微胶囊剂以哈茨木霉菌和淡紫拟青霉菌为芯材,明胶和阿拉伯胶为壁材,通过响应面法确定了微胶囊的最佳包埋条件。淡紫拟青霉微胶囊成囊条件为:明胶和阿拉伯胶各2.5%(40 mL)为壁材溶液、孢子浓度1×10^(9)cfu/m L、固化pH和温度分别为:4℃和40℃、搅拌速度500 r/min,最终包埋率达(85.44±0.22)%,中位粒径为23.62μm。4℃下贮存720 d,孢子存活率为95.23%;哈茨木霉成囊条件为:明胶和阿拉伯胶各1.6%(40 mL)为壁材溶液、孢子浓度1×10^(9)cfu/mL、固化pH和温度分别为:4.2℃和40℃、搅拌速度500 r/min,包埋率达92.17%,中位粒径为27.19μm。25℃下的存活率为92.11%。4℃下贮存720 d后,孢子存活率为96.25%。将制备的复合微胶囊剂用于苹果轮纹病的室内离体测试,当哈茨木霉微胶囊与淡紫拟青霉微胶囊以浓度6:4的比例进行混合后,抑制效果可达60.0%。

苯丙酸类代谢与苹果对轮纹病抗性的关系

采用离体接种法研究了不同苹果品种被轮纹病菌(Physalospora piricola Nose)侵染后苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性以及木质素和绿原酸含量的变化及其与抗病性的关系。接种6d 后各品种(系)枝条的 PAL 活性迅速提高,两天内提高几百倍,果实的 PAL 活性也提高很多;伴随PAL 酶活性的变化,各品种果实、枝条的绿原酸、木质素含量也发生明显的变化,但抗病品种(系)与感病品种差异并不显著。结果表明苹果对轮纹病菌的抗性与苯丙酸类代谢的定速酶 PAL 有关,并通过其代谢产物木质索、绿原酸得到表现,但 PAL 酶活性并不宜作为苹果抗轮纹病生理指标。

球孢白僵菌对3种苹果病原真菌的抑制作用

为了研究球孢白僵菌(Beauveria bassiana)对果树病原真菌的抑菌活性,在实验室条件下,测定了球孢白僵菌BD-B180菌株对苹果腐烂病菌(Valsa mali Miyabe et Yamada)、苹果轮纹病菌(Physalospora piricola Nose)、苹果斑点落叶病菌(Alternaria mali Roberts)3种苹果病原菌的抑制作用。结果表明,对峙培养中,球孢白僵菌BD-B180对3种病原菌均有抑制作用,其中,对苹果斑点落叶病菌的抑制效果最好,其次为苹果轮纹病菌和苹果腐烂病菌,最高抑制率分别为45.08%、41.35%和39.74%。在加入BD-B180孢子悬浮液的PDA培养基上接种苹果病原真菌,3种真菌菌丝生长均受到不同程度的抑制,抑制程度随孢子浓度的增加而增强。当孢子悬浮液浓度为2.49×107cfu/m L时,对苹果轮纹病菌的抑菌效果最佳,最高抑制率达90.81%,对苹果斑点落叶病菌和苹果腐烂病菌的最高抑制率分别为77.14%和52.78%。BD-B180发酵液的抑菌效果随着发酵天数的增加而增强,振荡培养20 d的发酵液对苹果轮纹病菌、苹果斑点落叶病菌和苹果腐烂病菌的最高抑制率分别为59.76%、66.42%和68.33%。说明利用球孢白僵菌开发抗果树病原菌活性物质具有较大的潜力。

30%多菌灵·戊唑醇悬浮剂防治苹果轮纹病田间药效试验

30%多菌灵·戊唑醇悬浮剂防治苹果轮纹病的田间试验结果表明,于苹果轮纹病发病初期开始施药,600～800倍液连施7次,间隔7～8d,对苹果轮纹病有良好的防治效果,采收期平均防效85.56%,贮藏30d平均防效达79.76%。

梨叶片感染轮纹病菌后的生理变化

梨叶片被轮纹病菌感染后,多酚氧化酶(PPO)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性均显著下降。但叶片内丙二醛(MDA)含量和超氧阴离子(O2-)的产生速率上升;还原型谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸(ASA)含量降低。这些结果表明,梨叶片被轮纹病菌感染后,叶内活性氧消除系统被破坏,而叶内膜脂过氧化作用加强是最终导致梨叶片受害的原因。

藜芦乙醇提取物对植物病原真菌的抑菌活性研究

通过测定藜芦的乙醇提取物以及各萃取部分对植物病原真菌的抑菌活性,寻找藜芦中的农用活性物质,为其综合开发利用提供科学依据。采用菌丝生长速率法测定了藜芦球茎和根乙醇提取物对6种植物病原菌的抑制作用。试验结果表明,当供试浓度为5.0 mg/mL时,对苹果腐烂病菌(Valsa mali)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum)和苹果轮纹病菌(Physalospora piricola nose)的抑菌率比较高,分别为96.4%、78.1%和74.3%。藜芦乙醇提取物的不同极性溶剂萃取物的抑菌活性较高,乙酸乙酯萃取物对苹果腐烂病菌和苹果轮纹病菌的EC50分别为0.161 mg/mL和0.551 mg/mL;正丁醇萃取物对苹果腐烂病菌和苹果轮纹病菌的EC50分别为0.190 mg/mL和0.451 mg/mL。乙酸乙酯萃取物是进一步研究的重点。

苹果轮纹病发生规律及防治措施

[目的]为提高苹果品质及经济效益。[方法]调查了苹果轮纹病的发生规律,并采用物理、化学、农业措施进行防治。[结果]苹果轮纹病的发生具有一定规律,并掌握了一套合理的防治措施。[结论]为今后的防治工作提供了借鉴。

亚硒酸钠对梨叶片感染轮纹病菌后APX、SOD、GPX和GR活性的影响

用浓度为0、0.5、1.0、1.5 mg.L-1的亚硒酸钠预先处理梨叶片,3d后接种纶纹病菌(Physalospora Piricola Nose),接种3 d后开始测定各种指标.结果表明,经1.0 mg.L-1亚硒酸钠处理的梨叶片,能抑制轮绞病菌感染后抗坏血酸过氧化物酶(APX)、愈创木酚过氧化物酶(GPX)、谷胱甘肽还原酶(GR)和超氧化物岐化酶(SOD)活性的下降.可初步确定,1.0 mg.L-1亚硒酸钠溶液可缓解轮纹病菌对梨叶片的伤害作用.

20%多·戊唑可湿性粉剂防治苹果轮纹病田间药效试验

田间药效试验表明,20%多·戊唑可湿性粉剂对苹果轮纹病具有良好的防治效果。苹果轮纹病发生初期,使用20%多·戊唑可湿性粉剂1000￣1500倍液,防治效果可达81%￣96%,对苹果树安全。

水杨酸和轮纹病菌对梨叶片电阻抗参数的影响

【目的】为了探讨电阻抗参数是否能够监测梨叶片受胁迫程度,【方法】以鸭梨(Pyrus bretschneideri‘Yali’)为试材,0.2 mmol·L-1水杨酸诱导后接种轮纹病菌,研究梨叶片电阻抗参数及与膜脂过氧化相关的生理参数的变化。【结果】结果表明,水杨酸处理后叶片的胞外电阻率增大,接种轮纹病菌叶片的胞外电阻率、胞内电阻率和弛豫时间分布系数减小,而弛豫时间增大。水杨酸诱导后超氧化物歧化酶(SOD)活性增强,丙二醛(MDA)和超越阴离子(O.2)含量降低。对电阻抗参数与生理参数的相关性分析表明,接种病菌叶片的胞内电阻率变化与MDA含量显著正相关,水杨酸诱导后叶片的胞内电阻率、胞外电阻率的变化与O.2含量显著正相关,而弛豫时间则均与叶片中O.2含量为显著负相关。【结论】电阻抗参数能够反映梨叶片细胞内的变化,可以作为监测梨叶片受胁迫程度的物理指标。

木霉菌对苹果主要真菌病害的抑制及其在土壤中的定殖作用

以胶东半岛老的果园中土壤为试材,采用逐步稀释法,涂平板于孟加拉红培养基中,根据形态和分子方法鉴定分离木霉菌。分离出的木霉菌与苹果主要病害对峙培养在不同pH的培养基上,观察不同pH条件下,对真菌病害的抑制效果。土壤有机质和pH是目前胶东果园的主要问题,采用正交法设计,研究了不同的土壤条件对木霉菌生长的影响。结果表明:在不同pH条件下,木霉菌抑制苹果病原真菌的效果不同,木霉菌在不同的pH条件下对腐烂病(Valsa mali)和炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)均可以抑制,但对轮纹病(Physalospora piricola Nose)只有在pH 6.0时没有效果外,其它pH时都对轮纹病有抑制作用。在土壤pH 6.5和土壤有机质含量为75 g·kg^(-1)时,最有利于木霉菌定殖。同时还发现木霉菌对土壤的pH具有调节作用,无论在碱性条件下,还是酸性条件下,均可以使土壤pH趋于中性,另外木霉菌可以增加土壤有机质含量,特别是在高土壤有机质含量的情况下,增加更加显著。总之,分离出的木霉菌对苹果腐烂病、炭疽病和轮纹病抑制效果好。土壤pH和有机质含量对木霉菌的生长有影响,高土壤有机质含量和中性土壤有利于木霉菌定殖。另外,木霉菌能有效地改良土壤有机质含量和土壤pH。

水杨酸对梨SOD、PPO同工酶和NPR1表达的影响

以鸭梨(Pyrus bretschneideri‘Yali’)为试材,研究外源水杨酸处理后梨叶片中内源水杨酸(SA)及超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)同工酶的变化特点以及病程相关基因非表达子 1(NPR1)对水杨酸的早期应答反应。结果表明:水杨酸处理后梨叶片中内源 SA 含量升高,其中游离态SA 含量随处理浓度增大而逐渐升高,但均显著低于对照;结合态 SA 随处理增大而逐渐降低,但均显著高于对照。SOD、PPO 同工酶酶谱分析结果显示,水杨酸处理后酶谱带表达量增强。接种病菌试验表明,0.200 mmol · L-1SA 可以诱导梨增强对轮纹病的抗性,且诱导处理过的叶片受到病菌侵染时 SOD、PPO 酶活性增强。实时荧光定量 PCR 分析表明,0.200 mmol · L-1SA 诱导后梨叶片中 NPR1 表达量明显升高,但NPR1 在茎中的表达受到抑制。