小麦硬度主效基因Pina和Pinb的克隆和序列分析

籽粒硬度是小麦品质改良的重要目标性状。根据已报道的谷类作物中硬度主效基因 Pina和 Pinb的 DNA序列 ,设计了两对简并引物 ,以我国软质小麦品种京 4 11基因组 DNA为模板 ,进行 PCR扩增 ,分别获得了约 4 5 0 bp的Pina和 Pinb基因的全长特异性片段。将其克隆到 p GEM- 3Zf(+)上 ,重组子和酶切鉴定正确后 ,进行序列测定和分析。结果表明 ,与国外已克隆的软质小麦 Heron中 Pina基因相比较 ,京 4 11中 Pina与其核苷酸同源性为 98.9% ,氨基酸的同源性为 98% ,其全长为 4 4 7bp,编码 14 9个氨基酸残基 ,具有谷类作物中 Pina所特有 19个氨基酸的信号肽序列和 WWKWWK的色氨酸结构域。同样 ,与国外已克隆的软质小麦 Heron中 Pinb基因相比较 ,京 4 11中 Pinb与其核苷酸同源性为 99.8% ,氨基酸的同源性为 99.3% ,其全长为 4 4 7bp,编码 14 9个氨基酸残基 ,具有谷类作物中 Pinb所特有 19个氨基酸的信号肽序列和 KWWK的色氨酸结构域。硬度主效基因的分离克隆为进行我国小麦品种硬度的基因工程改良奠定了基础。

Pina和Pinb融合基因表达载体的构建及其在硬粒小麦中的转化

【目的】构建Pina、Pinb融合基因表达载体,验证Pina和Pinb基因的功能,为利用转基因技术改良小麦籽粒质地提供理论依据和基础材料。【方法】以软质小麦京411作为Pina和Pinb基因的供体,将Pina、Pinb基因融合后,与基础质粒pG4AB上的Ω和poly(A)等增强基因表达的调控序列及pAHC25上的Ubiqutin启动子和bar基因表达盒相连接,构建Pina、Pinb融合基因植物高效表达载体。利用基因枪转化硬粒小麦幼胚,并对硬粒小麦幼胚再生体系进行探索。【结果】在构建完成Pina、Pinb融合基因植物高效表达载体pFUBPaPb的基础上,转化硬粒小麦幼胚16000多枚,经biolaphos筛选、PCR鉴定和斑点杂交鉴定,得到再生植株2390株,35株为阳性植株。共得到T1代籽粒356粒,对种子量较多的16个单株籽粒进行蛋白表达分析,有2株检测到基因表达产物,其籽粒SKCS硬度值比受体品种分别降低了10和12。培养基SD2适于硬粒小麦幼胚愈伤组织的诱导,MS+8mg·L-1玉米素可获得较为理想的再生频率。【结论】Pina和Pinb的共同表达降低了硬粒小麦籽粒硬度,具有软化籽粒质地的功能。

CIMMYT新型人工合成小麦Pina和Pinb基因等位变异

八倍体人工合成小麦由硬粒小麦（Triticum turgidum subsp．durum）与粗山羊草（Aegilops tauschii Coss．）杂交产生，是研究小麦进化过程中基因变异的重要材料。以国际玉米小麦改良中心（CIMMYT）提供的57份由野生二粒小麦（T．turgidum subsp．dicoccoides）与粗山羊草杂交产生的新型人工合成六倍体小麦为材料，用单籽粒特性测定仪和Pina、Pinb特异性PCR引物对其籽粒硬度变异以及控制籽粒硬度的主效基因Pina和Pinb的分布情况进行了研究。结果表明，这些材料的SKCS硬度值变异较大，从10．5到42．6，其中15-30的占78％。共有Pina-Dla、Pina-Dlc、Pinb-Dlh和Pinb-Dlj4种等位变异型，基因型为Pina-Dla／Pinb-Dlj的8个，占14％；基因型为Pina-Dlc／Pinb-Dlh的49个，占86％。方差分析表明，基因型Pina-Dla／Pinb-Dlj与Pina-Dlc／Pinb-Dlh对籽粒硬度的影响差异不显著，但父本粗山羊草和母本野牛二粒小麦以及二者间的互作对籽粒硬度有显著影响，说明除Pina和Pinb外，还有其他微效基因影响籽粒硬度的形成。

概率性输入，噪音“与”门(PINA)模型

当前认知诊断测验的主要目的是对被试进行合理分类,进而采用类别变量去描述被试对某技能或知识(即认知属性)的掌握情况,但该粗糙的分类方法不能精细地区分不同被试之间的差异。对此,采用掌握概率这一连续变量去描述被试对某认知属性的掌握情况是一种值得尝试的做法。本文首先基于高阶潜在特质(简称"潜质")模型给出了认知属性掌握概率的量化定义,之后与多成分潜质模型相结合提出了概率性输入,噪音"与"门(PINA)模型;其次,采用MCMC算法实现了对PINA的参数估计,结果表明参数估计程序对各参数的估计返真性均较好;最后,以ECPE数据为例来说明PINA在实际测验分析中具有可行性。

Pina^m-Pinb^m-Gsp^m串联三基因表达载体的构建及其在普通小麦中的转化

籽粒硬度是小麦品质改良的重要目标性状之一,主要由5D短臂上的Hardness(Ha)位点的两个主效基因,即Puroindoline a(Pina-D1)和Puroindoline b(Pinb-D1)控制,同时受基因Grain Softness Protein-1(Gsp-1)的影响。本研究以一粒小麦(T.monococcum)DV92作为Pinam、Pinbm和Gspm基因的供体,将三基因各自完整的表达盒串联连接到载体pGEM-TEasy上,构建Pinam-Pinbm-Gspm三基因串联的表达载体。利用基因枪介导的转化方法转化普通小麦科农199幼胚,共轰击5608个小麦幼胚愈伤,经Biolaphos(化学除草剂)筛选,获得933株再生植株,经PCR检测,鉴定出11株阳性植株,有关转基因小麦的籽粒硬度还需进一步实验验证;本实验实现了串联三基因在普通小麦中的遗传转化,为利用基因枪介导的遗传转化方法改善小麦籽粒硬度提供了可行性。

小麦籽粒硬度蛋白PINA和PINB的电泳分离方法比较

试验以4个硬度不同的小麦品种为材料,采用单籽粒蛋白提取法分离了Puroindoline蛋白,并进一步通过改进的SDS-PAGE和A-PAGE方法对Puroindoline a(PINA)和Puroindoline b(PINB)蛋白进行分离。结果表明,A-PAGE的分离效果要远好于SDS-PAGE,不仅能更好地将两个蛋白分开,且具有省时、省力、操作简便等优点。

奢侈品入侵自行车业,LV与Pina的那些事

1987年,Arnault将轩尼诗与路易威登合并成立了著名高端精品集团——LVMH集团,全称Louis Vuitton Mo？t Hennessy（酩悦轩尼诗·路易威登）,业务涵盖酒品、时装、皮具、香水、化妆品、钟表、珠宝以及精品零售。

身体视阈下的舞蹈剧场研究--以皮娜·鲍什的《交际场》和王玫的《雷和雨》为例

身体视阈下的舞蹈剧场不再是“沉默的身体动作”,而是“身体的言说”和“声音的言说”在此互为交织,从而形成一个新的整体。在《交际场》和《雷和雨》中,皮娜·鲍什和王玫都运用了身体的空间并置技术,都为着同一主题服务。作品打破了舞蹈即美的传统,拓宽了舞蹈的艺术边界。寻找新的身体呈现方式、表达“具身性”和“文化性”的身体诉求成为皮娜·鲍什和王玫舞蹈剧场作品的主要特征。

小麦puroindoline及其相关基因分子遗传基础研究进展

籽粒硬度是重要的小麦品质性状之一,对小麦的磨粉品质和加工品质有重要影响。控制籽粒硬度的主效基因puroindoline位于5D染色体的短臂上,可分为Pina和Pinb2种类型。Pina和Pinb紧密连锁,编码区均为447个碱基,没有内含子,共同形成小麦籽粒硬度的分子遗传基础。目前,普通小麦和山羊草中均已发现多种puroindoline变异类型,其中引起小麦籽粒硬度大幅度升高的Pina-D1b类型的分子机制为从编码区第23个碱基开始缺失15380个碱基。Puroindoline除了对小麦籽粒硬度有重要影响之外,对其它品质性状也有重要影响,不同puroindoline变异类型之间小麦品质具有一定差异。另外,与puroindoline紧密连锁的Gsp-1基因变异类型更为丰富,但对籽粒硬度没有明显的调节作用。最近发现的与puroindolineb高度同源的基因Pinb-2v具有4种类型,分别位于小麦7A、7B和7D染色体上,可能对籽粒硬度具有微效的调节作用。本文通过对puroindoline的分子特征和突变类型以及相关功能进行分析和总结,旨在为中国小麦品质的基因工程改良提供参考。

山东小麦籽粒硬度演变规律研究

利用单籽粒谷物特性测试仪和PCR扩增、酶切及DNA测序技术,结合改良的friabilin提取及电泳分析方法,对山东省431份农家品种、63份历史品种和29份当前主栽品种的籽粒硬度分布以及Pina和Pinb等位变异类型进行研究,以探讨山东小麦籽粒硬度的演变规律。农家品种、历史品种和当前主栽品种中硬质麦比例分别为75.6%、12.7%和27.6%,混合麦分别占20.4%、19.0%和13.8%,而软质麦分别占3.9%、68.3%和58.6%。农家品种中共有6种基因型,Pina-D1b/Pinb-D1a和Pina-D1a/Pinb-D1p分别占硬质麦的38%和59.6%。历史品种中有4种基因型,8份硬质麦中Pina-D1b/Pinb-D1a占37.5%,Pina-D1a/Pinb-D1b占37.5%,而Pina-D1a/Pinb-D1p只占25.0%。当前主栽品种中,8份硬质麦全部是Pina-D1a/Pinb-D1b类型。长芒透垅白等3个品种的Pinb基因的核苷酸序列发生了双突变,起始密码子下游96bp处碱基C突变为A,而且在265bp处发生了A碱基的缺失,将其命名为Pinb-D1aa。

俄罗斯小麦籽粒硬度及puroindoline基因等位变异的分布

小麦籽粒硬度是重要的品质性状之一,对小麦加工品质具有重要影响。为了合理引进种质资源,培育高品质小麦品种,本研究利用小麦硬度指数测定仪JYDB100×40对引进俄罗斯小麦品种的籽粒硬度进行检测,利用STS标记和变温PCR对控制籽粒硬度基因puroindoline的主要等位变异进行分析。结果显示：208个俄罗斯引进小麦品种硬度指数范围为45.6~79.2,硬质麦品种为190个（91.35%）,混合麦品种为18个（8.65%）。Pina基因有Pina-D1a、Pina-D1b和杂合Pina-D1a/Pina-D1b共3种类型,所占比例分别为87.02%、10.10%和2.88%。Pinb基因有Pinb-D1a、Pina-D1b、Pinb-D1c和双位点突变Pinb-D1bc 4种类型,所占比例分别为37.02%、55.77%、3.85%和3.37%。统计结果显示：携带PinaD1b＋Pinb-D1a基因小麦籽粒硬度指数显著大于Pina-D1a＋Pinb-D1b,Pina-D1a＋Pinb-D1a和PinaD1a＋Pinb-D1bc。其他puroindoline等位变异之间没有显著差异。俄罗斯硬质麦种质资源丰富,是改善我国小麦籽粒硬度和品质的重要遗传材料。

皮娜·鲍什舞蹈剧场中的身体语言及文化逻辑

皮娜·鲍什是非常受欢迎的德国现代舞蹈家。她带领的乌珀塔尔舞蹈剧场是德国重要的文化窗口,也是当代三大新舞蹈流派之一。每当人们提及皮娜舞蹈剧场中日常行为、语言等非技术化的肢体语言时,都会引起一番争论。有的人认为舞蹈剧场作为一种以肢体为主要表现手段的舞蹈形式,虽然增加了台词等表现形式,但还是属于舞蹈的范畴;有的人认为日常化肢体语言和台词的加入,使舞蹈剧场更接近于传统的戏剧,让舞蹈剧场看起来更像是一种从舞蹈走向戏剧的综合性艺术形式。因此,本文试图从皮娜·鲍什舞蹈剧场中的肢体语言入手,考察和分析其肢体语言的独特性与生产机制,以及隐藏在身体语言背后的文化逻辑。

脑源性神经营养因子相互作用蛋白质间的相互作用网络及功能

目的探讨与脑源性神经营养因子(BDNF)相互作用蛋白质间的相互作用网络并分析其功能。方法利用在线蛋白质间相互作用的数据库PINA和SRING获得与BDNF相互作用的蛋白质,构建其相互作用的网络,并利用基因本体(GO)和KEGG分析这些蛋白质的功能。结果 PINA和SRING数据库显示与BDNF相互作用的蛋白质有22个;GO分析显示这些蛋白主要具有神经营养因子和受体活性,主要参与神经元轴突生成、调节细胞增殖和凋亡;KEGG结果显示BDNF主要通过神经营养因子信号通路、MAPK信号通路及血管内皮生长因子(VEGF)信号通路发挥功能。结论 BDNF及其相互作用蛋白主要通过神经营养因子信号通路、MAPK信号通路及VEGF信号通路参与调节神经元增殖、凋亡及轴突生成。

熊用益胆素对无管取胆的熊胆粉产量与质量的影响

选用 9头胆汁产量稳定、体况相近的无管取胆黑熊 ,随机分成 3组添加含天然绿色饲料添加剂 0 .5 %组 (试验Ⅰ组 )和添加德国的PINA T饲料添加剂 0 .5 %组 (试验Ⅱ组 )及空白组 (对照组 )试验。结果表明 ,试验Ⅰ组胆汁产量、干粉率、干粉量有极显著提高 (P <0 .0 1) ,而试验Ⅱ组无显著提高 (P >0 .0 5 )。Ⅰ、Ⅱ组粗脂肪的消化率比对照组分别提高 2 .15 %和 4 4 .92 % (P >0 .0 5 )。熊胆粉分析结果表明 ,试验Ⅰ、Ⅱ组及对照组UDCA含量无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,但高效液相色谱分析图谱中UDCA所占峰面积比例试验Ⅰ、Ⅱ组分别比对照组提高 2 9.6 5 %和 14 .6 2 % ,同时CDCA所占峰面积比例试验Ⅰ、Ⅱ组分别比对照组提高 34.5 0 %和7.0 9%。熊胆粉氨基酸分析结果表明 ,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组及对照组氨基酸含量无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;但试验Ⅰ组除天门冬氨基酸外其余均有提高 ,但差异不显著 ;

我国南部麦区小麦硬度基因多态性初步分析

籽粒硬度是小麦重要的加工品质性状,直接影响磨粉品质和食品加工品质。决定籽粒硬度的蛋白是分子量为15kD的Friabilin蛋白,由多种成分组成,其主要成分是两种富含色氨酸(Trp)的蛋白质Puroindoline a和Puroindoline b(Pi-na和Pinb),分别由位于5DS染色体Hardness(Ha)位点的基因Pina和Pinb编码。本研究选取了我国长江流域和黄淮麦区南部、西南麦区和南方冬麦区104份小麦品种,分别用Pina和Pinb特异的引物通过PCR分子检测基因的有无和长度的多态性。结果表明,在检测的104种小麦中,有6个品种无Pina目标条带,7个品种无Pinb条带,12个品种既无Pi-na也无Pinb,属于双缺失类型。本实验条件下,无论Pina还是Pinb,PCR产物长度均无明显变化。推测,大多数硬质小麦均是由Pina或Pinb基因的单核苷酸变化、较小的插入或缺失突变引起的。本研究为进一步筛查Pina和Pinb基因突变奠定了基础。

中性内肽酶相互作用蛋白质的功能

目的分析与中性内肽酶(NEP)相互作用的蛋白质的功能。方法利用在线蛋白质间相互作用的数据库PINA2获得与NEP相互作用的蛋白质,并利用基因本体(GO)和KEGG分析这些蛋白质的功能。结果 PINA2数据库显示与NEP相互作用的蛋白质有176个;GO分析显示这些蛋白质分布于细胞内的各个区域,一部分可以分泌出细胞发挥作用,可以与蛋白、核酸及酶类结合,参与细胞内蛋白质定位、多肽和RNA降解、大分子代谢及血管紧张素成熟。KEGG信号通路结果显示NEP相结合蛋白参与帕金森病、阿尔茨海默病等疾病过程,还参与蛋白降解及吞噬过程。结论 NEP及其相互作用蛋白可以通过调节蛋白定位和大分子降解参与帕金森病及阿尔茨海默病的疾病过程,并且一部分可以分泌到细胞外,为帕金森病和阿尔茨海默病的诊断和治疗提供潜在靶点。

小麦籽粒硬度及其分子遗传基础研究回顾与展望

籽粒硬度是最重要的小麦品质性状之一,是市场分级和定价的重要依据。随着硬度测试方法的日趋完善,其分子遗传基础的研究逐步加快。硬度主要受位于5D染色体短臂上一个主效基因和多个微效基因控制,Pina和Pinb是形成小麦籽粒硬度的基础。PINA蛋白的缺失或编码PINB蛋白的基因突变均造成小麦胚乳质地变硬。中国目前该项研究较少,与国外相比仍有很大差距,本文着重阐述了小麦胚乳结构及硬度的生化和遗传基础,旨在为我国小麦籽粒硬度的研究提供理论依据。

陕西历代小麦品种籽粒硬度演变规律研究

利用单籽粒谷物特性测试仪和PCR扩增方法对170余份陕西省历代和当代主要小麦品种(系)的籽粒硬度及基因Pina和Pinb等位变异进行了研究,以揭示陕西省小麦品种换代过程中籽粒硬度的演变规律。其中,历代品种(系)材料51份,硬质麦占39.22%,混合麦占60.78%;Pina-D1b等位基因类型为9.80%,Pinb-D1b等位变异类型为47.06%;当代小麦品种(系)119份,硬质麦占38.66%,混合麦占61.34%;Pina-D1b等位变异类型为17.65%,Pinb-D1b等位变异类型为39.50%;Pina基因所占比例为14.29%,Pinb基因所占比例为63.03%;陕西省历代小麦品种硬度平均数呈先降后升趋势,总体呈现逐渐上升。

中国发现寄生高山毛顶蛾的毛顶蛾邻凹姬蜂(膜翅目:姬蜂科)

报道采自青海寄生高山毛顶蛾Eriocrania semipurpurella alpine Xu,1990(寄主新记录)的姬蜂科中国一新纪录种:毛顶蛾邻凹姬蜂Lathrolestes clypeatus eriocraniae Seyrig,1928,介绍其分布;简介属的主要鉴别特征;对形态特征进行详细描述,提供彩色整体图和部分特征图。

神奇竹乐(三)——蔚为壮观的竹管风琴

马尼拉市郊las Pinas镇教堂里宏伟的竹管风琴 在菲律宾首都马尼拉郊区一个名叫Las Pinas镇的教堂里,耸立着一个世界最大的竹乐器--世界罕有的竹管风琴.这个竹乐器家族中的巨人高达14公尺,若与长度仅4～6厘米的口笛相比,真是相差几百上千倍.站在这个庞然大物面前,你会不由得惊叹竹乐家族的"人丁兴旺,种类繁多".