近交对马氏珠母贝生长性状、遗传多样性及矿化基因表达的影响

【目的】探讨近交对马氏珠母贝生长性状、遗传结构及矿化基因表达的影响,阐明近交引起子一代性状退化的遗传原理,为贝类品种培育提供参考依据。【方法】以两个黄壳色全同胞家系(M和N)为亲本,按照因子设计构建4个家系组合(F1:M1♀×M1♂;F2:M1♀×N1♂;F3:N1♀×M1♂;F4:N1♀×N1♂),比较4个家系成贝生长性状差异,利用9对SSR引物分析其遗传多样性,并以实时荧光定量PCR检测家系间矿化基因nacrein、pearlin和pif177的表达差异。【结果】4个家系间的平均壳长、平均壳高、平均壳宽、平均体重和平均壳重存在明显差异,且近交家系(F1和F4)的平均壳长、平均壳高、平均壳宽、平均体重和平均壳重均小于杂交家系(F2和F3),其生长性状退化率(ID)为11.7%~29.4%。家系F1、F2、F3和F4的平均观测杂合度分别为0.2525、0.3116、0.3178和0.2752,平均期望杂合度分别为0.3451、0.3822、0.4005和0.3549,平均多态信息含量(PIC)分别为0.4591、0.5389、0.4878和0.4810。杂交家系(F2和F3)矿化基因nacrein、pearlin和pif177的相对表达量均高于近交家系(F1和F4),且4个家系的生长性状平均值与3个矿化基因的相对表达量存在明显正相关。【结论】近交能导致马氏珠母贝生长性状、遗传多样性及矿化基因表达量明显降低,因此制定马氏珠母贝育种方案时应构建合理的交配组合系统,防止因近交导致性状退化与遗传多样性指标降低而影响育种进程。

马氏珠母贝肉酶解条件优化及其产物活性分析

【目的】优化超声波辅助酶解马氏珠母贝肉工艺条件,并对酶解产物进行自由基清除活性分析,为马氏珠母贝肉的高值化利用提供参考依据。【方法】以马氏珠母贝肉为原料,采用单因素及响应面试验分析酶解温度、加酶量、超声功率和酶解时间对珠母贝肉蛋白质水解度的影响,确定最佳工艺参数,并测定酶解产物对羟基自由基(·OH)、超氧自由基()及DPPH自由基(DPPH·)的清除能力。【结果】影响马氏珠母贝肉酶解效果的4个因素主次顺序为:超声波功率>加酶量>酶解温度>酶解时间,其中酶解温度、加酶量和超声波功率影响极显著(P<0.01),酶解时间及加酶量与超声波功率的交互作用影响显著(P<0.05)。马氏珠母贝肉最佳超声波辅助酶解条件为:酶解温度48℃、加酶量2200 U/g、超声波功率13%(总输出功率900 W)、酶解时间12 min,在此条件下的蛋白质水解度为21.937%,与预测值(22.140%)的相对误差为0.92%。酶解产物对·OH、和DPPH·的清除能力随酶解产物质量浓度的增加而增强,当质量浓度为2.0 mg/m L时,清除率分别为68.85%、83.62%和82.36%。【结论】优化得到的超声波辅助酶解马氏珠母贝肉工艺参数准确可靠,酶解时间显著缩短,酶解产物具有明显的清除自由基活性,可作为具有抗氧化作用的保健食品、保健酒等产品的优质原料。

马氏珠母贝金黄壳色选育群体与养殖群体血清免疫酶活力比较

为了给金黄壳色选育群体与性状评价提供参考,本研究从金黄壳色选育群体与对照养殖群体取样进行植核育珠,植核手术后第7天与第30天,比较2个群体成活率与留核率差异,同时比较了植核手术后第7天2个群体血清免疫酶活力差异。结果表明:植核后第7天与第30天,金黄壳色选育群体的留核率与成活率显著大于养殖群体(P<0.05);植核前与植核后第7天,金黄壳色选育群体碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、溶菌酶、亮氨酸氨基肽酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化氢酶、酚氧化酶显著大于养殖群体(P<0.05);金黄壳色选育群体的过氧化氢酶活力大于养殖群体,但2个群体的差异不显著(P>0.05);金黄壳色选育群体的丙二醛的含量均小于养殖群体。因此休养期间金黄壳色选育群体的育珠性状优于大于对照养殖群体。

马氏珠母贝细胞周期分裂基因CDC45基因特征、表达量与性状相关分析

采用RACE技术克隆了马氏珠母贝细胞周期分裂基因45(Pm-CDC45)全长序列,利用荧光定量PCR检测该基因在闭壳肌、鳃、性腺与外套膜组织的表达量,并估计基因表达量与金黄壳色第3代选育群体壳高性状的相关性。结果表明:Pm-CDC45基因序列全长为2 091 bp,5′非编码区(5′UTR)为157 bp,3′非编码区(3′UTR)为34 bp,其中开放阅读框为1 967 bp,编码655个氨基酸;Pm-CDC45在各组织的相对表达量存在显著差异(P<0.05),其中闭壳肌表达量最高,鳃和性腺为其次,外套膜最低;Pm-CDC45基因相对表达量与选育群体壳高性状与存在显著的正相关(r=0.531,P<0.05);马氏珠母贝Pm-CDC45为影响壳高性状基因。

几种抗生素和手术季节对马氏珠母贝育珠贝成活率、留核率和商品珠率的影响

为了提高马氏珠母贝珍珠培养的效益,比较几种抗生素和手术季节对马氏珠母贝育珠贝成活率、留核率和商品珠率的影响。实验1,使用浓度500、1000和1500 mg/L头孢克肟、四环素、阿奇霉素和罗红霉素对手术工具、珠核和移植小片进行消毒处理;实验2,在春季(4月)、夏季(6月)和秋季(10月)进行植核手术。结果是,抗生素的浓度对育珠贝的成活率具有显著影响(P<0.05),1500 mg/L抗生素处理组的育珠贝成活率最高,500 mg/L最低,抗生素种类和浓度对育珠贝成活率无显著交互作用;抗生素的种类和浓度对育珠贝留核率具有显著影响(P<0.05),抗生素种类和浓度对育珠贝留核率存在显著交互效应,1000 mg/L头孢克肟组、1500 mg/L四环素组和1500 mg/L阿奇霉素组育珠贝留核率显著高于其它处理组;抗生素种类和浓度对育珠贝商品珠率存在显著影响(P<0.05),抗生素种类和浓度之间无显著交互效应。手术季节对育珠贝留核率和商品珠率无显著影响(P>0.05),但对育珠贝成活率具有显著影响(P<0.05),秋季(10月)植核的育珠贝成活率最高,夏季(6月)植核的育珠贝成活率最低。