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Enhanced Somatic Embryogenesis and Plant Regeneration from Embryogenic Cultures Derived from Mature Loblolly Pine Zygotic Embryos by Suspension Culture and Medium Selection 被引量:3
1
作者 唐巍 《Forestry Studies in China》 CAS 2001年第2期1-9,共9页
Mature zygotic embryos of three families of loblolly pine ( Pinus taeda L.) were cultured on callus induction medium containing 8?mg·L -1 2,4 dichlorophenoxyacetic acid (2,4 D), 4?mg·L -1 6 b... Mature zygotic embryos of three families of loblolly pine ( Pinus taeda L.) were cultured on callus induction medium containing 8?mg·L -1 2,4 dichlorophenoxyacetic acid (2,4 D), 4?mg·L -1 6 benzyladenine (BA), 4?mg·L -1 kinetin (KT), 500?mg·L -1 casein hydrolysate, and 500?mg·L -1 glutamine for 9 weeks, callus was formed on cotyledons, hypocotyls, and radicles of mature zygotic embryos. Callus was sub cultured on the callus proliferation medium with 1 6?mg·L -1 2,4 dichlorophenoxyacetic acid (2,4 D), 0 8?mg·L -1 6 benzyladenine (BA), 0 8?mg·L -1 kinetin (KT) for 9 weeks. White translucent, glossy, mucilaginous embryogenic callus containing embryogenic suspensor masses (ESM) and immature somatic embryos was obtained, and the highest frequency of explants forming embryogenic callus was 16 9%. Embryogenic suspension cultures were established by culturing embryogenic callus in liquid callus proliferation medium. Liquid cultures containing embryogenic suspension masses and immature somatic embryos were transferred to medium containing abscisic acid (ABA), polyethylene glycols (PEG), or activated charcoal for enhancing the production of cotyledonary somatic embryos. After mature somatic embryos were cultured on medium containing indole butyric acid (IBA), gibberellic acid (GA 3), BA, and activated charcoal and being lowered sucrose concentration for 4~12 weeks, somatic embryos germinated to form regenerated plantlets. Seventy one regenerated plantlets were transferred to a perlits∶peatmoss∶vermiculate (1∶1∶1) soil mixture, and 23 plantlets survived in the field. 展开更多
关键词 pinus taeda L. embryogenic cultures somatic embryogenesis plant regeneration
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Somatic Embryogenesis and Plantlet Regeneration in Callus Cultures Derived from Mature Zygotic Embryos of Slash Pine
2
作者 唐巍 欧阳藩 郭忠琛 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 1997年第2期83-86,共4页
White, translucent, and mucilaginous embryogenic callus was initiated in cultured mature zygotic embryoexplants of two different seed sources of slash pine(Pinus elliottii) on several culture media containing auxin an... White, translucent, and mucilaginous embryogenic callus was initiated in cultured mature zygotic embryoexplants of two different seed sources of slash pine(Pinus elliottii) on several culture media containing auxin and cytokinin.Somatic proembryos were induced on media containing 2,4-D and BA. Maturatiol1 was successfully achieved on mediumsupplemented with ABA. Somatic embryos germinated into regeneration plantlets On DCR medium containing activated charcoal. HiStological observatiol1 and scanning electron inicroscopic observatiol1 showed that proembryos derived from em-bryonal suspensor mass(ESM) were formed on the surface or the inside of embryogenic callus, and the prolitbration of pro-embryos was mainly from clcavage polyembryos. 展开更多
关键词 pinus elliottii somatic embryogenesis plantet regeneration
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湿地松体细胞胚胎发生过程的全长转录组测序及生物信息学分析
3
作者 薛蕾 曾明 +4 位作者 王哲 郭文冰 伍彩云 郭业皇 刘阳 《林业与环境科学》 2024年第5期10-20,共11页
为提高湿地松Pinus elliottii体细胞胚胎发生效率,探究湿地松体胚发生的分子机理,利用SMRT(Single molecule real-time)第三代测序技术对湿地松体胚发生过程进行了全长转录组测序。测序总共生成了77.99 Gb原始数据,经多步筛选、矫正及... 为提高湿地松Pinus elliottii体细胞胚胎发生效率,探究湿地松体胚发生的分子机理,利用SMRT(Single molecule real-time)第三代测序技术对湿地松体胚发生过程进行了全长转录组测序。测序总共生成了77.99 Gb原始数据,经多步筛选、矫正及去冗余后,获得了63334条高质量非冗余全长转录本,平均长度为2070 bp,N50为2317 bp,总注释率可达97.27%。GO功能注释及KEGG代谢通路分析表明,湿地松体胚发生过程中表达的基因多与细胞及细胞器的生长、次生代谢物质的生物合成碳代谢、氨基酸的生物合成以及植物激素相关。根据全长转录本数据,预测了62177条完整编码序列、2668个转录因子、4570个简单序列重复和1432个可变剪切事件。研究获得了湿地松体胚发生过程的全长转录组序列、完整的功能注释和结构信息。 展开更多
关键词 湿地松 体细胞胚胎发生 SMRT三代测序 全长转录组
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抗性湿地松胚性愈伤组织的维持与增殖 被引量:1
4
作者 程方 叶建仁 《绿色科技》 2023年第14期1-7,27,共8页
将抗松针褐斑病湿地松愈伤组织转接至不同培养基及多种添加物中,开展了不同愈伤组织类型、不同浓度肌醇与麦芽糖、不同2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、激动素(KT)浓度组合、添加维生素(VC)、添加硝酸银(AgNO3)、不同... 将抗松针褐斑病湿地松愈伤组织转接至不同培养基及多种添加物中,开展了不同愈伤组织类型、不同浓度肌醇与麦芽糖、不同2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、激动素(KT)浓度组合、添加维生素(VC)、添加硝酸银(AgNO3)、不同基因型胚性愈伤组织、多次继代后胚性愈伤组织与培养基的适应性等研究。结果表明:湿地松不同愈伤组织类型在增殖过程中成活率及增殖状况都存在很大差异;当麦芽糖浓度为15 g/L,肌醇浓度为1000 mg/L时最有利于胚性胚柄细胞团(ESM)的增殖;高浓度的2,4-D、6-BA不利于湿地松胚性愈伤组织的增殖,最佳增殖培养基及激素组合DCR+1.0 mg/LNAA+0.32 mg/L6-BA+0.31 mg/LKT、DCR+1.0 mg/LNAA(萘乙酸)+1.55 mg/L6-BA+0.064 mg/LKT;添加维生素(VC)浓度为10 mg/L时,对湿地松愈伤的褐化有明显抑制作用,但浓度过高则会增加愈伤的褐化率;添加3.4 mg/L的AgNO3促进了湿地松胚性愈伤组织的增殖;湿地松不同家系不同基因型间增殖能力差异显著,20#2和10#1增殖很快明显优于10#4、10#5和20#3;湿地松胚性胚柄细胞团在同样的培养基上多次继代后,愈伤组织增殖变慢,中心褐化较多,有些还会出现水渍状,可能导致其胚性丧失。湿地松不同愈伤组织类型在增殖过程中,成活率及增殖状况都存在很大的差异。Ⅲ型、Ⅳ型愈伤可能同时含有胚性愈伤和非胚性愈伤,在培养基条件适合的情况下胚性愈伤转化成胚性胚柄细胞团,但是转化频率极低。而Ⅴ型、Ⅵ型愈伤在后期培养过程中基本褐化死亡。 展开更多
关键词 抗性湿地松 体细胞胚胎发生 胚性愈伤组织 维持与增殖培养基
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湿地松及其杂种的体细胞胚胎发生与植株再生 被引量:7
5
作者 胡继文 郭文冰 +7 位作者 邓乐平 钟岁英 王为民 赵奋成 黄婷 吴惠姗 李义良 廖仿炎 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期107-115,共9页
【目的】明确适合湿地松Pinus elliottii及其杂交种的体细胞胚胎发生条件,建立体胚成熟萌发的技术。【方法】以2016年6月采集的2个湿地松家系(EE1,EE2)、2个湿地松杂交种家系(EC,EH)的未成熟合子胚(含胚乳)为材料,从诱导、增殖、成熟到... 【目的】明确适合湿地松Pinus elliottii及其杂交种的体细胞胚胎发生条件,建立体胚成熟萌发的技术。【方法】以2016年6月采集的2个湿地松家系(EE1,EE2)、2个湿地松杂交种家系(EC,EH)的未成熟合子胚(含胚乳)为材料,从诱导、增殖、成熟到萌发配制3个系列培养基,比较外植体采集时间、家系、基本培养基对胚性愈伤组织诱导的影响。用显微镜进行胚性愈伤组织鉴别后,进一步挑选诱导形成的胚性愈伤组织进行增殖、成熟、萌发,最终获得再生植株。【结果】湿地松及其杂交种合子胚的发育进程可划分为8个阶段,阶段Ⅱ、Ⅲ为未成熟胚,适合体胚发生,EC最早出现阶段Ⅲ合子胚。外植体诱导产生具有胚性胚柄团(ESM)结构的胚性愈伤组织,可进一步增殖。诱导培养基对愈伤组织形成及胚性愈伤组织占比具有较大影响,3种诱导培养基(T1、T2和T3)产生愈伤组织效率最高的为T1培养基(49.0%),胚性愈伤组织所占愈伤组织的比例最高为T2培养基(22.4%)。培养基配方的诱导率存在基因型间的差异,T1培养基整体诱导率低;T2培养基对家系EE1诱导率最高,为5.82%;T3培养基对参试材料均能诱导成功,且平均诱导率最高,为3.75%。随采样时间延后,家系EE1、EH的体胚诱导率逐渐增加,家系EE2、EC的体胚诱导率则随采样时间延后逐渐降低。体胚诱导率与合子发育阶段结果基本一致,阶段Ⅲ合子胚均出现较晚,前期诱导率低。胚性愈伤组织继代24次以后,胚活性逐渐降低。成熟培养基T1S和T3S可完成胚的成熟,平均每克成熟培养基分别成熟23.3和15.9个子叶胚,萌发率为32.1%,移栽保存率为47.8%。【结论】诱导培养基T3对参试家系均能诱导成功,T3具有较广泛适用性,各家系在阶段Ⅲ合子胚出现时表现出较大的诱导率,阶段Ⅲ合子胚可能为体细胞胚发生的最佳诱导阶段。建立了湿地松及其杂种体细胞胚发生方法并形成了再生植株。 展开更多
关键词 湿地松 合子胚 体细胞胚胎发生 植株再生 杂交 胚性愈伤组织 诱导培养基
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火炬松胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究 被引量:41
6
作者 唐巍 欧阳藩 郭仲琛 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第3期115-119,共5页
火炬松胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究唐巍欧阳藩(中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京100080)郭仲琛(中国科学院植物研究所北京100093关键词火炬松,体细胞胚胎发生,植株再生本文于1996年1... 火炬松胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究唐巍欧阳藩(中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京100080)郭仲琛(中国科学院植物研究所北京100093关键词火炬松,体细胞胚胎发生,植株再生本文于1996年10月28日收到。国家“863”资... 展开更多
关键词 火炬松 体细胞胚胎发生 植株再生
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湿地松体细胞胚胎发生和植株再生 被引量:36
7
作者 唐巍 欧阳藩 郭仲琛 《植物资源与环境》 CSCD 1997年第2期8-11,共4页
以湿地松(PinuseliotiEngelm.)的未成熟合子胚为外植体,在附加8mg/L2,4D和4mg/LBA的LP培养基上诱导出胚性愈伤组织。在含1mg/L2,4D和05mg/LBA的培养基上保持并增殖。提... 以湿地松(PinuseliotiEngelm.)的未成熟合子胚为外植体,在附加8mg/L2,4D和4mg/LBA的LP培养基上诱导出胚性愈伤组织。在含1mg/L2,4D和05mg/LBA的培养基上保持并增殖。提高培养基的渗透压后,愈伤组织内形成大量的胚性胚柄细胞团和早期原胚。在附加4mg/LABA,75g/LPEG和5g/L活性炭的LP培养基上,早期原胚发育形成粗壮的子叶胚。在无激素LP培养基上,成熟的体细胞胚萌发并发育形成再生完整植株。体细胞胚转换成小植株的频率为156%。 展开更多
关键词 湿地松 体细胞胚胎发生 植株再生
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火炬松成熟合子胚培养直接体细胞胚胎发生和植株再生 被引量:13
8
作者 唐巍 欧阳藩 郭仲琛 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期103-106,共4页
以Hb、Ma和Mc3个基因型的火炬松成熟合子胚为外植体,建立了火炬松的离体培养直接体细胞胚胎发生植株再生体系实验结果表明,不同基因型火炬松之间的直接体细胞胚诱导频率有明显差异3个基因型中.Hb的成熟合子胚在附加1mg·L-12,4... 以Hb、Ma和Mc3个基因型的火炬松成熟合子胚为外植体,建立了火炬松的离体培养直接体细胞胚胎发生植株再生体系实验结果表明,不同基因型火炬松之间的直接体细胞胚诱导频率有明显差异3个基因型中.Hb的成熟合子胚在附加1mg·L-12,4-D和4mg·L-1BA的DCR培养基上的直接体细胞胚诱导频率最高,达18%,扫描电镜观察表明,直接体细胞胚主要形成于成熟合子胚的子叶表而且胚轴较短,和母体组织仅保持胚根部位的联系组织细胞学切片结果表明,直接体细胞胚上胚根的发育落后于子叶,但是由直接体细胞胚发育形成的再生小苗有独立的维管组织,根部也较发达,并且整个小植株的维管系统和成熟合子胚上子叶的维管组织没有直接的联系. 展开更多
关键词 火炬松 细胞胚胎发生 植株再生
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云南松成熟胚的体细胞胚胎的发生研究 被引量:29
9
作者 黄健秋 卫志明 许智宏 《实验生物学报》 CSCD 1995年第4期371-379,共9页
云南松(Pinus yunnanesis Franch)是我国特产的一种优良森林树种,本研究采用云南松成熟合子胚为起始外植体,在含2,4-D 10mg/L,KT和BA各4mg/L的改良P6培养基上得到胚发生培养物。将白色半透明的胚性愈伤组织(含早期原胚)在含2,4-D1.0mg/L... 云南松(Pinus yunnanesis Franch)是我国特产的一种优良森林树种,本研究采用云南松成熟合子胚为起始外植体,在含2,4-D 10mg/L,KT和BA各4mg/L的改良P6培养基上得到胚发生培养物。将白色半透明的胚性愈伤组织(含早期原胚)在含2,4-D1.0mg/L,KT和BA各0.4mg/L的培养基上保持并增殖。在附加9,000mg/L肌醇的高渗培养基(含NAA0.5mg/L,KT和BA各0.2mg/L)上得到粗壮的后期原胚。ABA和PEG同时使用能促进子叶胚的形成。在无激素培养基上,成熟体细胞胚萌发并进一步形成完整小植株。 展开更多
关键词 云南松 成熟合子胚 体细胞胚胎发生
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马尾松成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生 被引量:36
10
作者 黄健秋 卫志明 许智宏 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1995年第4期289-294,共6页
采用马尾松(Pinusm assoniana Lam b.)成熟合子胚为起始外植体,在含2,4-D 10 m g/L,KT和BA 各4 m g/L的DCR培养基上得到胚发生培养物。将白色半透明的愈伤组织(含早期原胚)在含2,... 采用马尾松(Pinusm assoniana Lam b.)成熟合子胚为起始外植体,在含2,4-D 10 m g/L,KT和BA 各4 m g/L的DCR培养基上得到胚发生培养物。将白色半透明的愈伤组织(含早期原胚)在含2,4-D1.0 m g/L,KT和BA 各0.4 m g/L的DCR培养基上保持并增殖。在附加9000 m g/L肌醇的DCR高渗培养基上得到粗壮的后期原胚。ABA 和活性炭同时使用能促进子叶胚的形成,最高频率为35.1% 。在无激素培养基上。 展开更多
关键词 马尾松 成熟合子胚 体细胞胚胎发生 植株再生
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速生湿地松良种胚性愈伤组织诱导与增殖 被引量:4
11
作者 徐康 程强强 +3 位作者 杨春霞 谷振军 丁伟 李火根 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期283-291,共9页
为使速生湿地松良种快速大规模繁殖,对其胚性愈伤组织进行诱导和增殖优化研究。该文以1代湿地松种子园中10个速生湿地松优良无性系(基因型)的未成熟合子胚为外植体,系统研究基因型、合子胚发育阶段、基本培养基、植物生长调节剂种类和... 为使速生湿地松良种快速大规模繁殖,对其胚性愈伤组织进行诱导和增殖优化研究。该文以1代湿地松种子园中10个速生湿地松优良无性系(基因型)的未成熟合子胚为外植体,系统研究基因型、合子胚发育阶段、基本培养基、植物生长调节剂种类和浓度等不同因子对胚性愈伤组织诱导效率的影响,探讨胚性愈伤组织的增殖条件。结果表明:基因型、合子胚发育阶段、基本培养基及植物生长调节剂种类和浓度等均对胚性愈伤组织诱导有不同程度的影响。10个基因型均诱导出了胚性愈伤组织,其中以2号基因型诱导率最高,达到25.37%;合子胚发育阶段中,以处于多胚阶段的球果诱导率最高;四种基本培养基中,以在DCR基本培养基上诱导效果最佳;植物生长调节剂浓度及组合中以2,4-D 2.0 mg·L^(-1)+KT 2.5 mg·L^(-1)诱导率最高,达到27.78%。湿地松胚性愈伤组织增殖的最佳培养基为在DCR基本培养基上添加0.5 mg·L^(-1)2,4-D、1.0 mg·L^(-1)KT、500 mg·L^(-1)CH和300 mg·L^(-1)L-谷氨酰胺。综上研究结果,为湿地松良种进一步开展成熟胚诱导及植株再生奠定了基础。 展开更多
关键词 湿地松 未成熟合子胚 体细胞胚胎发生 胚性愈伤组织
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湿地松体细胞胚胎发生胚性愈伤组织诱导条件优化 被引量:6
12
作者 程子珊 易敏 +5 位作者 宋才玲 程强强 黄若 邓诏磊 张莹莹 张露 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1054-1064,共11页
【目的】提高湿地松(Pinus elliottii E.)体细胞胚胎发生过程中胚性愈伤组织的诱导能力,优化胚性愈伤组织的诱导培养条件,建立稳定高效的湿地松胚性愈伤组织诱导培养技术体系。【方法】以湿地松未成熟合子胚作为外植体,探究基因型、球... 【目的】提高湿地松(Pinus elliottii E.)体细胞胚胎发生过程中胚性愈伤组织的诱导能力,优化胚性愈伤组织的诱导培养条件,建立稳定高效的湿地松胚性愈伤组织诱导培养技术体系。【方法】以湿地松未成熟合子胚作为外植体,探究基因型、球果采集日期、植物生长调节剂和碳源等因子对湿地松胚性愈伤组织诱导的影响;观察和划分湿地松合子胚的发育阶段,并测定不同发育阶段的合子胚的生长素(IAA)、细胞分裂素(ZR)、脱落酸(ABA)和赤霉素(GA3)含量,探究合子胚发育过程中内源激素含量的动态变化。【结果】内因和外因等因素对胚性愈伤组织诱导均有显著或极显著影响,通常7月中上旬是采集湿地松球果的最佳时期,选取处于2~4阶段即多胚头、裂生多胚和球形胚发育阶段的合子胚作为诱导材料,胚性愈伤组织诱导率较高;以16号基因型的湿地松球果的未成熟合子胚为材料,能够稳定保持较高的胚性愈伤组织诱导率。在DCR基本培养基中添加2.2 mg/L激动素(KT)+2.2 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+2.2 mg/L 6-苯甲基腺嘌呤(6-BA)为湿地松胚性愈伤组织诱导的最佳植物生长调节剂浓度组合;如以1.5 g/L松三糖代替蔗糖作为碳源,16号基因型球果的胚性愈伤组织诱导率可达40%。此外,通过观察合子胚发育过程中内源激素含量的动态变化,推测合子胚内源脱落酸(ABA)对胚性愈伤组织的诱导有重要调控作用。【结论】本研究得到了较为稳定高效的湿地松胚性愈伤组织诱导培养技术体系,为进一步建立完整高效的湿地松体细胞胚胎发生和植株再生体系提供依据。 展开更多
关键词 湿地松 体细胞胚胎发生 胚性愈伤组织 诱导 脱落酸
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抗松针褐斑病湿地松体细胞的悬浮培养 被引量:4
13
作者 方珞 吴小芹 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期13-18,共6页
为了获得大量的抗松针褐斑病胚性愈伤组织试验材料,完善抗性湿地松体胚发生技术,以抗松针褐斑病湿地松胚性愈伤组织为材料,探究抗性湿地松体细胞悬浮培养的较适条件,建立抗性湿地松体细胞的悬浮培养体系。研究结果显示:悬浮培养的胚性... 为了获得大量的抗松针褐斑病胚性愈伤组织试验材料,完善抗性湿地松体胚发生技术,以抗松针褐斑病湿地松胚性愈伤组织为材料,探究抗性湿地松体细胞悬浮培养的较适条件,建立抗性湿地松体细胞的悬浮培养体系。研究结果显示:悬浮培养的胚性细胞较分散,利于胚性细胞充分获取营养,可产成熟体胚153个/g,而固体培养的胚性细胞产胚仅为56个/g。抗性湿地松悬浮细胞的较佳培养周期为7-9 d,较适宜的基本培养基为1/4 DCR,麦芽糖添加量为15 g/L,NAA添加量为0.5 mg/L;较佳的继代添加比为1/2;同时研究还发现不同基因型的抗性湿地松悬浮细胞在相同的培养条件下,细胞活力有一定差异,其中无性系13#-9活力最佳。 展开更多
关键词 抗性湿地松 悬浮培养 体胚发生 胚性愈伤组织
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Recovery of somatic embryos and plantlets from callus of mature masson pine embryos 被引量:1
14
作者 黄健秋 卫志明 许智宏 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1995年第14期1196-1200,共5页
Remarkable progress has been made in the development of systems for somaticembryogenesis in conifers since 1985. Currently however, it is still recalcitrant to inducesomatic embryo development from Pinus species. It i... Remarkable progress has been made in the development of systems for somaticembryogenesis in conifers since 1985. Currently however, it is still recalcitrant to inducesomatic embryo development from Pinus species. It is now only possible to obtain somaticembryos and plantlets from Pinus caribaea. P. lambertiana and P. tadea through in vitroembryogenesis. Of the three Pinus species which have expressed embryogenesis in explant-derivedcultures. only P. lambertiana has been successfully induced to produce somatic embryos frommature zygotic embryos. 展开更多
关键词 pinus massoniana Lamb. somatic embrvogenesis PLANTLET regeneration.
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抗松针褐斑病湿地松未成熟合子胚胚性愈伤组织的诱导
15
作者 程方 孙婷玉 叶建仁 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期175-182,共8页
【目的】建立高效实用的抗松针褐斑病湿地松优良无性系的离体快繁体系,为湿地松优良种苗的商业化应用提供技术基础。【方法】以福建官庄林场采集的抗松针褐斑病家系湿地松未成熟合子胚为外植体,分析影响湿地松胚性愈伤组织诱导的主要因... 【目的】建立高效实用的抗松针褐斑病湿地松优良无性系的离体快繁体系,为湿地松优良种苗的商业化应用提供技术基础。【方法】以福建官庄林场采集的抗松针褐斑病家系湿地松未成熟合子胚为外植体,分析影响湿地松胚性愈伤组织诱导的主要因素:对外植体材料的预处理进行研究,利用单因素实验筛选适合湿地松未成熟球果的采集及冷藏时间;对培养基中影响胚性愈伤组织诱导的主要添加物中的碳源(麦芽糖、蔗糖和葡萄糖)、肌醇和抗坏血酸进行单因素实验,对α-酮戊二酸和丙酮酸进行双因素实验分析;最后对影响胚性愈伤组织诱导的主要激素,如生长素(2,4-二氯苯氧乙酸)和细胞分裂素(6-苄基氨基嘌呤和激动素)进行随机组合分析。【结果】(1)未成熟湿地松球果体胚最佳诱导时间为6月底至7月中上旬;(2)1000 mg/L肌醇和30 g/L麦芽糖最适宜湿地松胚性愈伤组织的诱导;(3)抗坏血酸质量浓度为0、1、2、3 mg/L时,对湿地松胚性愈伤组织诱导的影响区别不大;但同时添加α-酮戊二酸和丙酮酸时明显促进了湿地松愈伤组织的诱导;(4)湿地松最佳诱导培养基与激素组合为基本培养基LP+2 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+2 mg/L 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)+2.5 mg/L激动素(KT)。【结论】通过对湿地松球果的预处理,获得了适合湿地松愈伤组织诱导的材料,并且确定了适合胚性愈伤组织诱导的合子胚发育阶段,即2~4阶段,以及合适的采集期。另外,对诱导培养基中主要添加物和激素进行研究,筛选出了1种较优的湿地松愈伤组织诱导的培养基,确定了适合湿地松胚性愈伤组织诱导的主要条件,可为提高湿地松胚性愈伤组织诱导率、促进湿地松体胚发生提供参考。 展开更多
关键词 湿地松 松针褐斑病 合子胚 体细胞胚胎发生 胚性愈伤组织诱导
原文传递
抗松材线虫病马尾松体胚发生与植株再生条件的优化 被引量:11
16
作者 陈婷婷 叶建仁 +2 位作者 吴小芹 沈李元 朱丽华 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期1-8,共8页
【目的】为使抗松材线虫病马尾松(Pinus massoniana Lamb.)快速大规模繁殖,对抗性马尾松体细胞胚胎发生和植株再生条件进行优化。【方法】以抗病马尾松未成熟合子胚为材料,探讨胚性愈伤组织的诱导、增殖与维持、分化成熟以及萌发的合适... 【目的】为使抗松材线虫病马尾松(Pinus massoniana Lamb.)快速大规模繁殖,对抗性马尾松体细胞胚胎发生和植株再生条件进行优化。【方法】以抗病马尾松未成熟合子胚为材料,探讨胚性愈伤组织的诱导、增殖与维持、分化成熟以及萌发的合适培养条件,并对体细胞胚进行生根诱导,对再生植株进行壮苗培养以及驯化移栽。【结果】以LP为基本培养基,添加2.0 mg/L 2,4-D(二氯苯氧乙酸)和1.0 mg/L 6-BA(6-苄氨基腺嘌呤),抗性马尾松胚性愈伤组织诱导率最高达27.8%。在胚性愈伤组织增殖维持过程中,悬浮培养中的增殖系数和同步化程度都显著高于固体培养,且经过悬浮培养的细胞系分化能力更强。萌发过程中只有少量能顺利分化出根系,未能顺利分化出根的体胚于添加适量IBA和NAA的生根培养基中能够更好地生根。壮苗培养过程中,添加0.01 mg/L油菜素内酯有助于体胚苗的生长。体胚苗在驯化移栽时不同大小的苗移栽成活率相差较大,5 cm左右的体胚苗成活率最高达90.3%。【结论】生长素2,4-D和6-BA组合(2.0 mg/L和1.0 mg/L)对抗性马尾松胚性愈伤组织诱导率较好;悬浮培养后的细胞系更利于诱导体胚,适宜浓度的IBA和NAA(1.0 mg/L和0.2 mg/L)能够促进体胚苗根系生长。在壮苗培养基中添加适量油菜素内酯能够促进抗性马尾松再生植株的生长,待苗长至5 cm左右移栽较好。 展开更多
关键词 松材线虫病 抗病马尾松 体胚发生 植株再生 悬浮培养 生根
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