Notch信号通路调控巨噬细胞极化在大鼠纤维化型饲鸽者肺的作用

目的探讨Notch信号通路调控巨噬细胞极化方向与大鼠纤维化型饲鸽者肺的关系。方法选取正常SD大鼠(Ctrl组),通过观察病理、CT,检测纤维化标记物构建纤维化型过敏性肺炎大鼠模型(M组),予以γ分泌酶(DAPT)抑制Notch信号通路(M+DAPT组),通过荧光定量PCR技术检测阻断Notch信号通路对巨噬细胞极化方向的影响。结果正常大鼠气道内滴注致敏原冻干粉20周后,病理及CT可见纤维化形成,且α-SMA、TGF-β1表达水平增高,证实造模成功;M组与Ctrl组比较:纤维化型过敏性肺炎大鼠肺组织Notch信号通路关键蛋白配体,DLL1、DLL4、JAG1、JAG2及受体Notch1、Notch2的蛋白表达水平增高;应用DAPT抑制Notch信号通路后DLL4、JAG1、JAG2及受体Notch1均下降(P<0.05);M组较Ctrl组比较:M1型巨噬细胞标记基因肿瘤坏死因子(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达量下降;M2型巨噬细胞标记基因甘露糖受体C2(Mrc2)、重组人精氨酸酶1(Arg-1)mRNA表达量升高(P<0.05),应用DAPT抑制剂后TNF-α、iNOS基因mRNA的相对表达量升高,Mrc2、Arg-1基因mRNA的相对表达量降低(P<0.05)。结论Notch信号通路调控巨噬细胞极化方向,给予DAPT抑制剂后,抑制巨噬细胞向M2型极化,有效延缓纤维化形成。

鸽舍气溶胶与饲鸽者肺功能变化相关性分析

目的探讨鸽舍气溶胶的大小和浓度对饲鸽者肺功能产生的影响。方法2021年12月~2022年1月从新疆维吾尔自治区吐鲁番市3个村庄居家饲养环境随机抽取的150位饲鸽者纳入接触组,同村未接触鸽子的健康体检者150例纳入对照组,详细询问和记录研究对象的相关信息,完善肺功能检查,并对周围环境气溶胶的浓度及大小进行了检测,分析不同浓度及大小的鸽舍气溶胶对饲鸽者肺功能(FEV 1、FVC、FEV 1%、FVC%、FEV 1/FVC)产生的影响,并分析肺功能与饲养鸽子年限、饲养数量、每日接触时间之间的相关性。结果接触组鸽舍气溶胶浓度高于对照组,接触组与对照组肺功能进行比较,可发现接触组FVC、FEV 1%、FVC%等肺功能指标均低于对照组,且组间比较差异有统计学意义(P<0.05);气溶胶浓度与FEV 1、FVC、FEV 1%、FVC%、FEV 1/FVC等肺功能指标呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。每日和鸽子接触时间与肺功能各指标呈负相关,差异有统计学意义。饲养年限与FEV 1呈负相关,差异有统计学意义。结论鸽舍气溶胶浓度越高,饲养年限、每日与鸽子接触时间越长,饲鸽者肺功能相关指标下降越明显。

维吾尔族饲鸽者肺患者细胞因子水平变化及临床意义研究

目的探讨维吾尔族饲鸽者肺(PBL)患者支气管肺泡灌洗液(BALF)与血清中白介素(IL)-2、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化及其在PBL发病机制中的作用。方法选取2012—2013年在新疆(喀什、和田)地区至少饲养鸽子1年以上的维吾尔族受试者,将新疆维吾尔自治区人民医院呼吸科确诊为PBL的受试者65例作为病例组,未患PBL的受试者120例作为阴性对照组;选取同期体检健康的未饲鸽的维吾尔族受试者120例为正常对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组受试者BALF与血清中IL-2、IL-10、TNF-α水平。结果病例组BALF与血清中IL-2、TNF-α的表达水平均较阴性对照组、正常对照组升高,阴性对照组较正常对照组亦升高(P<0.05)。病例组、阴性对照组BALF与血清中IL-10的表达水平较正常对照组均降低(P<0.05),而病例组与阴性对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论维吾尔族PBL患者BALF与血清中IL-10水平降低,IL-2、TNF-α水平升高;IL-2、TNF-α可能参与了PBL的发生发展。

饲鸽者血清中细胞因子及基因多态性的检测

揭示饲鸽者肺 (PBL )的细胞因子谱及其基因多态性在该病的发病机制中的作用。采取 14 9个饲鸽者的血样 ,根据临床症状以及沉淀抗体出现与否分为四组 :A组 /B组 (抗体阳性、有症状 /无症状 )、C组 /D组 (抗体阴性、有症状 /无症状 )。应用ELISA法检测各组血清细胞因子浓度。应用PCR扩增技术测定TNF α 30 8和IL 10 10 82的基因多态性。与C组 /D组相比 ,A组中Th1细胞因子 (IL 2 )、Th2细胞因子 (IL 4、IL 5、IL 6、IL 10 )和GM CSF浓度有显著的升高。B组中仅Th1细胞因子 (IL 2 )和Th2细胞因子 (IL 4、IL 6、IL 10 )浓度有显著的升高。除个别细胞因子外 ,A组与B组、C组与D组之间细胞因子的表达无显著性差异。各临床组间TNF α 30 8、IL 10 10 82基因型的分布以及不同的基因型间血清TNF α和IL 10的浓度无显著性差异。PBL血浆中IL 2、IL 4、IL 5、IL 6、IL 10和GM CSF的量显著增加 ,细胞因子与抗体相关 ,尤以Th2细胞因子更为显著。在TNF α和IL 10的基因多态性与PBL易感性之间未发现统计学上的关联。

微血管铸型的扫描电镜观察

用扫描电镜观察了ＡＢＳ丁酮溶液灌注的鼠兔输卵管微血管、家鸽小肠绒毛微血管和丽斑麻蜥肺微血管构筑情况。结果表明：（１）鼠兔输卵管的血液来自生殖动脉的２～４输卵管支。输卵管支进入管壁后，即在管壁内分支形成三个血管层。浆膜层血管呈网络状，肌层血管丛呈平行树枝状分布，粘膜血管层呈致密的网状。后者在伞部的密度明显高于近子宫端处。管壁内静脉较少弯曲，与动脉的伴行关系不如系膜内明显。微动脉铸型表面有环形纹理及内皮细胞核压迹，微静脉铸型表面则较光滑，无环形纹理，但有内皮细胞核压迹。（２）家鸽小肠绒毛血管丛由输入小动脉，毛细血管网和输出小静脉组成。绒毛毛细血管丰富，并相互吻合成单层密集网。输入小动脉既可从肠腺周围血管丛发出，也可直接由粘膜下动脉丛发出。绒毛下部血管表现为微直血管形态，可能部分具有门静脉性质。（３）丽斑麻蜥肺壁内面有许多网状隔膜和次级隔膜及肺泡隔将其分隔成大量的小室、亚小室及肺泡。在网状隔膜，次级隔膜、肺泡隔及肺泡壁上均有丰富的毛细血管，且相互吻合成单层密集网。在微动脉血管铸型上未显示环行平滑肌细胞的压迹，可显示有内皮细胞核的压迹。

常规胸片、CT和HRCT对养鸽者肺诊断价值的探讨

目的 通过对 10例养鸽者肺在常规胸片、CT及HRCT的典型表现分别讨论其诊断。方法 对 10例养鸽者肺病人分别做常规胸片、CT、HRCT检查 ,观察其特征性改变。结果 10例胸片显示肺透亮度减低 ,边界不清 ,CT显示肺透亮度减低 ,以肺的密度增加为主的磨玻璃影 ,边缘模糊并见粟粒状病灶弥漫分布。HRCT显示以两上、中肺中外带分布为主的实质性结节病灶。结论 养鸽者肺的影像学表现以HRCT显示最佳 ,有其典型表现 。

维吾尔族饲鸽者肺血清总IgE及蛋白电泳分析

目的了解维吾尔族饲鸽者肺患者血清总Ig E、蛋白电泳谱的情况及临床意义。方法病例分析新疆省人民医院确诊的20例维吾尔族饲鸽者肺患者和同期20例维吾尔族健康体检者血清总Ig E及蛋白电泳谱情况。结果两组比较血清总Ig E差异无统计学意义(P>0.05);维吾尔族饲鸽者肺患者血清蛋白电泳特征为白蛋白比例减少,γ球蛋白比例增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清总Ig E及蛋白电泳检测对维吾尔族饲鸽者肺病临床诊断,可提供一定的参考价值。

肺活检及支气管镜检查在弥漫性肺疾患和尘肺诊断中的价值

目的 探讨对弥漫性肺疾患和尘肺的较好的诊断方法。方法 通过纤维支气管镜检查、BALF分析及肺活体组织检查 ,综合分析诊断。结果 经纤维支气管镜检查、BALF分析检出粉尘颗粒、石棉纤维、石棉小体以及在肺活体组织检查中发现石英、氧化铝粉尘颗粒、石棉纤维或石棉小体 ,肺间质纤维化及肺组织结构破坏等改变而明确了矽肺、氧化铝尘肺和石棉肺的诊断。结论 在BALF及肺组织中检出病源性粉尘颗粒或石棉小体、肺间质纤维化或矽结节、肺泡结构破坏等改变即可确立尘肺或其他弥漫性肺疾患的诊断。

维吾尔族饲鸽者肺患者外周血Notch4基因甲基化分析

目的通过检测维吾尔族饲鸽者肺外周血Notch4基因甲基化程度探讨其临床意义。方法根据纳入及排除标准连续收集2015-2016年在新疆喀什病例资料及血样标本(总纳入60例,其中20例确诊维吾尔族饲鸽者肺患者为病例组,同期20例维吾尔族饲养鸽子未发病者为阴性对照组,同期20例维吾尔族未饲养鸽子健康体检者为正常对照组。对所收集血样标本进行常规提取DNA,亚硫酸氢盐转化,PCR扩增,体外转录和RNase A特异性酶切,并行基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术检测Notch4基因甲基化情况。结果检测Notch4片段的Cp G位点总数6个(Cp G_1,Cp G_2/3,Cp G_4,Cp G_5,Cp G_6),Cp G_1,Cp G_4,Cp G_5,Cp G_6在三组样本中的甲基化率分布差异无统计学意义(P>0.05)。Cp G_2/3在三组样本甲基化率分布差异具有统计学意义(P<0.05)。病例组Cp G_2/3甲基化率高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),病例组与阴性对照组Cp G_2/3甲基化率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Notch4基因甲基化通过炎症反应及信号通路调控肺纤维的发生发展。

饲鸽者肺SD大鼠模型的建立及病理表现研究

目的:建立饲鸽者肺SD大鼠模型,比较不同时期饲鸽者肺模型的病理表现。方法:选用清洁级健康SD大鼠36只,随机分为两组,对照组12只,实验组24只。对照组给予0.9%氯化钠溶液雾化吸入,实验组给予鸽子粪便、羽毛、皮屑等脱落物制备冻干粉溶液雾化吸入,2 h/d,共16周。造模第1、2、4、12、14周,实验组随机选取3只大鼠取组织标本。第16周处死全部大鼠。结果:造模第1周出现急性期表现,第2~14周均为亚急性期表现,第16周开始出现慢性期表现,实验组和对照组病理表现比较差异有统计学意义(P=0.000)。结论:鸽子粪便、羽毛、皮屑等脱落物的蛋白提取物可以构建不同病理分期的饲鸽者肺SD大鼠动物模型,可根据需求选择不同的时间造模。

饲养鸽子对特定地区人群肺通气功能影响的初步研究

目的探讨饲养鸽子对人群肺功能可能产生的影响。方法本研究从2019年3月-5月在新疆维吾尔自治区和田地区墨玉县下属三个村庄收集饲养鸽子人群150例及未接触鸽子人群185例,分为饲鸽者组与对照组,详细询问和记录研究对象的相关信息,并完善便携式肺功能检查;分析饲养鸽子对肺功能相关指标(FEV1%、FVC%、FEV1/FVC)产生的影响及相关指标的改变与饲养鸽子年限、饲养鸽子数量的相关性。结果饲鸽者组与对照组的肺功能相关指标(FEV1%、FVC%、FEV1/FVC)行统计学分析,得出饲鸽者组所有较对照组相比FEV1%、FVC%、FEV1/FVC均有下降,差异有统计学意义(P <0.05);饲鸽者组中FEV1%、FVC%、FEV1/FVC与饲养鸽子的年限、饲养鸽子数量无明显相关性。结论饲养鸽子会导致肺功能下降。

维吾尔族饲鸽者肺IFN-γ及IL-4基因多态性研究

目的：探讨IFN-γ（rs2069705）及IL-4（rs2070874）基因单核苷酸多态性与维吾尔族饲鸽者肺的关系。方法：根据纳入及排除标准收集病例资料及血标本（总纳入92例,其中患病组32例,阴性对照组30例,正常对照组30例）,对纳入者的全血标本进行DNA提取,根据UCSC数据库中SNP位点附件的序列信息,利用Mass ARRAY技术平台设计引物、PCR扩增、SAP、单碱基延伸、点样质谱检测IFN-γ及IL-4基因进行多态性分析,采用SPSS18.0软件进行统计分析,基因型及等位基因分布频率的比较采用X2检验。结果：IFN-γ（rs2069705）基因存在CC、CT、TT三种基因型,IL-4（rs2070874）基因存在CC、CT、TT三种基因型,IFN-γ（rs2069705）CC、CT、TT基因型在患病组、未患病组、对照组中分布频数以及C、T等位基因在各组中分布频率比较均无明显差异（X2=2.607,P=0.626;X2=2.244,P=0.326）;并进行基因型分布频率的组间两两比较均无明显差异（X2=1.144,P=0.564;X2=0.534,P=0.766;X2=2.0,P=0.368）。IL-4（rs2070874）CC、CT、TT三种基因型在患病组、未患病组、对照组中分布频数以及C、T等位基因在各组中分布频率比较均无明显差异（X2=6.614,P=0.158;X2=5.408,P=0.067）;但进行基因型分布频率组间两两比较发现患病组与未患病组中比较差异有统计学意义（X2=6.67,P=0.036）;患病组中纯合子TT数量较纯合子CC及杂合子CT数量相比较,纯合子TT发生PBL的相对危险度OR（95%CI）分别为0.11（0.02~0.68）、0.16（0.03~0.79）,P值分别为0.018、0.025,差异有统计学意义;纯合子CC与杂合子CT比较差异无统计学意义（P=0.402;P=0.134）。结论：IFN-γ（rs2069727）基因多态性可能参与维吾尔族PBL的发生发展,但未在PBL发病机制中起作用,需要加大样本量进一步证实。而IL-4（rs2070874）基因多态性可能参与维吾尔族饲鸽者肺（Pigeon Breeder＇s Lung,PBL）的发生发展,IL-4（rs2070874）的携带纯合子TT可能是维吾尔族PBL易感的一个危险因素,可能会增加维吾尔族饲养鸽子者发生PBL的风险,需要增加样本量进一步验证。

维吾尔族饲鸽者肺外周血小窝蛋白-2甲基化分析

目的研究维吾尔族饲鸽者肺患者的外周血小窝蛋白(CAV)-2基因的甲基化状态,同时探讨CAV-2甲基化的意义。方法收集2015年4月1日至2016年12月31日新疆维吾尔自治区人民医院研究对象共60例,其中20例维吾尔族饲养鸽子后患病者为病例组;20例维吾尔族饲养鸽子但未患病者为病例对照组;20例未饲养鸽子的维吾尔族健康体检者为健康对照组。从留取的外周血标本中提取DNA,然后进行亚硫酸氢盐转化,随后行聚合酶链式反应(PCR)扩增、体外转录及RNase A特异性酶切,最后利用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术检测CAV-2的甲基化。结果检测CAV-2片段的CpG位点(CpG_1,CpG_2~4,CpG_5,CpG_6~8,CpG_9,CpG_10,CpG_11),实际检测到的CpG位点数(CpG_1,CpG_2~4,CpG_5,CpG_6~8,CpG_11),三组中各个位点的甲基化率分布比较差异无统计学意义(P>0.05);三组间各个位点甲基化率行两两比较,差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论CAV-2基因甲基化对维吾尔族饲鸽者肺的发病及肺纤维化过程有无影响有待进一步研究。

IL-10基因单核苷酸多态性与维吾尔族饲鸽者肺的研究

目的探讨IL-10基因单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）与新疆维吾尔族饲鸽者肺易感性的相关。方法根据纳入及排除标准总纳入92例，其中病例组32例，阴性对照组30例，正常对照组30例，对纳入者进行DNA提取，并在UCSC数据库选取IL-10的16个基因位点，采用Sequenom MassARRAY@ SNP分型技术对选取的位点进行基因分型比较。结果新疆维吾尔族人群rs1800893、rs1800896存在GG、GA、AA三种基因型，rs1800894存在GG、GA基因型，rs1800872存在CC、CA、AA基因型，rs3024500、rsl800871存在CC、CT、TT基因型；其基因型及等位基因分布频率在三组比较差异均无统计学意义（P〉0．05），rsl17106652、rs142726516、rs3024489、rs145922845、rs5743623、rs5743625、rs146520891、rs149143243、rsl50423829、rs41432052位点不存在基因多态性。结论IL-10基因多态性与维吾尔族PBL遗传易感性之间未发现统计学上的关联。

HLA-DRB5基因甲基化与维吾尔族饲鸽者肺相关性研究

目的:探讨HLA-DRB5基因甲基化与维吾尔族饲鸽者肺的相关性。方法:根据纳入及排除标准收集资料,总纳入60例,其中饲鸽者肺组20例、阴性对照组(饲鸽未患病组)20例及正常对照组(健康体检组)20例,对纳入者的全血标本进行DNA提取、亚硫酸氢盐转化、PCR扩增、体外转录和RNase A特异性酶切,并行基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术检测HLA-DRB5基因甲基化情况。结果:检测到HLA-DRB5片段的18个Cp G位点,Cp G1、Cp G2/3/4、Cp G5/6/7、Cp G8/9/10、Cp G11/12/13、Cp G14、Cp G16/17/18/19,各个位点在三组样本中的甲基化率比较差异不具有统计学意义(P>0.05);结论:未发现HLA-DRB5基因甲基化与维吾尔族饲鸽者肺之间存在关联。

ADAMS12基因甲基化与维吾尔族饲鸽者肺的发病关系

目的检测维吾尔族饲鸽者肺患者外周血中的ADAMS12基因甲基化状态,并探讨ADAMS12基因甲基化与维吾尔族饲鸽者肺发病的关系。方法以20例确诊维吾尔族饲鸽者肺患者为病例组,20例维吾尔族饲养鸽子未发病者与20例维吾尔族未饲养鸽子健康体检者为对照组。收集所有研究对象的资料并抽取外周血标本,常规提取DNA、亚硫酸氢盐转化、PCR扩增、体外转录和RNase A特异性酶切,并行基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析质谱技术检测ADAMS12甲基化情况。然后用SPSS 20.0统计软件进行统计学分析,比较3组研究对象ADAMS12甲基化率是否存在差异,然后3组间两两比较ADAMS12甲基化率是否存在差异。结果检测ADAMS12片段的CpG位点总数5个(CpG_1、CpG_2、CpG_3、CpG_4、CpG_5),5个位点在3组样本中的甲基化率分布差异无统计学意义(χ~2值分别为0.915、1.425、0.389、4.204、4.758,均P>0.05),5个位点在3组间两两比较甲基化率差异也无统计学意义(均P>0.017)。结论未发现ADAMS12基因甲基化与维吾尔族饲鸽者肺的发病有相关性。

TNF-α基因单核苷酸多态性与维吾尔族饲鸽者肺易感性的研究

目的 探讨肿瘤坏死因子α （tumor necrosis factor,TNF-α） rs1800629位点的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）与新疆维吾尔族饲鸽者肺遗传易感性的相关性.方法 采用Sequenom MassARRAY（R）SNP分型技术对32例饲鸽者肺患者、30例阴性对照组及30例例正常对照的TNF-α位点进行基因分型,应用SPSS 17.0软件进行统计分析,基因型及等位基因分布频率的比较采用x2检验;并计算相对风险度（odds ratio,OR）和95％可信区间（confidence interval,CI）.结果 rs1800629位点在新疆维吾尔族人群中存在GG、GA、AA三种基因型的分布频率及等位基因的分布频率在病例组、阴性对照组和正常对照组比较差异有统计学意义（χ2=9.636,P=0.020;χ2=11.538,P=0.003）病例组、阴性对照组与正常组比较差异有统计学意义（χ2=7.640,P=0.022;χ2=6.858,P=0.032）.结论 rs1800629位点多态性与维吾尔族PBL的遗传易感性有相关性,且长期频繁的暴露同一抗原下易患饲鸽者肺.

PBL患者检测BALF及血清中KL-6的临床意义

目的探讨检测饲鸽者肺(PBL)患者肺泡灌洗液(BALF)及血清涎液化糖链抗原-6(KL-6)水平的临床意义。方法选取2018年7月~2019年12月我院收治的PBL患者45例纳入病例组,选取同期收治的肺炎患者45例纳入肺炎组,另选同期收治的支气管炎患者45例纳入对照组。采用酶联免疫吸附法测定三组BALF及血清中KL-6水平,分析KL-6与PBL者肺功能指标的相关性,比较三组1秒用力呼气的容积占预计值的百分比(FEV1%)、肺活量预计值的百分比(FVC%)、一氧化碳弥散量占预计值的百分比(DLco%)。结果病例组BALF及血清中KL-6水平均高于肺炎组及对照组,FEV1%、FVC%、DLco%均低于肺炎组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson分析显示BALF及血清KL-6水平与FEV1%、FVC%、DLco%均呈负相关(P<0.05)。结论PBL患者BALF及血清KL-6水平越高,患者的肺功能越差,临床上应加强对该病患者BALF及血清KL-6水平的重视程度,并采取有效措施进行干预,以改善其肺功能。

鸽舍颗粒物对小鼠和鸽肺脏组织的影响

为了研究鸽舍颗粒物的浓度、组成、来源及其对动物肺脏及气管组织的影响,揭示舍内颗粒物对动物的危害,试验采用扫描电镜观察颗粒物形态,分析颗粒物主要成分和来源;通过X射线能量色散谱分析,检测颗粒物元素组成;以小鼠为哨兵动物,暴露于鸽舍中42 d,同时以饲养的白羽王鸽为研究对象,检查两种动物肺脏及气管的组织学变化。结果表明:鸽舍内细颗粒物(PM2.5)浓度远超国家空气质量一级标准,颗粒物主要来自鸽、饲料和粪便,主要成分是蛋白质,含有碳、氧、氮、硫、铝、氯、钠、钾8种含量较稳定的元素;暴露于高浓度颗粒物鸽舍会造成小鼠严重的肺部炎症,诱发成纤维细胞增生,导致肺组织纤维化,发生间质性肺炎,继发肺气肿,可能会造成阻塞性肺炎;长期暴露于鸽舍颗粒物中会造成鸽肺组织纤维化,支气管柱状纤毛上皮化生为鳞状上皮。