Peroxynitrite Scavenging Activities of Resveratrol and Piceid

In vitro antioxidant activities of resveratrol and piceid against peroxynitrite（ONOO-） were examined by the inhibition of 3-nitrotyrosine formation.Trolox was used as a positive control.Resveratrol and piceid exhibited high ONOO--scavenging activities in a concentration dependent manner.The antioxidant activities（the concentration of test compound required to yield a 50% inhibition of tyrosine nitration,IC 50） of resveratrol and piceid against ONOO-were（48.34±0.97） and（74.69±1.49） μmol/L,respectively.Compared with that of trolox[（105.40±1.16） μmol/L],their scavenging activities were 2.2-and 1.5-fold higher for resveratrol and piceid.Formation of nitroresveratrol as shown by UV-Vis spectroscopy and liquid chromatography-tandom mass spectrometry（LC-MS/MS） analysis indicates that resveratrol could directly scavenge ONOO-via nitration reaction.Our results demonstrate that foods and medicinal herbs with resveratrol and piceid as stronger ONOO-scavengers are valuable ingredients and have healthy application in preventing humans from peroxynitrite-mediated oxidative damage by scavenging peroxynitrite efficiently.

虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇甙的高速逆流色谱分离提纯及其分析

采用高速逆流色谱技术分离提纯中药虎杖中的活性多酚成分白藜芦醇和白藜芦醇甙。确定了样品前处理方法 ,选择了逆流色谱流动相体系 ,经高效液相色谱检验纯度 ,1HNMR及质谱判定结构 ,证实所得样品为白藜芦醇和白藜芦醇甙 ,得率分别为2.18 %和1.07 %。

酶解法提取虎杖中白藜芦醇、白藜芦醇苷、大黄素

用纤维素酶对虎杖进行了酶解,提高了虎杖中白藜芦醇的提取率,同时提取出白藜芦醇苷和大黄素。通过单因素实验考察了酶解温度、pH、酶解时间、酶用量对目标物提取率的影响,得出较佳的酶解工艺条件为:酶用量2mg/g虎杖,pH=3.0,在40℃酶解1h。酶解后用m(虎杖):m[φ(乙醇)=60%]=1:20,50℃提取2h。w(白藜芦醇)=1.50%,w(白藜芦醇苷)=0.38%,w(大黄素)=0.78%。酶解法较直接提取法更有利于虎杖中有效成分白藜芦醇、大黄素的提取。

高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇及其苷的含量

目的:建立同时测定虎杖提取物中白藜芦醇及其苷的含量测定方法。方法:选用自填装 ODS-C_(18)色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(41∶59)为流动相,流速为0.6mL·min^(-1),紫外检测波长为303nm。结果:白藜芦醇在0.06-0.30μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.6%(n=3);白藜芦醇苷在0.072-0.360μg范围内具有良好的线性关系,平均回收率为101.3%(n=3)。结论:本方法操作简便快速,结果准确可靠,适于中药虎杖中白藜芦醇及其苷的同时测定。

RP-HPLC法同时测定虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的含量

建立了国内首次用RP HPLC同时测定虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷含量的方法 ,并详细考察了 2个指标成分的稳定性。对不同产地的虎杖药材、不同采收期的虎杖根及根茎以及虎杖的不同部位共 2 5个样品中的白藜芦醇和白藜芦醇苷进行了含量测定 ,考察了两种活性成分的含量与产地、采收期及部位的关系 ,为虎杖资源的合理采收利用及进一步的研究提供了理论依据。

薄层荧光扫描法测定葡萄酒中的白藜芦醇及其糖苷异构体

建立了薄层荧光扫描法同时测定葡萄酒中顺反白藜芦醇及其糖苷异构体的方法。样品用C18固相柱提取,以聚酰胺薄膜为固定相,苯甲醇甲酸(10∶5∶1,V/V)为展开剂进行分离,荧光扫描法定量,4种组分的线性关系良好,相关系数为0.9972～0.9996,平均回收率为97.1%～98.5%,RSD为2.0%～3.2%。对6种市售葡萄酒进行了测定,结果满意。方法简便、快速、灵敏,测定成本低。

白藜芦醇代谢物的研究进展

白藜芦醇是一些植物在受到生物和非生物胁迫时产生的一种植物抗毒素.它在植物体内会迅速被代谢而生产紫檀芪、云杉新苷、viniferins等代谢物.这些代谢物与白藜芦醇一样具有抗菌、消炎、抗血小板凝集、防止细胞癌变等一系列的生物活性,且有些代谢物的选择性、稳定性远远大于白藜芦醇.本文对白藜芦醇代谢物中几种主要代谢物的合成途径、生物活性、代谢调控、检测方法等进行了综述.

虎杖白藜芦醇合酶基因转化拟南芥的研究

为验证虎杖白藜芦醇合酶基因PcRS在转基因植物中合成白藜芦醇的有效性,构建了植物表达载体pCAM1380-35S-PcRS,通过农杆菌介导,利用花序浸泡法转化拟南芥.转化子在含有潮霉素的培养基上经筛选后,利用PCR和Southern杂交技术检测,进一步证实PcRS基因已整合到拟南芥基因组.经过选育得到了遗传稳定的T3代纯合子转基因拟南芥株系.Northern杂交证实外源基因在转基因拟南芥纯合子株系中实现表达,并且通过HPLC法检测到终产物是反式白藜芦醇苷.两周大拟南芥幼苗产生的反式白藜芦醇苷为136μg/g(鲜重),干重为1813μg/g.

葡萄中的功效成份—白藜芦醇、白藜芦醇苷和原花青素

白藜芦醇(resveratrol)、白藜芦醇苷(piceid)和原花青素(OPC)是存在于葡萄中的结构相似、功能相近的功效成份。本文概述它们的有关性质、提取方法,检测方法和开发应用前景。

UV-C辐射对盆栽葡萄北丰叶片和邻近果穗果实白藜芦醇及其糖苷质量分数的影响

以1a生北丰(Vitis thunbergii×V.vinifera)葡萄盆栽结果树为试材,在果实始熟期采用紫外线C(Ultraviolet C,UV-C)辐射结合韧皮部环剥的方法,研究了UV-C辐射对葡萄叶片和邻近果穗果实白藜芦醇(Resveratrol,Res)及其糖苷质量分数的影响。结果表明,UV-C辐射诱导葡萄果实Res合成积累的敏感性低于叶片,辐射葡萄叶片对邻近果穗上果皮Res的影响远远小于UV-C直接辐射葡萄果穗,且辐射诱导葡萄果皮中Res质量分数与叶片中Res质量分数存在着一定的相关性。当叶片位于果穗下方时,叶片中反式白藜芦醇(trans-Resveratrol,trans-Res)、反式白藜芦醇苷(trans-Piceid,trans-PD)和顺式白藜芦醇苷(cis-Piceid,cis-PD)质量分数表现出环剥处理显著高于不环剥处理,然而果皮中的结果正好相反。当叶片位于果穗上方时,果皮中trans-Res、trans-PD和cis-PD质量分数表现出不环剥处理显著高于环剥处理,暗示葡萄Res可能存在韧皮部运输途径,且运输方向是双向的。此外,UV-C直接辐射葡萄果穗处理果皮trans-Res和cis-PD质量分数显著高于对照和UV-C辐射葡萄叶片处理。种子中仅检测到trans-Res,且仅环剥处理和辐射下方叶片不环剥处理显著高于对照。

白藜芦醇苷的提取纯化及其生物转化

目的提取分离虎杖药材中的白藜芦醇苷,筛选能转化白藜芦醇苷的菌株。方法虎杖药材通过醇提、液液萃取后,萃取物经大孔吸附树脂和氧化铝柱层析进行纯化;利用二步发酵法筛选白藜芦醇苷的转化菌,用TLC和HPLC法跟踪检测白藜芦醇苷和转化产物白藜芦醇,进而用NMR技术确定转化产物的结构。结果与结论从虎杖药材中提取分离得到含量质量分数为95%的白藜芦醇苷,筛选结果表明丝状真菌总状共头霉3.264(Syncephastrum racem osum3.264)能够高效地将白藜芦醇苷转化为白藜芦醇,并从转化后的发酵液中纯化得到含量质量分数为98%的白藜芦醇。

白藜芦醇和白藜芦醇苷抗氧化作用的研究

采用亚油酸体系、H2O2诱导的红细胞溶血试验研究白藜芦醇、白藜芦醇苷的体外抗氧化作用。研究结果表明:白藜芦醇、白藜芦醇苷能抑制亚油酸的过氧化作用,其抑制率高于VC、BHT、虎杖粗提物。白藜芦醇、白藜芦醇苷均可降低H2O2诱导红细胞氧化性溶血率,其作用效果好于VC、VE和虎杖粗提物,抑制率具有剂量效应。

葡萄果实生长发育过程中白藜芦醇及其糖苷的HPLC测定

利用高效液相色谱(HPLC)梯度洗脱方法,结合C18固相萃取技术,检测了葡萄果实生长发育过程中顺反式白藜芦醇及其糖苷的动态变化。结果显示,适于酿造红葡萄酒的蛇龙珠和酿造白葡萄酒的白羽品种的白藜芦醇及其糖苷含量的变化规律大不相同。葡萄果实生长发育期间,蛇龙珠果实内的白藜芦醇及其糖苷含量较高,而白羽果实中白藜芦醇含量很低,其糖苷含量则持续下降。

酶转化虎杖苷制备白藜芦醇

白藜芦醇是一种植物雌激素,具有多种生理功能。文中采用微生物酶对转化虎杖苷制备白藜芦醇,确定了酶转化条件,建立了白藜芦醇的分离纯化方法,获得了纯度高达98%的白藜芦醇样品。采用酶转化法制备白藜芦醇的得率,是虎杖直接提取法的3倍左右,且苷水解酶可循环使用。

液相色谱-质谱联用法测定不同产地虎杖中白藜芦醇及其糖苷的含量

目的:建立高效液相色谱-质谱联用方法,检测不同产地虎杖中白藜芦醇及其糖苷的存在形式及含量。方法:采用Ai-chromBond C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水(20:80),流速:0.6 mL·min^(-1),检测波长:308 nm,二极管阵列检测器;质谱检测设定为负离了模式。结果:在选定色谱条件下,白藜芦醇及其糖苷顺反异构体的线性范围良好(r>0.999),反式白藜芦醇及其糖苷的平均加样回收率分别为98.4%和97.6%;所测样品中均不含顺式白藜芦醇。结论:方法精密度好,结果可靠,适合虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇糖苷的定性定量分析;在11个省份的虎杖根茎中,湖北产地的反式白藜芦醇含量最高,而云南产地的反式白藜芦醇糖苷含量最高。

固相萃取-高效液相色谱法测定葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体

建立了固相萃取 高效液相色谱(SPE HPLC)测定葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的方法,并用此方法测定了市售的15种葡萄酒中顺反式白藜芦醇及其糖苷的含量。实验确定了葡萄酒样品中的白藜芦醇及其糖苷的固相萃取方法,通过优化萃取条件,有效地去除了葡萄酒中大量干扰成分。采用HypersilC18柱(4 6mmi.d.×250mm,5μm)分离,以乙腈 水为流动相,线性梯度洗脱,用二极管阵列检测器分别于288nm和306nm波长下检测,4种组分分离良好,提高了分析结果的准确性。采用外标法定量,4种组分的质量浓度与其峰面积在一定的范围内有良好的线性关系,相关系数为0 9973～0 9999。4种组分的平均加标回收率为97 4%～98 8%(相对标准偏差为2 1%～3 2%),检测限为0 002～0 005mg/L。对市售15种葡萄酒的检测结果表明,白藜芦醇作为葡萄酒中重要的生物活性成分,其含量与葡萄酒的酿造方式、葡萄品种、葡萄产地有密切的关系。该方法还可用于其他天然产物中白藜芦醇及其糖苷异构体的测定。

薄层层析-紫外分光光度法测定葡萄果皮中白藜芦醇及白藜芦醇苷

建立了葡萄果皮中反式白藜芦醇及反式白藜芦醇苷含量的薄层层析-紫外分光光度测定法。以甲醇提取目标组分,以高效硅胶GF254为固定相,甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸(5∶4∶1)为展开剂,对反式白藜芦醇及反式白藜芦醇苷进行分离纯化,并用紫外分光光度法进行定量,波长为306nm。结果表明,该方法测定反式白藜芦醇及反式白藜芦醇苷含量的线性关系良好,相关系数为0.9997;平均回收率为98.12%、97.23%;方法的精密度较高。并用该方法测定了酿酒红葡萄品种蛇龙珠不同生长时期的反式白藜芦醇和反式白藜芦醇苷含量。

不同溶剂提取葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体

利用白藜芦醇及其糖苷异构体几乎不溶于水,易溶于有机溶剂的性质,比较了乙酸乙酯、氯仿、乙醚,乙酸乙酯与正己烷、二氯甲烷混合溶液及双水相体系对葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的提取效果,得到了最佳的提取溶剂。结果表明:乙酸乙酯对目标化合物的提取效果优于其他有机溶剂,对白藜芦醇苷的提取率可达90%以上,对白藜芦醇的提取率低于80%。乙酸乙酯萃取操作简单、提取率较高,切实可行。

葡萄果实发育过程中白藜芦醇衍生物的诱导合成

采用高效液相色谱(HPLC)直接进样、梯度洗脱的分析方法,对酿酒葡萄品种赤霞珠(Vitis viniferva L. cv. Cabernet Sauvignon)果实发育过程中5种主要芪化物的紫外(UV)诱导性合成进行研究。结果表明,葡萄果实在生长发育过程中,白藜芦醇(Resveratrol)和白藜芦醇的2种二聚体(ε-viniferin和δ-viniferin)呈上升趋势;经紫外诱导后,白藜芦醇、白藜芦醇糖苷(Piceid)、白藜芦醇二聚体都大量积累,白藜芦醇、白藜芦醇二聚体在葡萄花后50d为积累的最高峰,且变化趋势基本一致,白藜芦醇糖苷的含量变化与白藜芦醇、白藜芦醇二聚体均呈现负相关。实验样品中均未检测到紫檀芪(Pterostilbene)。

微乳薄层色谱法鉴别虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的顺、反异构体

目的:建立以聚酰胺薄膜为固定相,微乳液为展开剂,同时分离鉴别虎杖中白藜芦醇、虎杖苷顺反异构体的方法。方法:以SDS-正丁醇-正庚烷-水微乳液为展开剂,并配以甲酸、甲醇为有机改性剂,考察了微乳液对分离度的影响,通过调节展开剂的组成,寻找出最佳的薄层分离条件并分离检测了6个产地的虎杖药材。结果:微乳液-甲酸-甲醇(1.0∶2.0∶1.0)为适宜的展开剂,其中微乳液含SDS 4%、含水量80%。与硅胶薄层比较,分离效果明显提高。结论:建立了一种分离鉴别虎杖中白藜芦醇和虎杖苷顺、反异构体的方法。方法简便、快速和准确。