热休克蛋白70及pim-1基因在白血病骨髓单个核细胞的表达特点及临床意义

本研究观察热休克蛋白70(HSP70)基因/蛋白,pim-1基因在白血病患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中的表达,确定其表达是否与白血病类型、肿瘤负荷程度及预后有规律性联系。用RT-PCR技术检测40例白血病患者和10例对照BMMNC HSP70 mRNA及pim-1 mRNA的表达并半定量;用Western blot检测34例白血病患者和10例对照BMMNC HSP70蛋白表达并半定量,并结合白血病类型、肿瘤负荷程度及对治疗的反应进行分析。结果表明:白血病组与对照组BMMNC均存在HSP70 mRNA和蛋白表达,在白血病组显著高于对照组;CML组、AML组HSP70 mRNA/蛋白表达的平均ODR值均显著高于ALL组;肿瘤重度负荷的急性白血病患者组HSP70 mRNA/蛋白表达显著高于肿瘤轻度负荷组;白血病患者化疗后HSP70 mRNA/蛋白表达显著高于化疗前;白血病组及对照组BMMNC均表达pim-1mRNA,在白血病组显著高于对照组;ALL组pim-1 mRNA表达显著高于AML组和CML组;经相关性分析,白血病患者HSP70 mRNA表达与pim-1 mRNA表达成正相关(r=0.327,p<0.05)。结论:白血病患者BMMNC存在HSP70、pim-1高表达,其中pim-1 mRNA表达与HSP70 mRNA表达呈正相关,HSP70与pim-1基因/蛋白过表达亦与白血病肿瘤负荷程度有关。

PIM-1基因沉默对前列腺癌细胞生长抑制作用的研究

目的:探讨RNA干扰(RNAi)沉默PIM-1基因表达对前列腺癌细胞体外生长的影响。方法:将RNAi重组质粒(PPIM1-shRNA-3)经脂质体介导转染前列腺癌PC-3细胞,用G418筛选稳定转染、PIM-1基因沉默的PC-3细胞。用空质粒载体(pRNAT-U6.1/Neo)稳定转染的PC-3细胞和正常培养的PC-3细胞作为对照,进行体外研究。利用细胞计数法分别检测3组PC-3细胞的增殖能力。利用流式细胞技术分别检测3组PC-3细胞的细胞周期及凋亡情况。结果:与两对照组PC-3细胞相比,PIM-1基因沉默组的PC-3细胞在培养48、72和96h的细胞计数显著减少(P<0.01),细胞周期中G1期细胞的比例显著升高,而S期细胞的比例显著降低(P<0.01),发生早期凋亡的细胞比例明显升高(P<0.01)。结论:PIM-1基因沉默可以使得PC-3细胞的细胞周期进程受阻,抑制细胞增殖,并诱发细胞凋亡。PIM-1可以作为前列腺癌基因治疗的有效靶点,具有潜在的临床应用价值。

Pim-1基因表达与肿瘤相关性的研究进展

原癌基因Pim-1定位在第6号染色体长臂上(6p21.1～p21.31),其表达产物Pim-1蛋白激酶具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性。Pim-1可抑制细胞凋亡,与肿瘤的发生密切相关。在某些恶性肿瘤中存在Pim-1高表达,虽然Pim激酶家族在细胞增殖、分化、存活方面发挥重要作用,但要阐明Pim-1表达与肿瘤发生的相关性仍需进一步深入研究。

Pim-1基因在心血管疾病基础研究中的进展

原癌基因Pim-1具有高度保守性,其表达产物Pim-1蛋白激酶属于钙离子/钙调素依赖的蛋白激酶。Pim-1基因与细胞存活、增殖、分化及凋亡有关。Pim-1异常与多种人类肿瘤的临床进展有关。目前研究发现,Pim-1表达异常在心血管疾病发生、发展中亦起重要作用,该文就目前国内外关于Pim-1基因在心血管疾病中的研究进行综述,以期为心血管疾病的基础研究提供参考。

SiRNA沉默Pim-1基因转染MDA-MB231细胞情况对放疗敏感性的影响

目的使用SiRNA沉默Pim-1基因转染MDA-MB231细胞,分析转染情况对细胞活性及放疗敏感性的影响。方法使用SiRNA转染液对MDA-MB231细胞进行转染,采用Western blot法筛选,根据转染结果分为空白组(没有转染)、阴性组(转染后未测出MDA-MB231/siRNA序列)、阳性1组(转染后测出MDA-MB231/siRNA1序列)、阳性2组(转染后测出MDA-MB231/siRNA2序列)、阳性3组(转染后测出MDA-MB231/siRNA3序列),每组60孔。每组细胞又细分为3个小组,每个小组20孔板,分别接受3个梯度(2 mV、4 mV、8 mV)X线的单次照射。比较5组MDA-MB231细胞增殖率、凋亡率、放疗敏感性蛋白含量(p38、p-p38、Cleaved Caspase-3)的差异。结果5组MDA-MB231细胞增殖率和凋亡率差异均明显(P<0.05),两两比较,阳性1组、阳性2组、阳性3组与空白组(或阴性组)间差异有统计学意义(P<0.05);X线进行细胞照射的剂量越高,细胞增殖率越低(P<0.05)、凋亡率越高(P<0.05);3个阳性组分别与空白组(或阴性组)比较,p-p38、Cleaved Caspase-3蛋白表达含量的差异有统计学意义(P<0.05),阳性组细胞表达含量相对较高。结论SiRNA沉默Pim-1基因转染MDA-MB231细胞可降低细胞增殖率、提高细胞凋亡率,测出siRNA3序列的MDA-MB231细胞尤为明显;细胞放疗敏感性的差异可能与耐药蛋白的产生有关。

Pim-1在人宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:研究Pim-1基因及其蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达水平,探讨其与宫颈鳞癌临床特性之间的关系。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量方法和免疫组化学法,检测46例宫颈鳞癌组织和10例正常宫颈组织标本中Pim-1基因及蛋白的表达情况。结果:宫颈鳞癌组织中Pim-1基因与蛋白的表达水平明显高于宫颈正常组织(P<0.05);Pim-1蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达与组织学分级、临床分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论:原癌基因Pim-1及其蛋白在宫颈鳞癌组织中过度表达,可能与宫颈鳞癌的发生、发展有关。

Pim-1、RON在贲门癌中的表达及临床意义

目的:探讨Pim-1、RON在贲门癌组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化方法分别检测18例贲门正常组织、21例贲门肠上皮化生组织、56例贲门癌组织中Pim-1及RON两种蛋白的表达情况,并分析二者与贲门癌临床病理学特征的关系。结果:Pim-1、RON在贲门正常组织、贲门肠上皮化生组织及贲门癌组织中的阳性表达率分别为5.6%、38.1%、78.6%和11.1%、33.3%、66.1%,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。Pim-1的表达与浸润深度、淋巴结转移相关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤分化程度、TNM分期无关(P>0.05),RON的表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤分化程度无关(P>0.05)。二者在贲门癌中的表达无相关性(r=0.085,P>0.05)。结论:Pim-1及RON可能参与贲门癌的发生发展,对贲门癌的诊疗及预后判断具有一定的临床价值。

Pim-1在肿瘤及相关信号通路中的作用

原癌基因蛋白质c—pim-1（Pim-1）在肿瘤组织中常表达增高且与肿瘤分期、预后密切相关。研究表明，Pim-1不仅参与调控细胞增殖和凋亡，在肿瘤转移过程中也发挥重要作用。多个信号传导通路可以调控Pim-1表达与活化，同时Pim-1也可影响通路中多个重要因子，其在肿瘤发生发展中作用十分广泛，已成为肿瘤治疗的潜在靶点。

人卵巢上皮性癌组织中Pim-1与C-myc的表达及其临床意义

目的:探讨人卵巢上皮性癌组织中Pim-1和C-myc的表达及其临床意义。方法:采用RT-PCR半定量方法和免疫组织化学法检测40例卵巢上皮性癌组织、20例卵巢上皮性良性肿瘤组织和10例正常卵巢组织中Pim-1和C-myc mRNA及蛋白的表达情况。结果:卵巢上皮性癌组织中Pim-1和C-myc mRNA与蛋白的表达水平明显高于卵巢上皮性良性肿瘤组织及正常卵巢组织(P<0.05);Pim-1蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达与其组织学类型无关(P>0.05),与国际妇产科联盟(Federation International of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期和淋巴结转移有关(P<0.05);C-myc蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达与其组织学类型、FIGO分期和淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论:原癌基因Pim-1和C-myc的mRNA及蛋白在卵巢上皮性癌组织中过度表达,可能与卵巢上皮性癌的发生、发展有关。

PIM-1蛋白激酶在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨PIM-1蛋白激酶在乳腺癌组织、乳腺非典型增生组织及正常乳腺组织中的表达及生物学意义。方法利用免疫组织化学、Westernblot方法检测乳腺癌组织、乳腺非典型增生组织和正常乳腺组织中P1M-1蛋白激酶的表达水平。结果乳腺癌组织、乳腺非典型增生组织和正常乳腺组织中PIM-1蛋白激酶的阳性表达率分别为78．75％（63／80）、42．00％（21／50）、23．33％（7／30）；乳腺癌组织中PIM-1的蛋白水平明显高于癌旁正常乳腺组织（灰度值：118．807±19．99VS103．062±13．51，t=8．578，P〈0．05）；PIM-1蛋白激酶的表达与乳腺癌的P-TNM分期和淋巴结转移密切相关（P：0．004，P=0．003），与年龄和肿块大小无关（P=0．654，P=0．084）。结论PIM-1在乳腺癌中表达阳性率明显高于非典型增生的乳腺组织和正常乳腺组织，PIM-1可能是乳腺癌形成过程中的早期分子事件，其表达增强与乳腺癌的浸润性发展密切相关，有可能成为新的早期筛查和判断乳腺癌生物学行为的诊断指标。利用石蜡标本检测指标是可行的，具有方便，易得，经济的特点。