目的:探讨Plac8l1(placenta-specific 8 like 1)基因在小鼠睾丸组织的表达特征,及其与精子发生的相关性。方法:经生物信息学方法初步筛选到一个睾丸特异性表达候选基因Plac8l1,并推测其可能与小鼠精子发生相关;采用半定量RT-PCR和实时定...目的:探讨Plac8l1(placenta-specific 8 like 1)基因在小鼠睾丸组织的表达特征,及其与精子发生的相关性。方法:经生物信息学方法初步筛选到一个睾丸特异性表达候选基因Plac8l1,并推测其可能与小鼠精子发生相关;采用半定量RT-PCR和实时定量RT-PCR对Plac8l1表达的时空特异进行了研究;应用原位杂交技术对Plac8l1 m RNA在成年小鼠睾丸中的细胞类群表达特征进行初步研究;通过构建过表达PLAC8L1-EGFP重组蛋白质粒及生物信息学分析进行亚细胞定位研究与功能预测。结果:(1)Plac8l1是1个睾丸特异性转录基因。(2)在成年小鼠,Plac8l1只在睾丸和附睾组织发生特异性转录,而且睾丸中的表达水平明显高于附睾[睾丸vs.附睾=[(1.000±0.000)vs.(0.036±0.018),P=0.000]。(3)随着小鼠精子发生的起始,睾丸中Plac8l1转录水平逐渐升高(P=0.000)。(4)m RNA原位杂交结果显示Plac8l1 m RNA主要定位在成年小鼠睾丸中的间质细胞和精母细胞。(5)经生物信息学分析,PLAC8L1也有着一个类似于PLAC8的功能域,过表达重组蛋白显示PLAC8L1在细胞膜上聚集。结论:Plac8l1是1个睾丸特异性基因,可能与精子发生过程中的精母细胞分化相关;PLAC8L1具有1个富含半胱氨酸的PLAC8结构域,这一结构域可能介导了PLAC8L1在细胞膜上聚集并与其他蛋白相互作用,并可能在精母细胞分化中发挥重要作用。展开更多
文摘目的:探讨Plac8l1(placenta-specific 8 like 1)基因在小鼠睾丸组织的表达特征,及其与精子发生的相关性。方法:经生物信息学方法初步筛选到一个睾丸特异性表达候选基因Plac8l1,并推测其可能与小鼠精子发生相关;采用半定量RT-PCR和实时定量RT-PCR对Plac8l1表达的时空特异进行了研究;应用原位杂交技术对Plac8l1 m RNA在成年小鼠睾丸中的细胞类群表达特征进行初步研究;通过构建过表达PLAC8L1-EGFP重组蛋白质粒及生物信息学分析进行亚细胞定位研究与功能预测。结果:(1)Plac8l1是1个睾丸特异性转录基因。(2)在成年小鼠,Plac8l1只在睾丸和附睾组织发生特异性转录,而且睾丸中的表达水平明显高于附睾[睾丸vs.附睾=[(1.000±0.000)vs.(0.036±0.018),P=0.000]。(3)随着小鼠精子发生的起始,睾丸中Plac8l1转录水平逐渐升高(P=0.000)。(4)m RNA原位杂交结果显示Plac8l1 m RNA主要定位在成年小鼠睾丸中的间质细胞和精母细胞。(5)经生物信息学分析,PLAC8L1也有着一个类似于PLAC8的功能域,过表达重组蛋白显示PLAC8L1在细胞膜上聚集。结论:Plac8l1是1个睾丸特异性基因,可能与精子发生过程中的精母细胞分化相关;PLAC8L1具有1个富含半胱氨酸的PLAC8结构域,这一结构域可能介导了PLAC8L1在细胞膜上聚集并与其他蛋白相互作用,并可能在精母细胞分化中发挥重要作用。
