Combined Toxicity Test of Complex Agents of Metalaxyl and Other Fungicides against Phytophthora parasitica var. nicotianae

[ Objective] To overcome the resistance of Phytophthora parasitica var. nicotianae against metalaxyl and effectively control its damage, new efficient complex agent of metalaxyl was studied and developed. [ Method] The toxieities of nine fungicides against P. parasitica were measured using growth rate method. On this basis, the fungicides with good effects were selected to compound with metalaxyl, and the optimum complex ratio was confirmed. [Result] The toxicity of metalaxyl was the strongest with EC50 of 2. 130 5μg/ml; followed by carbendazim, mancezeb and dimethomorph with EC50 of 2.357 9, 2.639 8 and 2. 778 8 μg/ml. The effect of cyazofamid was the poorest with EC50 of 6. 278 8 μg/ml. The optimum complex ratios of dimethomorph, carbendazim and mancezeb with metalaxyl were 40： 60, 30：70 and 20： 80, and their co-toxicity coefficients were 138.80,124.25 and 115.00, respectively. [ Conclusion] The complex agents had application and promotion value, which could be used to carry out further field trials.

烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var. nicotianae)生理小种鉴定技术研究

1981—1985年从全国8个主产烤烟省30个地、县共采集和分离到烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)57个分离物,用游动孢子悬浮液接种根及茎基部,试验表明这种接种方法效果为好。用此方法将各分离物接种在常用的Burley_(21)、Burley_(37)、N.nesophila、N.stocktonii等4个鉴别寄主上进行了鉴定试验。通过鉴定,采自全国57个分离物中有44个属于生理小种Ⅰ号,占77.2%;有12个属于生理小种0号,占21.1%,还有个别分离物有待进一步鉴定。

拟氨基多糖抑菌剂K1、K2对烟草黑胫病原菌(Phytophthora parasitica var．nicotianae)的抑制效果研究

采用生长速率法测定了拟氨基多糖类抑菌剂K1、K2对烟草黑胫病原菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)的抑菌效果。结果表明:K1、K2对烟草黑胫病原菌均有显著的抑制作用,且抑制效果随K1、K2浓度的增大而增强;20 mL/L的K1、K2对烟草黑胫病原菌的抑制率分别为50.58%、84.68%,EC50分别为26.15、4.87 mL/L。

A Preliminary Study on the Resistance to Different Fungicides in Phytophthora parasitica var. nicotianae

[Objective] This study aimed to investigate the resistance to different fungicides in Phytophthora parasitica var. nicotianae. [Method] Under indoor incubation conditions, the resistance to dimethomorph, metalaxyl-mancozeb, propamocarb and ovraclostrobin.dimethomorph in P. parasitica strain isolated from Zhenyuan County in Qiandongnan State was analyzed with colony growth measurement method. [Result] P. parasitica exhibited different levels of sensitivity to four fungicides. To be specific, P. parasitica exhibited the highest resistance to dimethomorph, and ECho reached 1.19 μg/ml. [Conclusion] In Zhenyuan tobacco-growing area, long-term single use of dimethomorph possesses certain resistance risk in prevention and control of black shank disease.

烟草疫霉拮抗放线菌的生防潜力评价

由寄生疫霉烟草致病变种Phytophthora parasitica var.nicotianae引起的烟草黑胫病是连作烟田的重要土传病害之一,重发年份常给烟农造成巨大的经济损失。本研究通过稀释分离法从贵州省遵义市烟草黑胫病重病区的健康烟草根际土壤中共分离获得179株放线菌。通过平板对峙培养法筛选得到15株对烟草黑胫病菌菌丝生长有明显抑制作用的菌株。测定了这15个菌株代谢液对烟草疫霉菌丝生长的抑制作用,其中H-3菌株代谢液对烟草疫霉菌丝生长抑制率最高,达到85.68%。研究了H-3代谢液对烟草疫霉游动孢子萌发的抑制作用。结果显示培养6、12和24 h对游动孢子萌发的抑制率分别为72.75%、65.20%和63.45%。结合形态特征及16S rDNA序列分析,初步鉴定H-3菌株属于链霉菌属Streptomyces sp.。盆栽防效和田间防效试验结果表明,施用H-3对烟草黑胫病具有一定的防效,当添加H-3固体发酵物22.5 kg/hm2时田间防效最好,防效可达70.42%。通过荧光定量PCR技术检测了烟草根际土壤中烟草疫霉的量,结果发现,随着H-3用量的增加,根际土壤中烟草疫霉的拷贝数呈下降趋势,说明H-3处理后,能有效降低烟草根际土壤中烟草疫霉的菌量。

烟草黑胫病生防功能菌筛选及其应用效果

以野生络石Trachelospermum jasminoides为试验材料,采用组织平板法从其植株体内分离培养出31株内生细菌活体纯培养物,以烟草黑胫病原Phytophthora parasitica var.nicotianae为指示菌株筛选出的HHH12具有明显的抑菌作用,抑菌圈直径达到24 mm,初步定性为具有生防活性菌株。HHH12的多相鉴定结果为假单孢菌属Pseudomonas菌株,暂定名Pseudomonas sp.HHH12。盆栽试验证实,HHH12菌悬液的灌根+叶面喷雾混合处理对烟草黑胫病不同发病阶段均表现出比叶面喷雾和灌根单一处理有更好的应用效果,药后14 d时的防治效果达到72.86%。菌株HHH12具有良好的开发应用前景。

运用致病毒素筛选抗烟草黑胫病细胞突变体Ⅱ 抗毒素愈伤组织的再生植株及其后代的抗病性鉴定

用黑胫病粗毒素作为选择压力， 结合辐射诱变技术， 从烟草花粉植株叶片的愈伤组织中筛选出抗毒素的愈伤组织， 并对其再生植株及其 Ｍ２ 代进行抗病性鉴定、选育． 目前已获得６ 个高抗黑胫病的细胞突变株系， 且抗病性状表现稳定， 并建立了一套烤烟抗黑胫病突变体的筛选和鉴定体系． 研究结果表明， 在细胞水平上筛选抗病突变体是开发新抗源的有效途径．

龙舌兰麻种质资源抗斑马纹病鉴定研究

通过分离培养斑马纹病病原菌,人工接种鉴定不同龙舌兰麻种质的抗斑马纹病的特性。结果表明,番麻、东368、墨引6、墨引12、墨引7、墨引5、假7、马盖麻、东109、金边弧叶龙舌和兰墨引4号11份种质为高抗种质,病斑扩展速度和病情严重度可作为龙舌兰麻抗病性快速鉴定技术手段。

侧孢短芽孢杆菌B8发酵液中抑菌物质理化性质研究

从烟草根际土壤中分离到一株生防菌侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)B8,其发酵液对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasiticavar.nicotianae)的抑菌圈直径可达到63 mm。为了明确生防菌株B8发酵液中抑菌物质的理化性质,对发酵液的稳定性进行了测定。结果表明,菌株B8发酵液中的抑菌物质具有较高的热稳定性和酸碱稳定性,能耐受100℃的高温,抑菌活性在酸性条件下略优于碱性条件;抑菌物质对蛋白酶K及胰蛋白酶不敏感,对胃蛋白酶部分敏感;不能被常用有机溶剂完全萃取;硫酸铵能够将部分抑菌物质沉淀下来,其中30%和80%饱和度下沉淀的抑菌物质较多。由此推断,该抑菌物质可能为蛋白或多肽类物质。

湖北省烟草黑胫病菌生理小种研究初报

在湖北省襄樊、恩施等主要烟区采集烟草黑胫病病株样本111个,分离纯化出30个烟草黑胫病菌株。采用游动孢子悬浮液注射接种鉴别寄主和TTZ(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)颜色反应两种方法鉴定其生理小种类型。结果表明,供试的30个菌株在TTZ培养基中的反应皆为红色,有24个菌株在鉴别寄主反应中对L8和NC1071有较强致病力,而对N.nesophila无致病力,应为1号生理小种,占供试菌系的80%,为湖北省优势生理小种;其他6个菌株中有4个菌株对NC1071有较强致病力,但对L8致病力较弱,有1个菌株对L8和NC1071致病力较弱;1个菌株对NC1071致病力较弱,但对L8有较强致病力;6个菌株对N.nesophila无致病力,是否为2号生理小种还是其他致病型,尚待进一步研究确定。

木霉菌防治烟草黑胫病研究进展

黑胫病是烟草生产上的重要土传病害之一,广泛分布于各个烟草种植区。综述了利用木霉菌防治烟草黑胫病的菌株筛选、防治效果、拮抗机制的最新进展,为烟草黑胫病的生物防治提供了参考。

银法利和烯酰吗啉对烟草黑胫病菌的毒力测定及田间防治试验

采用菌丝生长速率法测定了银法利(氟吡菌胺+霜霉威盐酸盐)、烯酰吗啉对7株来自广西不同烟区、对甲霜灵敏感性不同的烟草黑胫病菌的毒力,结果表明银法利、烯酰吗啉对7个烟草黑胫病菌株均具有很好的抑制作用,EC50值范围分别为1.1090～1.9661、0.6218～1.0625 mg/L,两者对甲霜灵敏感型、一般耐药型、耐药型的菌株的毒力无明显差异,说明它们与甲霜灵没有交互抗性。盆栽试验表明银法利和烯酰吗啉对耐甲霜灵菌株引起的黑胫病有良好的防治效果。2008～2010年的田间防治试验结果显示,68.75%银法利悬浮剂和50%烯酰吗啉可湿性粉剂对烟草黑胫病具有很好的防效,显著优于常用药剂68%精甲霜灵.代森锰锌水分散粒剂的防效。

烟草黑胫病菌拮抗内生细菌的筛选和鉴定

为寻找防治烟草黑胫病新途径,2001至2003年,从湖南永州和宁乡等地烟草黑胫病发病严重的田块采集健株,共分离到内生细菌株120株,经测定,8株内生细菌菌株在室内有较强的拮抗作用,这8株内生细菌与烟草黑胫病菌共培结果显示,55y,NN-3,YN-4和YN-10对烟草黑胫病菌抑菌效果均在66%以上.根据内生细菌形态特征和生理生化性状,初步鉴定内生细菌55y为假单胞杆菌属铜绿假单胞菌,NN-3为芽孢杆菌属枯草芽孢杆菌,YN-4,YN-10为芽孢杆菌属凝结芽孢杆菌,且这4菌株均为烟草内生细菌.

6种中草药提取物对烟草黑胫病菌的抑制作用

采用生长速率法测定了A(生物碱类)、B(苷类)、C(挥发油类)、D(糖类)、E(黄酮类)、F(香豆素类)6种中草药提取物对烟草黑胫病菌的抑制效果,结果表明:6种中草药提取物对烟草黑胫病菌均有明显的抑制作用,且随使用剂量的增大而增强。A药和B药分别在使用剂量为5 mL/L和9mL/L时抑制率大于50%,与对照化学药剂72%甲霜锰锌3 000倍液和中生菌素500倍液抑制率无明显差异。C药在使用剂量为80 mL/L时,抑制率达到了70.39%,明显高于对照药剂。D药、E药、F药在使用剂量为80 mL/L、8 mL/L、12.5 mL/L时,抑制率分别达到99.22%、86.64%、79.64%,显著高于对照药剂(P<0.05),其中,D药可完全抑制烟草黑胫病菌的菌丝生长。将6种中草药提取物对烟草黑胫病菌的毒力进行比较,E药的有效抑制中浓度(EC50)最小,为2.65mL/L,其后依次为A药、F药、B药、C药、D药,EC50分别为4.56、4.76、5.99、16.55、17.66 mL/L。6种中草药提取物作为防治烟草黑胫病的抑菌活性物值得进一步研究。

烟草黑胫病菌研究进展(Ⅱ)

综述了烟草黑胫病菌致病性与生理分化的发现、机制、类型、主要途径、鉴定方法(生理生化法和寄主法)以及交配型的类型和在无性繁殖条件下发生变异的因素等方面的主要研究进展,并对烟草黑胫病菌致病性与生理分化、接种方法进行了比较分析和讨论。

抗菌肽和几丁质酶基因提高烟草对黑胫病菌和赤星病菌的抗性研究

通过农杆菌介导法将加信号肽修饰的人工合成杂合抗菌肽CEMA基因(SPCEMA),苜蓿防御素基因(AFP),苦瓜几丁质酶基因(CHI)以及SPCEMA-CHI、AFP-CHI、AFP-SPCEMA双价基因导入本明烟(Nicotianabenthamiana),并对转基因烟草T0和T1代进行了抗病性检测,比较了不同转基因植株的抗病效果。研究结果表明,转基因烟草对黑胫病菌(Phytoph-thoraparasiticavar.nicotianae)、赤星病菌(Alternariaalternata)的抗性均强于非转基因烟草,病情指数差异达极显著水平,其中转AFP-CHI双价基因烟草具有较强的抗性,与单价转基因烟草的抗性差异达显著水平。但各单价转基因以及双价转基因烟草之间对上述病菌并未表现出显著的抗病性差异。结果表明植物源的抗菌肽基因与几丁质酶基因在抗植物真菌病害中具有协同增效作用。

烟草黑胫病生物防治研究进展

烟草黑胫病是烟草上重要毁灭性病害之一,生产上主要采取综合防治措施.随着烟草生产向无公害发展,生物防治取得较大进展.就其植物诱导抗性的利用、生防菌等生物防治方面的研究作简要综述.

烟草黑胫病菌的寄主范围

【目的】探究烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)的寄主范围,为烟草黑胫病菌的相关研究提供理论依据,为烟草黑胫病菌所致病害的综合防治提供决策依据。【方法】人工模拟烟草黑胫病菌在田间的侵染途径,采用菌丝块创伤和不创伤接种61种农作物及杂草的活体或离体组织,结合柯赫氏法则鉴定,对烟草黑胫病菌的寄主范围进行较为系统的大样本研究。【结果】烟草黑胫病菌在人工创伤条件下可侵染21科41属51种植物,在不创伤条件下可侵染10科15属16种植物,首次发现烟草黑胫病菌在人工创伤接种条件下可以侵染21科40属47种植物,在人工不创伤接种条件下可以侵染10科12属12种植物。【结论】烟草黑胫病菌在人工模拟条件下的寄主范围较为广泛,其中包括一些常见农作物和烟田常见杂草,当这些植物在有利于病害发生的高温阴雨潮湿气候条件下,在田间农事活动中受到机械创伤或遭受虫伤甚至没有损伤时,烟草黑胫病菌可能会对这些植物造成侵染,生产中应注意避免烟草同潜在寄主作物间作或连作。及时防除烟田杂草对烟草黑胫病菌所致病害的有效治理具有积极意义。

烟草黑胫病菌研究进展(一)

系统综述了烟草黑胫病菌的发现与命名、分类、生物学特征、分布与为害、致病机理、生理特性及寄主范围等方面的最新研究进展。

烯酰吗啉对我国烟草黑胫病菌的毒力研究

从山东和云南烟区采集分离了20个烟草黑胫病菌phytophthora parasitica vat．nicotianae菌株，采用菌丝生长速率法测定了烯酰吗啉对这些菌株的毒力。结果表明：20个田间菌株的EC50值在0．60-1．28μg/mL之间，与实验室保存的敏感菌株（S）的EC50值（0．32μg/mL）相比，毒力倍数在1．87—4．00之间．均属于敏感菌株。烯酰吗啉对烟草黑胫病菌孢子囊的产生有明显的抑制作用，8．00μg/mL的烯酰吗啉对孢子囊产生的抑制率为100％。通过烯酰吗啉对烟草黑胫病菌继代培养物的毒力比较证明，烟草黑胫病菌对烯酰吗啉存在抗性风险。