荜茇提取物对CCl_(4)诱导大鼠肝纤维化的影响

目的探究荜茇提取物对四氯化碳(CCl_(4))诱导大鼠肝纤维化的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分成空白组、模型组、荜茇提取物低剂量组(16.6mg/kg)、荜茇提取物中剂量组(33.3mg/kg)和荜茇提取物高剂量组(66.7mg/kg),每组各12只。除空白组外,其余各组均给予皮下注射50%CCl_(4)-菜籽油溶液干预8周,建立肝纤维化模型。造模的同时给予模型组灌胃0.9%氯化钠溶液,荜茇提取物低、中、高剂量组连续灌胃治疗8周。实验结束后,测定大鼠血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷氨酰基转移酶(γ-glutamyltransferase,γ-GT),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6);苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)、Masson染色观察大鼠肝组织病理变化。提取RNA并采用qPCR技术检测大鼠肝组织中Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、TNF-αmRNA表达水平;提取蛋白采用Western blot法检测大鼠肝组织中CollagenⅠ、α-SMA、TNF-α蛋白表达水平。结果HE染色和Masson染色结果可观察到模型组大鼠肝脏纤维增生明显,大鼠血清中ALT、AST、γ-GT升高,血清中炎性介质TNF-α和IL-6分泌增多,CollagenⅠ、α-SMA和TNF-αmRNA和蛋白表达增高,荜茇提取物可明显改善肝纤维化程度,血清中ALT、AST、γ-GT下降,血清中炎性介质TNF-α和IL-6下降,肝组织中CollagenⅠ、α-SMA、TNF-αmRNA和蛋白水平明显下降。结论荜茇提取物对CCl_(4)诱导的大鼠肝纤维化有明显治疗作用,可通过抑制炎性细胞因子TNF-α和IL-6表达,可能通过抑制肝星状细胞激活,从而减少CollagenⅠ和α-SMA合成发挥抗纤维化的药效。

荜茇提取物中5个生物碱的含量测定与对垂体后叶素所致大鼠实验性心肌缺血的影响

目的建立荜茇提取物中5个生物碱含量测定方法,并评估该提取物对垂体后叶素所致大鼠实验性心肌缺血的影响。方法采用HPLC法同时测定5个生物碱的含量;采用经舌下静脉注射垂体后叶素造成急性心肌缺血模型,以造模前后T波变化绝对值、心率及其变化百分率为观测指标,评估荜茇提取物大、中、小三个剂量组对大鼠实验性心肌缺血的影响。结果3批荜茇提取物中胡椒碱平均含量为56.1%、49.7%、51.6%;N-异丁基-2E,4E-十八烷二烯酰胺平均含量为4.48%、4.21%、4.28%;几内亚胡椒碱平均含量为0.461%、0.378%、0.396%;荜茇明碱平均含量为1.73%、1.67%、1.70%;胡椒酰胺平均含量为0.554%、0.461%、0.493%。荜茇提取物大、中、小剂量组均有降低T波变化绝对值的作用;除大剂量组在个别时间点有降低心率的作用之外,其它各实验组在各时间点对心率变化率无显著影响。结论所建立的生物碱含量测定分析方法可准确测定荜茇提取物中5个生物碱的含量;药效试验证明荜茇提取物具有较好的抗心肌缺血活性。

荜茇有效成分提取及抗炎作用的研究

目的:对荜茇有效成分进行提取,观察其对二甲苯致小鼠耳廓炎症的作用。方法:采用溶剂法提取荜茇有效成分,石油醚、乙酸乙酯萃取分离,得到三部分药液。采用二甲苯引起小鼠耳廓肿胀致炎造模方法,观察并记录小鼠耳廓肿胀程度。结果:服用荜茇的乙酸乙酯萃取物的小鼠,左右耳肿胀程度与地塞米松对照品接近。结论:荜茇提取物具有明显的抗炎作用。

荜茇提取物对大鼠骨髓间质干细胞MSC的增殖作用及与化学官能团的关系

目的:观察荜茇挥发油和水溶性部分对大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)体外增殖的影响,并进一步探讨了与分子中化学官能团的关系。方法:使用密度梯度法分离大鼠骨髓间质干细胞,体外培养,经Brdu标记和CD44染色及两者双重染色鉴定后,观察在培养液中添加不同浓度荜茇挥发油及其水溶性部分的条件下MSC的生长变化。应用形态学、MTT法和5-溴脱氧尿嘧啶(5-Bromodeoxyuridine,Brdu)、增殖细胞核抗原(Proliferationcellnuclearantigen,PCNA)免疫细胞化学方法测定细胞增殖活性。结果:荜茇挥发油以浓度依赖方式促进MSC增殖活力和增加Brdu、PCNA阳性细胞数,与对照组比较有显著性(P<0.05)。经GC-MS检测,荜茇挥发油含C=C(50.66%)、-OH(27.02%)、多种官能团(5.05%)等;而荜茇水提物对MSC无增殖作用。结论:荜茇挥发油明显促进MSC的增殖,这种作用可能与分子中C=C、-OH等官能团有关。

超临界流体萃取法在荜茇质量控制中的应用

采用系统观察法对超临界流体萃取法的最佳萃取条件进行了考察 ,并与传统有机溶剂提取法进行比较 ,建立了超临界流体萃取法提取中药筚茇中有效成分的方法 ,结果最佳萃取条件为 :以乙醇作改性剂 ,于40℃、2 .6 0 8× 10 7Pa压力下 ,二氧化碳静态萃取 15 m in,动态萃取 5 m l。该法操作简便快速 ,提取完全 。

优化荜茇多糖的提取工艺及其抗氧化活性研究

目的:优化荜茇多糖的提取工艺,并研究其抗氧化活性。方法:在单因素试验基础上,利用正交试验法,优化提取条件,确定最佳提取工艺;通过ABTS、DPPH自由基清除实验,计算其清除率,初步评价荜茇多糖的抗氧化活性。结果:荜茇根多糖的最佳提取工艺条件为:提取温度100℃、提取时间120 min、提取次数3次,在此最佳工艺条件下荜茇多糖提取率为1.21%。抗氧化活性研究中,随着多糖浓度逐渐升高,ABTS自由基清除率最大达到100%,DPPH自由基清除率最大达到88.27%。结论:由正交试验法优化得到的荜茇多糖的提取工艺方便易操作,得到的荜茇多糖具有较强的抗氧化活性,可进一步深入研究。

荜茇醇提物对胰岛素抵抗综合征模型大鼠免疫功能影响的实验研究

目的观察荜茇乙醇提取物(Ethanol Extract of Piper LongumL.,EEPL)对胰岛素抵抗综合征(IRS)模型大鼠免疫功能的影响。方法采用高脂高糖高盐膳食造模,高脂饲料造模4周后,各组给予相应药物,给药8周后处死大鼠,于无菌条件下取大鼠脾淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK)和腹腔巨噬细胞(Mφ),采用中性红法检测Mφ吞噬功能,MTT法检测T、B淋巴细胞增殖活性和NK细胞的自然杀伤力。结果与模型对照组比较,EEPL高、中剂量组T、B淋巴细胞增殖率明显升高(P<0.05或P<0.01),EEPL各剂量组NK细胞杀伤率和Mφ吞噬能力明显提高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 EEPL具有改善IRS模型大鼠免疫功能的作用。

荜茇醇提物对胰岛素抵抗综合征模型大鼠血压和体重的影响

目的：观察荜茇醇提物（AEPL）对实验性胰岛素抵抗综合征（ILLS）模型大鼠血压和体重的影响。方法：采用高脂高糖高盐膳食制备IRS大鼠模型，喂养4周后，罗格列酮组（3mg/kg），荜茇醇提物高、中和低剂量组（分别为120mg/kg，60mg／kg，30mg/kg）分别按照设定药物、剂量同时灌胃给药，正常对照组和模型组灌胃给予等容积生理盐水。饮食条件不变，连续给药8周后，测定空腹血糖（FBC）、胰岛素水平（FINS）、并计算胰岛素敏感指数（ISI）=Ln[l／（FINS-FBS）]，动态检测血压和体重。结果：AEPL高、中和低剂量组明显增加IRS模型大鼠胰岛素敏感指数（P〈0．01），降低IRS模型大鼠血压（P〈0．01），AEPL高剂量组体重明显低于模型组（P〈0．05）。结论：AEPL具有改善实验性IRS模型胰岛素抵抗、预防血压和体重升高的作用。

Box-Behnken响应面法优化荜茇总生物碱的提取工艺研究

目的:优化荜茇总生物碱的提取工艺,为荜茇的深入开发和综合利用提供参考。方法:以总生物碱(指标性成分为胡椒碱)的提取率为考察指标,药材粉碎度、液料比、提取时间、提取次数为考察因素,采用单因素试验和Box-Behnken响应面法优化荜茇总生物碱的提取工艺,并进行3次(荜茇用量分别为1.00、10.00、100.00 g)验证试验。结果:最优提取工艺为粉碎度90目,加入32倍量的无水乙醇提取3次,每次提取170 min。最优工艺条件下,在荜茇用量为1.00、10.00、100.00 g时荜茇总生物碱的提取率分别为5.015、5.028、5.041 mg/g,与预测值5.025 mg/g的相对误差分别为0.20%、0.06%、0.26%,差异较小。结论:本研究优选的荜茇总生物碱的提取工艺合理、稳定、可行。

新型HF-LPME-HPLC对蒙药荜茇生物碱含量测定研究

研究建立一种新型中空纤维膜液相微萃取联合高效液相色谱(HF-LPME-HPLC)测定蒙药荜茇中生物碱含量,对影响HF-LPME萃取效率的各项参数进行优化分析。中空纤维膜材料为偏氟乙烯纤维膜(空隙率>50%),正辛醇为萃取剂,萃取温度为室温,振荡速度为200 r/min,萃取时间为128 min。建立了新型HF-LPME的萃取方法,对蒙药荜茇中胡椒碱的R>5,与传统萃取方法相比,富集倍数为40倍。线性范围分别为0.006~0.01 mg/mL,相关系数(r)为0.9999。相比于传统的萃取方法,该方法使用极少量的有机溶剂,可高效萃取并测定蒙药荜茇中生物碱的含量,打破了仅能在环境和食品中应用的限制,可以在各类化学基础实验中推广应用。

荜茇中胡椒碱提取工艺研究

目的:研究荜茇中胡椒碱的提取工艺。方法:以胡椒碱含量及其提取率为指标,比较不同提取方法对其的影响;采用均匀试验优选最佳提取工艺。结果:采用超临界CO2萃取法提取到的胡椒碱的含量及其提取率最高;最佳提取工艺为萃取压力27.5MPa,萃取温度50℃,解析压力6MPa,解析温度50℃,夹带剂为50%药材量的乙醇,动态萃取4h。结论:该提取工艺合理、可行,可为含荜茇制剂的工业化生产提供试验依据。

荜茇提取物对地鼠脂质代谢紊乱的影响

目的研究荜茇提取物对高血脂症地鼠血脂的影响。方法给予高脂饲料建立金黄地鼠高血脂模型,将动物随机分为正常对照组、模型组、辛伐他汀组、荜茇提取物组、去胡椒碱荜茇提取物组,除正常对照组外其余各组均给予高脂饲料喂养2或4周,每周测量体质量,分别在第2周末和第4周末用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、肝脏指数、肝脂质TC和TG。结果与正常对照组比较,模型组TC,TG和LDL显著增加(P<0.01),HDL显著降低;与模型组比较,荜茇提取物组在第2周和第4周均能显著降低TC,TG和LDL,显著升高HDL(P<0.05或P<0.01);去胡椒碱荜茇提取物组在第2周能显著降低LDL,升高HDL,在第4周有降低TC,TG,LDL的趋势,但差异无统计学意义,能显著升高HDL(P<0.05);各受试物组动物在前两周体质量显著低于模型组,而后2周差异无统计学意义;4周时荜茇提取物组能显著降低肝脂质TC,TG;各受试物组均能显著降低肝指数。结论荜茇提取物可显著改善高血脂症地鼠血脂水平,其中胡椒碱为其主要有效成分,且与其他各成分有协同降血脂作用。