以聚酮合酶13为靶点的新型抗结核先导化合物的发现

目的发现结核分枝杆菌Pks13(MtPks13)的抑制剂,为后续针对以MtPks13为靶点开发抗结核药物奠定了基础。方法表达MtPks13-TE蛋白并优化其酶活测定方法,构建MtPks13抑制剂高通量筛选模型;与海分枝杆菌表型筛选方法联用,对5万个化合物进行筛选,将获得的抑制剂IMB-7142进行IC_(50)以及酶动力学性质的测定;表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)实验以及分子对接模型研究阳性化合物IMB-7142与MtPks13-TE蛋白是否能发生相互作用及其作用位点;用菌液稀释法评价IMB-7142对结核标准株的抗结核活性。结果成功构建了MtPks13抑制剂筛选模型,并发现了一个对MtPks13有抑制作用,同时抑制海分枝杆菌生长的化合物IMB-7142,该抑制剂能与MtPks13-TE蛋白发生相互作用,具有较好的体外抗结核活性。结论成功构建了稳定的MtPks13抑制剂高通量筛选模型,并且应用该模型筛选得到的一个抑制剂同时具有抗结核活性,为后续开发以MtPks13为靶点抗结核药物提供了思路。