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Pina和Pinb融合基因表达载体的构建及其在硬粒小麦中的转化
被引量:
11
1
作者
李根英
夏兰芹
+1 位作者
夏先春
何中虎
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期1315-1323,共9页
【目的】构建Pina、Pinb融合基因表达载体,验证Pina和Pinb基因的功能,为利用转基因技术改良小麦籽粒质地提供理论依据和基础材料。【方法】以软质小麦京411作为Pina和Pinb基因的供体,将Pina、Pinb基因融合后,与基础质粒pG4AB上的Ω和pol...
【目的】构建Pina、Pinb融合基因表达载体,验证Pina和Pinb基因的功能,为利用转基因技术改良小麦籽粒质地提供理论依据和基础材料。【方法】以软质小麦京411作为Pina和Pinb基因的供体,将Pina、Pinb基因融合后,与基础质粒pG4AB上的Ω和poly(A)等增强基因表达的调控序列及pAHC25上的Ubiqutin启动子和bar基因表达盒相连接,构建Pina、Pinb融合基因植物高效表达载体。利用基因枪转化硬粒小麦幼胚,并对硬粒小麦幼胚再生体系进行探索。【结果】在构建完成Pina、Pinb融合基因植物高效表达载体pFUBPaPb的基础上,转化硬粒小麦幼胚16000多枚,经biolaphos筛选、PCR鉴定和斑点杂交鉴定,得到再生植株2390株,35株为阳性植株。共得到T1代籽粒356粒,对种子量较多的16个单株籽粒进行蛋白表达分析,有2株检测到基因表达产物,其籽粒SKCS硬度值比受体品种分别降低了10和12。培养基SD2适于硬粒小麦幼胚愈伤组织的诱导,MS+8mg·L-1玉米素可获得较为理想的再生频率。【结论】Pina和Pinb的共同表达降低了硬粒小麦籽粒硬度,具有软化籽粒质地的功能。
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关键词
pina
和
pinb
基因融合表达载体
硬粒小麦
幼胚培养
基因转化
下载PDF
职称材料
Pina^m-Pinb^m-Gsp^m串联三基因表达载体的构建及其在普通小麦中的转化
2
作者
于海燕
马信
+5 位作者
侯文倩
高青峰
薄存瑶
孙鑫
谢兵
孔令让
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期140-146,共7页
籽粒硬度是小麦品质改良的重要目标性状之一,主要由5D短臂上的Hardness(Ha)位点的两个主效基因,即Puroindoline a(Pina-D1)和Puroindoline b(Pinb-D1)控制,同时受基因Grain Softness Protein-1(Gsp-1)的影响。本研究以一粒小麦(T.monoco...
籽粒硬度是小麦品质改良的重要目标性状之一,主要由5D短臂上的Hardness(Ha)位点的两个主效基因,即Puroindoline a(Pina-D1)和Puroindoline b(Pinb-D1)控制,同时受基因Grain Softness Protein-1(Gsp-1)的影响。本研究以一粒小麦(T.monococcum)DV92作为Pinam、Pinbm和Gspm基因的供体,将三基因各自完整的表达盒串联连接到载体pGEM-TEasy上,构建Pinam-Pinbm-Gspm三基因串联的表达载体。利用基因枪介导的转化方法转化普通小麦科农199幼胚,共轰击5608个小麦幼胚愈伤,经Biolaphos(化学除草剂)筛选,获得933株再生植株,经PCR检测,鉴定出11株阳性植株,有关转基因小麦的籽粒硬度还需进一步实验验证;本实验实现了串联三基因在普通小麦中的遗传转化,为利用基因枪介导的遗传转化方法改善小麦籽粒硬度提供了可行性。
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关键词
普通小麦
PUROINDOLINE
a(
pina
-D1)
PUROINDOLINE
b(
pinb
-D1)
Grain
SOFTNESS
Protein-1(Gsp-1)
pina
m-
pinb
m-Gspm串联表达载体
幼胚遗传转化
下载PDF
职称材料
题名
Pina和Pinb融合基因表达载体的构建及其在硬粒小麦中的转化
被引量:
11
1
作者
李根英
夏兰芹
夏先春
何中虎
机构
中国农业科学院作物科学研究所国家小麦改良中心/国家基因资源与遗传改良重大科学工程
出处
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期1315-1323,共9页
基金
山东省泰山学者资助项目
国家重点基础研究发展计划("973"计划)(2002CB111300)
引进国际先进农业科学技术计划("948"计划)重大国际合作项目
文摘
【目的】构建Pina、Pinb融合基因表达载体,验证Pina和Pinb基因的功能,为利用转基因技术改良小麦籽粒质地提供理论依据和基础材料。【方法】以软质小麦京411作为Pina和Pinb基因的供体,将Pina、Pinb基因融合后,与基础质粒pG4AB上的Ω和poly(A)等增强基因表达的调控序列及pAHC25上的Ubiqutin启动子和bar基因表达盒相连接,构建Pina、Pinb融合基因植物高效表达载体。利用基因枪转化硬粒小麦幼胚,并对硬粒小麦幼胚再生体系进行探索。【结果】在构建完成Pina、Pinb融合基因植物高效表达载体pFUBPaPb的基础上,转化硬粒小麦幼胚16000多枚,经biolaphos筛选、PCR鉴定和斑点杂交鉴定,得到再生植株2390株,35株为阳性植株。共得到T1代籽粒356粒,对种子量较多的16个单株籽粒进行蛋白表达分析,有2株检测到基因表达产物,其籽粒SKCS硬度值比受体品种分别降低了10和12。培养基SD2适于硬粒小麦幼胚愈伤组织的诱导,MS+8mg·L-1玉米素可获得较为理想的再生频率。【结论】Pina和Pinb的共同表达降低了硬粒小麦籽粒硬度,具有软化籽粒质地的功能。
关键词
pina
和
pinb
基因融合表达载体
硬粒小麦
幼胚培养
基因转化
Keywords
pina &pinb fused expression vector
Durum wheat
Immature embryo culture
Transformation
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
Pina^m-Pinb^m-Gsp^m串联三基因表达载体的构建及其在普通小麦中的转化
2
作者
于海燕
马信
侯文倩
高青峰
薄存瑶
孙鑫
谢兵
孔令让
机构
山东农业大学农学院
出处
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期140-146,共7页
基金
国家转基因重大专项课题(2011ZX08002-004)资助
文摘
籽粒硬度是小麦品质改良的重要目标性状之一,主要由5D短臂上的Hardness(Ha)位点的两个主效基因,即Puroindoline a(Pina-D1)和Puroindoline b(Pinb-D1)控制,同时受基因Grain Softness Protein-1(Gsp-1)的影响。本研究以一粒小麦(T.monococcum)DV92作为Pinam、Pinbm和Gspm基因的供体,将三基因各自完整的表达盒串联连接到载体pGEM-TEasy上,构建Pinam-Pinbm-Gspm三基因串联的表达载体。利用基因枪介导的转化方法转化普通小麦科农199幼胚,共轰击5608个小麦幼胚愈伤,经Biolaphos(化学除草剂)筛选,获得933株再生植株,经PCR检测,鉴定出11株阳性植株,有关转基因小麦的籽粒硬度还需进一步实验验证;本实验实现了串联三基因在普通小麦中的遗传转化,为利用基因枪介导的遗传转化方法改善小麦籽粒硬度提供了可行性。
关键词
普通小麦
PUROINDOLINE
a(
pina
-D1)
PUROINDOLINE
b(
pinb
-D1)
Grain
SOFTNESS
Protein-1(Gsp-1)
pina
m-
pinb
m-Gspm串联表达载体
幼胚遗传转化
Keywords
Common wheat, Puroindoline a (
pina
-D1), Puroindoline b (
pinb
-D1), Grain Softness Protein-1 ( Gsp-1),
expression
vector
harboring tandem genes of
pina
^m-
pinb
^m-Gsp^m, Immature embryo transformation
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Pina和Pinb融合基因表达载体的构建及其在硬粒小麦中的转化
李根英
夏兰芹
夏先春
何中虎
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007
11
下载PDF
职称材料
2
Pina^m-Pinb^m-Gsp^m串联三基因表达载体的构建及其在普通小麦中的转化
于海燕
马信
侯文倩
高青峰
薄存瑶
孙鑫
谢兵
孔令让
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
下载PDF
职称材料
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