基于斑马鱼模型的紫河车冻干粉水提物抗衰老功效研究

目的应用斑马鱼模型评价紫河车冻干粉水提物(PHFAE)抗衰老的功效。方法将健康产妇新鲜胎盘冷冻干燥后碾磨为粉,并使用蒸馏水进行提取,制成紫河车冻干粉水提物(PHFAE)。发育8 h(8 hpf)的AB系斑马鱼使用PHFAE(0、1、10、25μg·mL^(-1))连续作用72 h,对其体内β-半乳糖苷酶进行染色。随后将AB系与皮肤荧光转基因斑马鱼均随机分成对照组、模型组和PHFAE(1、10、25μg·mL^(-1))组,对照组给予培养水,模型组给予0.5 mmol·L^(-1)H_(2)O_(2)溶液制备氧化损伤模型,PHFAE组同时给予H_(2)O_(2)与不同浓度PHFAE,连续作用72 h后,测定皮肤表面荧光斑点的数量;试剂盒法检测鱼体内活性氧(ROS)含量;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mn-sod的mRNA表达变化。结果与对照组比较,1、10、25μg·mL^(-1)的PHFAE组斑马鱼体内β-半乳糖苷酶的活性均显著降低(P<0.01);与模型组比较,1、10、25μg·mL^(-1)的PHFAE显著抑制H_(2)O_(2)诱导的角质细胞的死亡(P<0.01),明显抑制ROS的积聚,显著升高ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mn-sod的mRNA表达(P<0.01)。结论PHFAE通过调控ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mnsod基因的表达,提高了机体的抗氧化能力,进而发挥抗衰老之功效。