2种半夏炮制品-厚朴药对HPLC特征图谱与多成分含量测定研究

目的:建立2种半夏炮制品-厚朴药对的HPLC特征图谱分析方法及鸟苷、尿苷、肌苷、紫丁香苷、绿原酸、金丝桃苷、和厚朴酚、厚朴酚的含量测定的方法。方法:采用Agilent Zorbax SB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 nm,5μm),以0.5%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为210 nm,柱温为30℃。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)软件建立20批样品的HPLC特征图谱并进行相似度评价,使用SPSS 24.0、SIMCA 14.1软件进行主成分分析(PCA)和偏最小二乘聚类分析(PLS-DA)。结果:从供试品溶液中未检出肌苷,鸟苷、尿苷、紫丁香苷、绿原酸、金丝桃苷、和厚朴酚、厚朴酚在一定浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9994~0.9998),平均回收率(n=6)分别为97.1%、96.2%、97.1%、98.2%、96.1%、98.3%及96.9%(RSD<2.0%)。方法的精密度RSD均小于3.0%,重复性RSD小于3.0%,供试品溶液放置48 h内稳定。20批样品的相似度均大于0.9,表明样品相似度差异不大。主成分得分结果与聚类分析结果一致,都将样品分为4类。本研究共标定了34个共有峰,经主成分分析,主成分1~8是影响药材样品质量评价的主要因子;其中成分15、16、21、17、11、9、6、8、30、22、1、14、26、23、5、31和3(尿苷)对样品分组起关键作用,鸟苷、尿苷、紫丁香苷、绿原酸、金丝桃苷、和厚朴酚、厚朴酚的平均含量分别为0.047、0.075、0.425、0.623、0.065、4.994、8.724 mg·g^(-1)。结论:所建立的HPLC方法可用于同时测定半夏炮制品-厚朴药对中8个化学成分的含量,该方法高效、准确、重复性好,可用于半夏-厚朴药对的质量控制、评价。