类质粒S-1与玉米和高粱基因组同源性的研究

在S型和N型玉米线粒体基因组中,存在S-1、S-2类质粒的同源序列。研究表明,在正常细胞质的线粒体DNA(mtDNA)主环(570kb)上,与S-1同源的这段序列位于6.9kb的BamH Ⅰ片段之中。此外,在N型玉米核基因组中,也存在与类质粒S-1的同源序列。

血清SAM/SAH在Hcy引起动脉粥样硬化基因组DNA甲基化中的作用

目的探讨血清S-腺苷甲硫氨酸(SAM)/S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)比值在同型半胱氨酸(Hcy)致载脂蛋白E基因敲除(Apo E―/―)小鼠血管动脉粥样硬化(As)B1重复序列DNA甲基化改变中的作用。方法 36只饲养4周龄Apo E―/―小鼠,随机分为三组:模型对照组、高蛋氨酸组、叶酸+Vit B12干预组,每组12只,分别给予不同饮食;另取健康4周龄雄鼠(SPF级C57BL/6J)12只作为正常对照组,饲以普通饮食。饲养15周后,HE染色观察血管内动脉斑块的形成,高效液相色谱检测血清中Hcy、SAM、SAH的水平改变,n MS-PCR检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块中Bl重复序列DNA甲基化改变。结果高蛋氨酸组血清Hcy与正常对照组相比升高约2.39倍(P<0.01),HE染色可见高蛋氨酸组中有动脉斑块形成;与正常对照组相比,模型对照组、高蛋氨酸组SAM/SAH增加了1.68倍和2.75倍(P<0.01);高蛋氨酸组B1重复序列DNA甲基化水平降低11.8%(P<0.05),且与SAM/SAH比值呈明显负相关(r=-0.3638,P=0.0210)。结论 ApoE―/―小鼠中B1重复序列发生DNA低甲基化改变,且与SAM/SAH呈负相关,提示血清SAM/SAH可作为一个判断血管As的生物学指标。

FGFR1在乳腺癌分子亚型中的表达及意义

目的探讨成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)在乳腺癌组织及正常组织中的表达及与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER2)、谷胱甘肽-S转移酶-π(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱα(TOPOⅡα)间的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测88例乳腺浸润性导管癌和30例正常乳腺组织中FGFR1的表达情况。结果 FGFR1在浸润性导管癌及正常乳腺组织中的表达率分别为37.5%、10.0%,两者间差异有统计学意义(P<0.05);FGFR1在GST-π阳性及阴性乳腺浸润性癌患者中表达率分别为60.4%、10.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。FGFR1在TOPOⅡα阳性及阴性乳腺癌患者中表达率分别为47.2%、22.9%,差异有统计学意义(P<0.05)。FGFR1在Luminal A型、Luminal B型、HER2过表达型、Basal-like型中表达率分别为25.0%、35.3%、56.3%、63.6%,FGFR1表达率在Luminal A和HER2过表达型、Luminal A和Basal-like型间差异有统计学意义(P<0.05)外,其他各组表达率间差异均无统计学意义(P>0.05)。FGFR1与ER、PR、HER2状态无相关性(P>0.05),但FGFR1与内分泌治疗耐药呈正相关(P<0.05)。结论 FGFR1在浸润性导管癌的不同分子分型中表达有差异,可能成为预测乳腺癌预后的重要指标之一。

ADLI大鼠肝组织DNA羟甲基化变化及其机制

目的探讨抗结核药物性肝损伤(ADLI)形成过程中DNA羟甲基化变化及其机制。方法选择SD大鼠96只,随机分为异烟肼组、对照组各48只。异烟肼组给予异烟肼55 mg/(kg·d)灌胃,对照组给予等体积蒸馏水灌胃。两组分别于灌胃3、7、10、14、21、28天各随机取8只,麻醉后心脏取血,检测血浆ALT、AST;处死后留取肝组织,HE染色,观察肝组织病理变化;采用RT-PCR法检测肝组织谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1)基因C、甲基胞嘧啶(5m C)、氧化成羟甲基胞嘧啶(5hm C)含量;采用ELISA法检测肝组织10-11易位蛋白1(TET1)蛋白表达,RT-PCR法检测TET1 mRNA表达。结果随着给药时间延长,异烟肼组肝损伤程度逐渐加重;其GSTP1基因C含量随着肝损伤程度加重呈下降趋势,而5m C含量先上升,至灌胃14天略有回落,随后继续上升;5hm C含量呈现下降趋势,至灌胃21天降至最低,灌胃28天时略有回升;而TET1蛋白水平及其mRNA表达与5hm C含量变化基本一致。结论 DNA羟甲基化可能参与了ADLI的发生。

三种DNA条形码对卤虫分类和进化的比较研究

DNA条形码已成为物种分类和进化研究的有效工具.本研究开发了3种DNA条形码用于卤虫物种鉴定和进化关系研究,并分析比较了其有效性.通过对中国亚洲区域卤虫参考中心储存的48份卤虫卵样本进行DNA条形码检测和系统进化树构建,进一步完成对卤虫种的分类鉴定.结果表明:COI基因和16S-12S rRNA序列均可作为有效的卤虫DNA条形码,在物种水平上显示出7个与现有卤虫拓扑结构相似的群体.但是基于ITS1基因构建的系统进化树与传统的卤虫分类并不一致.此外,COI和ITS1基因构建的系统发育树显示,Artemia persimilis位于进化树底部,表明A.persimilis可能是一个原始分支,该结果与前人基于16S-12S rRNA基因的研究结果一致.本研究表明,COI和16S-12S rRNA基因可作为一种更有效的DNA条形码用于卤虫的分类学和进化研究.

类风湿关节炎患者基因组DNA甲基化水平的初步研究

目的研究类风湿关节炎(RA)患者基因组DNA甲基化水平及影响基因组DNA甲基化水平的因素：并分析其与CD4^+T细胞表面LFA-1表达水平的联系,探讨基因组DNA甲基化水平变化与RA发病的关系。方法测定21例RA患者和20名正常对照的血浆Hcy、s-腺苷蛋氨酸(SAM)和s-腺苷同型半胱氨酸(SAH)的水平,CD4^+T细胞表面LFA-1的表达水平,以及亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因677位的多态性。结果①RA组与对照组相比,SAM明显降低,SAH明显升高,其差异有统计学意义；提示RA患者基因组DNA甲基化水平明显降低；②SAM与Hcy呈负相关,SAH与Hcy呈负相关,相关系数分别为-0．932、0．924,P＜0．01；③RA组CD4^+T细胞表面LFA-1表达较对照组增高,与Hcy呈正相关(r=0．557,P＜0．01),与SAM呈负相关(r=-0．651,P＜0．01)；④MTHFR基因677位C→T的突变不仅导致Hcy水平升高,同时使基因组DNA甲基化水平降低,使CD4^+T细胞表面LFA-1表达增多。结论①RA患者普遍有基因组DNA甲基化水平降低；②基因组DNA低甲基化可能与MTHFR基因的突变和高Hcy血症有关；③基因组DNA低甲基化可能通过影响RA患者的某些基因的表达异常参与疾病的发生发展。

S-腺苷甲硫氨酸对阿尔茨海默病小鼠淀粉样蛋白生成的影响

目的探讨S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM),对自发阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的APP/PS1双转基因小鼠淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)生成的影响。方法 7月龄APP/PS1双转基因AD小鼠10只,随机分为2组,每组5只,均饲喂叶酸缺乏饲料。干预组(SAM),每日灌胃400μl SAM溶液(13.2 mg/kg bw);对照组(Cont)每日灌胃400μl双蒸水。干预60 d后分别检测两组肝脏SAM、S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosylhomocysteine,SAH);脑组织海马区Aβ沉积,淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、早老素1(presenilin 1,PS1)蛋白表达,DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMTs)活性及APP、PS1基因启动子的甲基化水平。结果 SAM干预60 d后,SAM组小鼠脑海马区Aβ沉积及PS1蛋白表达均低于Cont组(P<0.05);与Cont组相比,肝脏SAM水平与细胞甲基化潜能升高,脑组织中DNMTs活性升高,促进APP、PS1基因启动子甲基化(P<0.05)。结论补充SAM可减少AD转基因小鼠脑海马区Aβ沉积,其可能机制是:SAM作为甲基供体,可增高AD小鼠甲基化潜能与DNMTs活性,降低PS1蛋白表达,从而抑制海马区Aβ沉积。