荜茇提取物的抗氧化活性及改善LPS所致大鼠听力损伤的作用研究

目的 探讨荜茇提取物的抗氧化活性及改善LPS所致大鼠听力损伤的作用。方法 测试浓度为0.05~1.0 mg/mL的荜茇提取物对DPPH自由基的清除率;测试浓度为25~500μg/mL荜茇提取物对LPS诱导RAW 264.7细胞分泌NO的抑制作用。随机将24只SD大鼠分成空白对照组、模型组、氢化可的松组和荜茇提取物组,每组6只,空白对照组不造模处理,模型组、氢化可的松组及荜茇提取物组连续鼓室内注射5 mg/mL的LPS 5 d后,模型组生理盐水灌胃,氢化可的松组1.81 mg/kg氢化可的松灌胃,荜茇提取物组按生药量1 g/mL荜茇提取物灌胃,连续灌胃10 d后,测试各组大鼠8、16 kHz ABR反应阈值、耳蜗组织中谷氨酸、MDA、TNF-α、NO因子的表达量,并行耳蜗基底膜铺片观察。结果 荜茇提取物对DPPH自由基清除的IC50为0.505 mg/mL;浓度为25~500μg/mL的荜茇提取物对LPS诱导的RAW264.7细胞过度分泌NO有显著的抑制作用,抑制率的IC50为280.55μg/mL。连续灌胃10 d后,与空白对照组相比,模型组8、16 kHz ABR阈值显著升高,耳蜗组织中谷氨酸、MDA、TNF-α、NO的表达显著升高,SOD含量显著降低;与模型组相比,氢化可的松组和荜茇提取物组8、16 kHz的ABR反应阈值降低(P<0.01),大鼠耳蜗组织谷氨酸、MDA、TNF-α、NO因子表达也显著降低(分别为P<0.05、P<0.01、P<0.001),SOD活力提高(P<0.05)。基底膜铺片结果示,空白组毛细胞无明显缺失,三排外毛细胞纤毛排列整齐,结构完整,无缺失;模型组耳蜗毛细胞大部分明显缺失,并且细胞肿胀明显、结构严重不完整,氢化可的松组及荜茇提取物组耳蜗毛细胞排列较为整齐,毛细胞肿胀缓解。结论 荜茇提取物可能通过抑制耳蜗组织中的谷氨酸、自由基的过度表达以及炎症反应,提高超氧化歧化酶SOD活力,产生良好的改善听力作用。

FTIR方法和HPLC指纹图谱鉴别不同产地荜茇

荜茇是药食同源性中药,也是蒙、藏、维医的习用药材,临床用于治疗胃痛、腹泻等,也被用作香料或调味剂,因此其质量控制非常重要。已报道采用高效液相色谱法检测胡椒碱或荜茇宁,该方法缺乏整体性。傅里叶红外光谱法和HPLC指纹图谱联合应用考察4个产地6批次荜茇,基于共有峰率和变异峰率双指标序列分析荜茇的红外光谱,并建立荜茇的HPLC指纹图谱。结果显示两种方法对荜茇的评价结果相互印证,各批次荜茇的化学成分基本相同,质量比较稳定,其中云南产荜茇(S1)与其余5批次荜茇有一定差异。红外光谱共有峰率和变异峰率与HPLC指纹图谱均能从化学成分的角度评价药材的质量,具有整体性和综合性。荜茇的红外光谱由药材中多种化学成分的红外光谱叠加产生,而指纹图谱仅显示在波长254 nm条件下有紫外吸收的化合物,因此红外光谱在分析药材品质中更具有优势。同时考察了胡椒碱和荜茇宁的含量,云南(S1)和海南(S5, S6)较安徽亳州(S2)和广西(S3, S4)低,结果与红外和HPLC指纹图谱的结果有一定的差异,提示中药材的质量评价应更注重整体性。将FTIR和HPLC指纹图谱联合应用于荜茇的质量控制研究,两种方法互为补充,操作简便,样品使用量少,可做为药材快速鉴别的新方法,为荜茇的化学成分、质量控制和开发应用提供研究基础和依据。

HPLC法同时测定荜茇-大黄中6种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定荜茇-大黄药对中胡椒碱、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量。方法采用Thermo Hypersil BDS C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 ml/min;检测波长254 nm;柱温30℃。结果各成分色谱峰分离度良好,胡椒碱、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的质量浓度分别在6.02~240.72μg/ml(r=0.9996)、1.85~74.18μg/ml(r=0.9993)、1.79~71.78μg/ml(r=0.9996)、1.59~63.55μg/ml(r=0.9995)、5.42~216.72μg/ml(r=0.9992)、1.62~64.64μg/ml(r=0.9997)内呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.61%(RSD=1.50%)、99.48%(RSD=1.11%)、99.10%(RSD=1.31%)、99.72%(RSD=1.29%)、99.88%(RSD=1.25%)、99.06%(RSD=0.97%)。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于荜茇-大黄药对的质量控制。

超声波辅助亚临界水提取荜茇总黄酮工艺优化及其抗氧化活性评价

采用超声波协同亚临界水技术进行荜茇中黄酮类成分的提取条件研究,并对其不同部位的总黄酮提取物进行抗氧化性对比分析。结果表明,超声波协同亚临界水提取荜茇整株总黄酮最佳工艺条件为超声温度50℃,超声功率240 W,超声时间40 min,料液比1∶30(g/mL),亚临界水提取温度125℃,亚临界水提取时间为40 min,在此工艺条件下荜茇整株总黄酮最高提取量为(30±0.05)mg/g。不同部位总黄酮提取物对DPPH自由基和超氧阴离子自由基清除能力的大小顺序为果穗>叶>根>茎,DPPH自由基清除率和超氧阴离子自由基清除率的IC50值分别为荜茇果穗37.96、304.33μg/mL,荜茇叶44.55、384.36μg/mL,荜茇根47.68、461.54μg/mL,荜茇茎130.60、487.80μg/mL。采用超声波协同亚临界水提取荜茇整株总黄酮的工艺条件合理,提取得到的总黄酮具有良好的抗氧化性。

HPLC法测定蒙药甘露益肝胶囊中胡椒碱的含量

目的:建立蒙药甘露益肝胶囊中胡椒碱的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法。应用DiamonsilC18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱;以甲醇-水(77:23)为流动相;流速为0.8ml.min-1;检测波长为343nm;柱温为室温。结果:胡椒碱在0.083 2μg^0.499 2μg范围内,与峰面积具有良好的线性关系,r=0.9998;平均回收率为99.75%、RSD为2.54%(n=6)。结论:该方法精密度高,分离度好,可用于蒙药甘露益肝胶囊中胡椒碱的含量测定。

荜茇的本草考证

荜茇是一味经典的中草药,味辛,性热,具有温中散寒、下气止痛的功效。通过查阅历代本草、现代文献,从荜茇出处、名称、植物形态、产地、性味归经、炮制、功效、主治用量及禁忌等多方面进行梳理考证,以便为现代临床医师和研究者提供理论依据和研究方向。

新型HF-LPME-HPLC对蒙药荜茇生物碱含量测定研究

研究建立一种新型中空纤维膜液相微萃取联合高效液相色谱(HF-LPME-HPLC)测定蒙药荜茇中生物碱含量,对影响HF-LPME萃取效率的各项参数进行优化分析。中空纤维膜材料为偏氟乙烯纤维膜(空隙率>50%),正辛醇为萃取剂,萃取温度为室温,振荡速度为200 r/min,萃取时间为128 min。建立了新型HF-LPME的萃取方法,对蒙药荜茇中胡椒碱的R>5,与传统萃取方法相比,富集倍数为40倍。线性范围分别为0.006~0.01 mg/mL,相关系数(r)为0.9999。相比于传统的萃取方法,该方法使用极少量的有机溶剂,可高效萃取并测定蒙药荜茇中生物碱的含量,打破了仅能在环境和食品中应用的限制,可以在各类化学基础实验中推广应用。

基于正交实验法优化从荜茇中提取胡椒碱的工艺

基于正交实验,优化胡椒碱提取工艺并建立HPLC测定胡椒碱含量的方法。以荜茇为原料,在单因素实验设计的基础上,采用正交实验进行优化乙醇浓度、乙醇用量、提取时间及提取次数进行考察。胡椒碱的最佳提取工艺是65%乙醇,提取时间2 h,提取次数为3次,溶剂用量为6倍。胡椒碱在0.70~27.50μg/mL的范围内具有良好线性关系、相对标准偏差小于0.52%(n=5)、加标回收率为103.23%。胡椒碱的提取工艺合理、可行、胡椒碱的提取率较高,为荜茇的进一步开发提供了理论依据。

超临界流体萃取法在荜茇质量控制中的应用

采用系统观察法对超临界流体萃取法的最佳萃取条件进行了考察 ,并与传统有机溶剂提取法进行比较 ,建立了超临界流体萃取法提取中药筚茇中有效成分的方法 ,结果最佳萃取条件为 :以乙醇作改性剂 ,于40℃、2 .6 0 8× 10 7Pa压力下 ,二氧化碳静态萃取 15 m in,动态萃取 5 m l。该法操作简便快速 ,提取完全 。

荜茇水提取物对小鼠胃排空和肠推进的影响

目的:研究荜茇水提取物对小鼠肠推进和胃排空的影响。方法:荜茇水提取物灌胃给药6天,采用小肠炭末推进实验观察荜茇水提取物对正常小鼠小肠运动及硫酸阿托品所致小鼠小肠抑制模型的影响,采用甲基橙胃残留率的方法观察荜茇水提取物对正常小鼠胃排空的影响。结果:荜茇水提取物20g/kg和10g/kg可促进正常小鼠小肠运动,并能明显拮抗硫酸阿托品所致小鼠小肠抑制作用,荜茇水提取物20g生药/kg和10g生药/kg可促进正常小鼠胃排空。结论:荜茇水提取物对正常小鼠小肠运动及硫酸阿托品所致小鼠小肠抑制均有明显促进作用,并对正常小鼠胃排空有促进作用,其机制可能与M胆碱受体有关。

荜茇挥发油清除自由基作用及其与分子结构的关系

目的观察海南产荜茇挥发油清除自由基活性,探讨其与分子结构的关系。方法DPPH法检测清除自由基活性;GC-MS法分析其化学成分,并用谱库检索确定各化合物结构。结果①荜茇挥发油具有清除DPPH自由基的能力,且浓度越高,活性越强;②海南产荜茇挥发油含41个化合物,碳碳双键C=C的相对含量占绝对优势。结论碳碳双键C=C可能为荜茇挥发油清除自由基活性的必需官能团。

胡椒酸丁二醇单酯的合成及其降血脂作用研究

以蒙药药材荜茇为原料,经过分离、纯化得胡椒碱,进一步水解得胡椒酸.以胡椒酸和丁二醇为原料合成了胡椒酸丁二醇单酯,经13CNMR、1HNMR、UV、IR、EA表征后确证结构并做了一般药理实验,实验结果表明目标化合物具有良好的降血脂活性.

优化荜茇多糖的提取工艺及其抗氧化活性研究

目的:优化荜茇多糖的提取工艺,并研究其抗氧化活性。方法:在单因素试验基础上,利用正交试验法,优化提取条件,确定最佳提取工艺;通过ABTS、DPPH自由基清除实验,计算其清除率,初步评价荜茇多糖的抗氧化活性。结果:荜茇根多糖的最佳提取工艺条件为:提取温度100℃、提取时间120 min、提取次数3次,在此最佳工艺条件下荜茇多糖提取率为1.21%。抗氧化活性研究中,随着多糖浓度逐渐升高,ABTS自由基清除率最大达到100%,DPPH自由基清除率最大达到88.27%。结论:由正交试验法优化得到的荜茇多糖的提取工艺方便易操作,得到的荜茇多糖具有较强的抗氧化活性,可进一步深入研究。

胡椒酸1.6-己二醇双酯的合成、结构表征和降血脂活性研究

以蒙药药材荜茇为起始原料,经提取、分离、水解、酯化等过程,得到胡椒酸1,6-己二醇双酯,为一种新型的胡椒碱衍生物.通过红外光谱、碳氢核磁共振、紫外光谱和元素分析等分析手段,确证了该胡椒碱衍生物的化学结构,初步研究了其降血脂活性.结果表明胡椒酸1,6-己二醇双酯具有良好的降血脂和降血糖活性.

紫外可见分光光度法测定荜茇中胡椒碱的含量

目的使用紫外一可见分光光度法对荜茇药材中的胡椒碱进行含量测定，并与中国药典标准HPLC法测得的含量进行比较，建立准确可靠的紫外一可见分光光度法测定荜茇药材中胡椒碱含量的测定方法。方法采用紫外一可见分光光度法，溶剂为无水乙醇，检测波长为343nm。结果胡椒碱在0．398-7．952μg.ml-1范围内浓度与吸光度呈良好线性关系，（r=0．9995，n=6），平均加样回收率为98．93％，RSD为1．10％。与HPLC法测定结果进行配对样本t检验，结果P=0．384〉0．1，认为两种方法测定的结果无统计学意义。结论该方法操作简单，准确可靠，经济快捷，为荜茇药材的质量控制与质量评价提供简单可靠的实验方法与实验依据。

中医和蒙医临床应用荜茇异同浅析

比较中医药学和蒙医药学对荜茇的药性理论、临床应用等方面的相同之处和不同方面,以期拓展荜茇的临床应用。

荜茇醇提物对胰岛素抵抗综合征模型大鼠免疫功能影响的实验研究

目的观察荜茇乙醇提取物(Ethanol Extract of Piper LongumL.,EEPL)对胰岛素抵抗综合征(IRS)模型大鼠免疫功能的影响。方法采用高脂高糖高盐膳食造模,高脂饲料造模4周后,各组给予相应药物,给药8周后处死大鼠,于无菌条件下取大鼠脾淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK)和腹腔巨噬细胞(Mφ),采用中性红法检测Mφ吞噬功能,MTT法检测T、B淋巴细胞增殖活性和NK细胞的自然杀伤力。结果与模型对照组比较,EEPL高、中剂量组T、B淋巴细胞增殖率明显升高(P<0.05或P<0.01),EEPL各剂量组NK细胞杀伤率和Mφ吞噬能力明显提高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 EEPL具有改善IRS模型大鼠免疫功能的作用。

高效液相色谱法测定蒙药甘露益肝胶囊中胡椒碱的含量

目的：建立蒙药甘露益肝胶囊中胡椒碱的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法。应用Diamon-silC18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱;以甲醇-水（77∶23）为流动相;流速为0.8mL.min-1;检测波长为343nm;柱温为室温。结果：胡椒碱在0.0832-0.4992μg范围内,与峰面积具有良好的线性关系,r=0.9998;平均回收率为99.75%,RSD为2.54%（n=6）。结论：该方法精密度高,分离度好,可用于蒙药甘露益肝胶囊中胡椒碱的含量测定。

荜茇挥发油酶提取工艺响应面优化及其抑菌活性研究

目的:优选荜茇挥发油酶提取的最佳工艺条件,并对其抑菌活性进行研究。方法:以荜茇为研究对象,采用纤维素酶辅助水蒸气蒸馏法提取荜茇挥发油,运用Box-Behnken设计响应面法,以挥发油得率为响应值,考察酶添加量、酶解时间、酶解温度和酶解pH 4个因素对荜茇挥发油得率的影响,采用二项式方程拟合试验结果以确定荜茇挥发油提取的最优试验条件,并初步评价荜茇挥发油的抑菌活性。结果:荜茇挥发油最佳提取工艺条件为:酶添加量0.40%,酶解时间2.0h、酶解温度47℃、酶解pH5.0,在此条件下的荜茇挥发油得率为1.39%,对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌活性。结论:荜茇挥发油酶提取工艺简单、可行,所得挥发油具有一定的抑菌作用,该研究可为荜茇挥发油药食产品的进一步开发提供理论基础。

荜茇胡椒碱致畸试验研究

目的:了解蒙药荜茇降血脂有效成分胡椒碱对Wistar孕鼠的影响。方法:妊娠的雌性Wistar大鼠随机分成阴、阳性组及高、中、低剂量组每组12只,称重和编号。孕鼠于妊娠第7～16d分别灌胃胡椒碱(高剂量287.04mg/kg、中剂量71.76mg/kg、低剂量17.94mg/kg),阳性对照组于孕期11d一次腹腔注射环磷酰胺,于妊娠第20天处死。分析胚胎发育指标,检查有无外观畸形和骨骼畸形。结果与阴性对照组比较,胡椒碱高、中剂量组对孕鼠体重增长及胎鼠生长指标有显著性差异(P<0.05);高剂量组对胚胎吸收率有显著性差异(P<0.05);胎鼠外观畸形和骨骼畸形未见显著增加。结论:本实验剂量与条件下荜茇胡椒碱高、中剂量组使孕鼠体重增长、胎鼠生长指标缓慢或下降;高剂量组有胚胎吸收的影响;低剂量组没有显著影响。对胎鼠外观、骨骼和内脏均无显著影响。