半夏块茎腐烂病研究进展

半夏块茎腐烂病是半夏生产的主要限制因素之一,严重影响半夏的产量和品质。由于半夏块茎腐烂病的致病菌为土传病原菌,防治尤为困难。文章从半夏块茎腐烂病的致病因子与防治措施、病原菌分离与鉴定、抗病资源筛选、抗病机理研究等方面阐述了半夏块茎腐烂病研究进展,为半夏抗腐烂病种质资源挖掘及抗病分子育种等提供理论依据。

5种植物生长调节物质对半夏经济产量的影响

为给半夏的高产栽培措施提供理论依据,在展叶期喷施IBA、GA3、NAA、CCC和PP3335种植物生长调节物质,探讨不同生长调节物质对栽培半夏经济产量形成及相关形态、生理指标的影响。结果表明:与对照相比,喷施CCC可延长半夏生育期9d,生育期内叶片总叶绿素比对照高47.8%,类胡萝卜素含量比对照高46.7%,最终单株块茎增重率为110.9%;喷施GA3可延长半夏生育期5d,显著增加叶面积,单株块茎增重率为95.8%;喷施IBA和PP333对地下块茎的增重无显著效果;喷施NAA可导致叶面积显著减小,且叶片中可溶性糖含量明显降低,导致地下块茎增重显著低于对照。结论:施用CCC和GA3可显著增加经济产量,成为半夏高产栽培的一种重要技术措施。

喀斯特山区半夏产量与4个经济性状的相关研究

为喀斯特山区选育高产半夏提供依据,将不同来源半夏种质在同一生境下栽培,考查大块茎率、中块茎率、小块茎率、块茎百粒重、单位面积块茎产量,估算性状间相关系数及其对块茎产量通径系数,比较分析4个经济性状对半夏块茎产量影响的重要程度。结果表明,块茎产量与大块茎率、块茎百粒重呈极显著正相关,与中块茎率呈微弱负相关,与小块茎率呈极显著负相关。对半夏块茎产量影响的重要程度依次为块茎百粒重>小块茎率>中块茎率>大块茎率;相对增加大块茎率、块茎百粒重,降低小块茎率,中块茎率控制在一定范围,可显著提高半夏块茎产量。

半夏组培快繁体系的建立

目的建立半夏组培快繁体系。方法以半夏茎尖、叶柄和叶片为外植体,研究不同消毒方法和激素组合对半夏组织培养的影响。结果以75%酒精30s+(2%次氯酸钠+1.67g/L头孢拉定)15min处理外植体为宜;茎尖有利于不定芽的诱导;不定芽诱导最佳培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.6 mg/L KT;高浓度6-BA和低浓度NAA有助于半夏不定芽和块茎的形成;生根培养以1/2MS+0.5 mg/L IBA为最佳。结论建立了半夏组培快繁体系,为利用生物反应器生产半夏小块茎提供了理论依据。

半夏组织培养快速繁殖的研究

用半夏珠芽作外植体，在添加ＩＡＡ３．０ｍｇ／Ｌ和ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ固体培养基上可诱导出一种乳白色生长快的愈伤组织。愈伤组织在不含激素的ＭＳ固体培养基上可一步分化成完整小植株，在液体培养基中震荡培养可形成大量小块茎。小植株移栽成活率９２％，小块茎种植萌发成苗率５４．３％。

半夏炮制前后HPLC图谱的比较

目的采用HPLC比较半夏炮制前后药材的化学成分,为寻找毒性成分提供参考。方法色谱柱为VP-ODS C18（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相以0.01%磷酸水-乙腈从100%～50%线性梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长260 nm,进样量10μL,柱温30℃。结果半夏炮制后各萃取层HPLC图谱均发生了变化,正丁醇萃取层的相对保留时间28.542 min处,出现了1个新的色谱峰：30%甲醇层相对保留时间介于18~21 min的主要色谱峰消失了,乙酸乙酯萃取层只有峰面积大小的变化。结论半夏经炮制后化学成分存在质和量的变化。

离体培养条件下半夏叶柄形成珠芽过程中内源激素的变化

为了探讨半夏试管珠芽形成的生理生化机制，以半夏无菌叶柄为材料，倒置在MS基本培养基上，对半夏珠芽形成过程中5种内源激素（IAA、GA3、ABA、ZR、JA）的动态变化进行了研究。结果表明：倒置半夏叶柄的珠芽无一例外地出现在叶柄形态学上端；ELISA方法测定显示，半夏叶柄形成珠芽的过程中叶柄上端IAA、ABA、ZR和JA的含量呈上升趋势，GA3在的珠芽形成初期急剧下降。随着珠芽的形成，G氏与其它各激素的平衡关系发生变化，IAA／GA3、ABA／GA3、ZR／G氏和JA／GA3的比值先呈下降趋势，15d后开始上升；在珠芽快速形成期（10-20d）IAA／GA3、ABA／GA3和JA／GA3维持在高的水平，其中JA／GA3的比值20d后又呈上升趋势。

川半夏块茎产量性状的相关和通径分析

[目的]研究川半夏主要农艺性状及与块茎产量间的相关关系,为川半夏育种和高产栽培提供理论依据。[方法]对来自四川各地的22份半夏资源的产量性状进行相关和通径分析,并进行统计分析。[结果]13个主要农艺性状对块茎产量影响的顺序从大到小依次为增殖率、中粒单粒重、中粒直径、小粒单粒重、小粒直径、大粒直径、大粒单粒重、单株叶重、大粒率、增产率、小粒率、株高、中粒率。逐步回归分析表明,大粒直径、大粒单粒重、中粒单粒重、小粒单粒重、中粒率、小粒率及增殖率是影响半夏单株块茎产量的主要因素。单株增殖率对块茎产量的直接效应最大,其次为小粒率和大粒单粒重。[结论]单株增殖率和小粒率是川半夏品种选育的主要目标性状和高产栽培的主攻方向。半夏高产株型应是单株增殖率高、大块茎多、小块茎少、中块茎适中者。

烟草渣半夏专用肥对半夏防病增产作用观察

目的:研究防治半夏块茎腐烂病的方法。方法:以配制的烟草渣半夏专用肥料作为底肥与常规腐熟的农家肥进行对比试验。结果:烟草渣半夏专用肥料作为底肥能够防止半夏块茎腐烂病的发生,较大程度地提高半夏的产量。

圆珠半夏带顶芽块茎组培快繁体系的构建

为半夏种苗繁育提供参考,采用组织培养法,通过单因素试验和3因素4水平正交试验,探索6-BA、NAA、2,4-D生长调节剂不同浓度及其组合对圆珠半夏顶芽萌发、丛生芽诱导和愈伤组织诱导的影响。结果表明:不同浓度6-BA、NAA、2,4-D及其组合对顶芽萌发、愈伤组织和丛生芽诱导具有显著或极显著促进作用。单因素试验中,1.0mg/L6-BA、0.2mg/LNAA、0.2mg/L2,4-D诱导的愈伤组织块数最多,分别为26块、29块和24块。以圆珠半夏带顶芽块茎为外植体进行组织培养时,愈伤组织形成的最优组合为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L+2,4-D0.3mg/L,诱导顶芽萌发和丛生芽形成的最优组合为MS+6-BA1.2mg/L+NAA0.3mg/L+2,4-D0.2mg/L。

PtsAGPase在半夏试管块茎发育过程中的表达模式分析

半夏是一种药用植物,有降逆止呕,燥湿化痰,消痞散结等功效。如何提高半夏的产量是一个重要的科学问题。腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶在植物生长发育过程中有着影响淀粉合成的作用。目前发现在马铃薯、水稻、玉米等作物中AGPase的合成均促进贮藏器官的淀粉合成,起着促进马铃薯、水稻、玉米贮藏器官发育的作用。分析了半夏AGPase小亚基基因(PtsAGPase)在半夏试管块茎发育过程中的表达模式,发现在块茎发育时的形态建成期和快速膨大期,PtsAGPase表达量均出现了峰值。结果表明,PtsAGPase的表达在半夏块茎发育过程中起促进作用。

半夏游离块茎诱导及其遗传稳定性SSR鉴定

为探究半夏疏松愈伤组织继代条件,建立半夏游离块茎悬浮培养体系,并验证其组织培养过程中是否发生体细胞无性系变异,以半夏叶柄为外植体,研究不同浓度的蔗糖与激素配比对其疏松愈伤组织增殖的影响,设计单因素试验和正交试验筛选诱导其游离块茎的适宜条件,通过SSR分子标记技术,检测游离块茎的遗传稳定性。结果表明,半夏疏松愈伤组织形成的适宜继代培养基为MS+2,4-D 2.0 mg·L^(-1)+6-BA 0.5 mg·L^(-1)+蔗糖30 g·L^(-1)+0.6%琼脂,以此继代可获得大量用于建立悬浮体系的半夏疏松愈伤组织;适于疏松愈伤组织分化形成游离块茎的培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L^(-1)+IBA 0.5 mg·L^(-1)+蔗糖20 g·L^(-1),以此培养可获得大量用于人工种子制作或直接播种的半夏游离块茎;通过SSR标记,发现组织培养诱导形成的半夏游离块茎在DNA水平上未发生变异,仍保持其亲本的遗传稳定性。

半夏块茎离散元参数标定与试验验证

针对半夏块茎收获、加工等机械化作业过程采用离散元法仿真分析时,半夏块茎本征参数和接触参数缺乏等问题,以旱半夏块茎为研究对象,分别测定其三轴尺寸、含水率、密度、泊松比、弹性模量和剪切模量等本征参数;通过碰撞弹跳试验和斜面滑移试验测定半夏块茎与钢板之间碰撞恢复系数和静摩擦因数;根据块茎特征创建离散元模型,通过斜面滚动试验和EDEM仿真标定半夏块茎与钢板之间的滚动摩擦因数;以半夏块茎堆积角平均值为响应值,基于二次回归正交旋转组合试验的响应面优化法,确定半夏块茎间碰撞恢复系数、静摩擦因数和滚动摩擦因数的较优参数组合。结果表明:半夏块茎的三轴尺寸基本呈正态分布规律,尺寸值在4.03~26.68 mm之间,密度为1012.68 kg·m^(-3),湿基含水率为45.54%,泊松比为0.416,弹性模量平均值为35.93 MPa,剪切模量平均值为15.68 MPa;半夏块茎与钢板之间碰撞恢复系数、静摩擦因数和滚动摩擦因数分别为0.509、0.349和0.0735;半夏块茎间碰撞恢复系数、静摩擦因数和滚动摩擦因数分别为0.587、0.453和0.086。应用所得参数进行侧壁坍塌验证试验,验证试验结果表明,仿真休止角为23.19°,物理试验休止角为22.56°,休止角相对误差为2.79%,表明研究所建立的半夏块茎离散元模型和基础参数可用于半夏块茎相关离散元仿真研究。

半夏试管块茎直接发生途径的离体快繁研究

目的建立半夏试管块茎直接发生途径的离体快繁技术体系。方法以块茎、总叶柄、小叶柄、佛焰苞中部、佛焰苞下部、珠芽为外植体,研究不同消毒方法、激素组合和外植体长度对半夏试管块茎诱导的影响。结果叶柄以75%乙醇10s→0.1%升汞5min(1滴吐温80)→2%NaClO 8min→无菌水冲洗3遍为适宜的消毒方法;块茎以75%乙醇10s→0.1%升汞5min(1滴吐温80)→无菌水冲洗3遍为适宜的消毒方法;总叶柄和块茎均为最佳的外植体,适宜的初代培养基为1/2MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.01mg/L+3%蔗糖+0.8%琼脂,试管块茎诱导率为100%,块茎的数量为8.5个;1/2MS+6-BA0.01mg/L+NAA0.01mg/L+3%蔗糖+0.8%琼脂和1/2MS+6-BA0.001mg/L+NAA0.001mg/L+3%蔗糖+0.8%琼脂培养基是适宜的继代增殖培养基,增殖倍数分别为6.6和6.3;二次成苗时间只需要20天左右,增殖倍数分别为5.8和5.7。1cm总叶柄平放,叶柄下端产生的饱满的试管块茎可用作人工种茎。结论该研究建立了增殖倍数高,遗传稳定性高,生产成本低的半夏快速繁殖技术体系,可为半夏工厂化育苗提供技术支撑。

半夏试管苗生产脱毒微型种茎技术研究

半夏试管苗生产的脱毒微型种茎与野生种茎相比具有显著的增产性,采用脱毒微型种茎生产可大大提高产量,降低生产成本。而试管苗的移栽密度和基质直接影响到脱毒微型种茎的产量、质量和种茎级别。为确定半夏试管苗最佳的栽培基质与移栽密度,提高半夏脱毒微型种茎的产量,降低种茎生产成本,试验采用随机区组试验设计,研究不同基质、不同移栽密度对半夏试管苗产量的影响。研究结果表明:各因素对产量的决定程度为密度(B)>基质(A),最佳组合基质为疏松黄壤土、密度200株/m2时产量最高,达301.34㎏/667m2,674.33粒/m2,直径<1.5 cm的中小种茎占总数的92.14%,可作为生产种茎的比例最高。

半夏试管块茎发生和发育过程中的形态学和组织学研究

目的:探明半夏试管块茎发生和发育过程中淀粉粒分布和积累的规律,为高效调控半夏块茎发生和生长、提高半夏产量和品质提供理论支撑。方法:以半夏叶柄为外植体,根据试管块茎发生过程中的形态学变化,划分块茎发生和发育时期。采用石蜡切片技术观测块茎不同时期组织、细胞中淀粉粒的分布和数量变化。结果:根据形态学划分,半夏试管块茎发生过程可分为6个时期,即叶柄期(0 d)、膨大期(9 d)、球形期(14 d)、芽点期(19 d)、芽尖期(25 d)和成苗期(40 d),从接种叶柄至块茎萌发成苗需要40 d左右。从组织学角度来看,叶柄期淀粉粒零散分布在表皮下的薄壁细胞以及维管束和导管周围的薄壁细胞中,数量极少;随着块茎的膨大和发育,薄壁细胞脱分化发生分裂增殖,淀粉粒逐渐积累,且呈极性分布,同时淀粉粒体积也逐渐增大。结论:半夏块茎的发生与发育是细胞分裂、细胞膨大及淀粉粒积累共同作用的结果。

丛枝菌根真菌对半夏产量及化学成分的影响

目的:研究丛枝菌根真菌(AM)对半夏叶形指数、繁殖系数、产量及化学成分等的影响。方法:半夏生长期间常规测量叶长、叶宽、株高及叶柄直径(茎粗)直至倒苗,计算叶形指数;收获块茎后,测量并计算块茎产量;采用高效液相色谱法测量收获块茎和赫章县栽培半夏块茎中鸟苷含量;采用紫外-可见光分光光度计法测量收获块茎和赫章县栽培半夏块茎中生物碱含量。结果与结论:接种AM真菌可显著提高半夏块茎产量,提高繁殖系数;接种AM真菌提高半夏叶形指数,使叶片趋向竹叶型,推迟半夏倒苗时间;摩西球囊霉+根内球囊霉第1批处理(gm+gi1)对提高半夏块茎鲜重、干重及繁殖系数的效果最为明显,说明多菌协同、接种时间越长对提高半夏块茎产量和繁殖系数效果越为明显。接种AM真菌可显著提高半夏块茎鸟苷、生物碱含量,且接种菌剂的处理生物碱及鸟苷含量大多高于赫章县栽培半夏;摩西球囊霉+根内球囊霉第2批处理(gm+gi2)对增加块茎鸟苷、生物碱含量的效果最为明显,说明多菌协同,且在半夏生长中期进行接种效果最好。

半夏块茎腐烂病病原鉴定和药效比较

目的：研究半夏块茎腐烂病的病原和控制该病害的发生，为半夏栽培提供依据。方法：分离鉴定采用柯赫氏法则；菌丝生长条件采用二因子饱和D-最优设计；室内药效比较采用菌丝生长速率法。结果：形态学观察和致病性测定表明，引起半夏块茎腐烂病的病原物为尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum ；F. oxysporum 菌丝生长的适宜温度为15～30℃，最适温度为21.9℃，适宜pH值为6～8，最适pH 7.2；室内药效比较表明，70%甲基托布津和58%甲霜灵锰锌对F. oxysporum 菌丝生长的抑制效果最好，EC50分别为0.0027 g？L-1、0.0662 g？L-1。结论：明确了半夏块茎腐烂病病原，为该病害的防治提供了依据。

三叶半夏丛生块茎途径扩繁及块茎分离技术研究

三叶半夏为传统常用中药材,有超过1 000 a的药用史。自然状态下繁殖效率较低,野生资源不足,因此人工繁殖半夏以满足社会需求就显得尤为重要。为解决以上问题,结合半夏块茎生长特点及传统组织培养操作获得了半夏的"丛生块茎途径",并考查了增殖条件、继代次数、变异情况、诱导分离基质等特性,结果表明:以Ms+6-BA1.0 mg/L+NAA0.05 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L进行继代培养,前22代半夏丛生芽保持约15倍的增殖倍数,可作为扩繁的材料,同时需及时剔除变异组培苗,得到的丛生块茎种植于细沙或蛭石中,60 d后断水促使倒苗,筛除基质后即可得到大量栽培用单颗半夏块茎。

半夏人工种茎质量标准的研究

目的：制定半夏人工种茎的质量分级标准。方法：对组培快繁获得的成熟半夏人工种茎进行百粒重、含水量、发芽率、生活力、单粒径、净度等指标的测定和外观形态的观察,使用SPSS统计软件,分析出划分人工种茎等级的主要指标和参考指标,并制定半夏人工种茎质量分级标准。结果：生活力和发芽率是半夏人工种茎质量分级标准的主要指标,百粒重和直径大小是质量分级标准的重要参考指标。结论：1级半夏人工种茎的百粒重不低于10 g,含水量70%~80%,发芽率不低于80%,生活力不低于85%,单粒径不低于0.7 cm,净度不低于80%;2级人工种茎百粒重8~10 g,含水量70%~80%,发芽率60%~80%,生活力70%~85%,单粒径0.3~0.7 cm,净度75%~80%;含水量70%~80%且其他指标达不到2级人工种茎标准的为3级人工种茎。