缺血性脑卒中发病早期血小板膜糖蛋白Ⅵ和血清白介素-6水平变化

目的:探讨血小板膜糖蛋白Ⅵ(GPVI)和白介素-6(IL-6)在急性缺血性脑卒中早期诊断中的意义。方法:分别采用流式细胞术和ELISA检测缺血性脑卒中患者和健康对照人群GPVI和IL-6水平。通过受试者工作曲线评估GPVI和IL-6的灵敏度、特异度及界值。结果:缺血性脑卒中病人血小板GPVI和血清IL-6水平显著高于对照组,差异有非常显著性(P<0.01)。缺血性脑卒中病人GPVI与IL-6水平呈正相关(P<0.01)。缺血性脑卒中病人GPVI的ROC曲线下面积为0.984,在最适诊断参考值17.76荧光强度(FI)时,诊断的灵敏度为90.00%,特异度为93.33%。IL-6的ROC曲线下面积为0.918,在最适诊断参考值0.55ng/L时,诊断的灵敏度为66.67%,特异度为86.67%。结论:血小板GPVI含量和血清IL-6水平升高与缺血性脑卒中有关。GPVI对缺血性脑卒中具有较高的诊断价值和准确度。

血小板胶原受体糖蛋白Ⅵ体外表达及功能研究

为了深入研究血小板胶原受体糖蛋白Ⅵ(glycoprotein Ⅵ,GPⅥ)功能及筛选特异性抑制剂,利用基因重 组技术体外表达GPⅥ胞外区片段。采用PCR方法扩增GPⅥ胞外区片段cDNA,构建表达载体pET-20b(+)-GP Ⅵ,转化大肠杆茵BL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导表达。表达产物经Ni-NTA Resin纯化、复性;使用Western blot方 法鉴定重组蛋白性质;采用胶原结合试验测定重组蛋白的胶原结合能力。结果表明,经测序证明PCR扩增产物与 GPⅥ胞外区cDNA序列完全一致;酶切分析证明成功构建了表达载体pET-20b(+)-GPⅥ;原核细胞经诱导表达后 出现新的相对分子量32 kD蛋白条带,诱导产物以包涵体形式存在;Western blot分析表明重组蛋白可与抗Penta- His抗体和抗GPⅥ多抗特异性结合;胶原结合试验表明重组蛋白拥有较好的生物学功能。结论:正确构建了GPⅥ 表达载体并成功表达重组蛋白,纯化、复性后的重组蛋白具有良好的抗原性和生物学活性。

冠心病患者血RDW、PLR及GPⅥ的测定及临床研究

目的探讨红细胞分布宽度(RDW)、血小板-淋巴细胞比值(PLR)及血小板胶原受体蛋白Ⅵ(GPⅥ)在冠心病中的水平及临床意义。方法选取2017年1—12月在我院治疗的冠心病患者104例,其中不稳定心绞痛37例(UAP组),心肌梗死32例(AMI组)和稳定型心绞痛35例(SAP组),同时选取健康自愿者40名作为对照组,检测各组RDW、PLR、GPⅥ等指标水平,同时采用Gensini评分评估各组病情。结果 UAP组和AMI组RDW、PLR、GPⅥ分别为(15.11±1.60)%和(15.03±1.89)%、(140.41±32.24)和(137.55±30.15)、(62.16±14.46) pg/mL和(60.70±15.51) pg/mL,明显高于对照组和SAP组;UAP组和AMI组肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)分别为(132.44±24.44)IU/L 和(140.58±30.22)IU/L、(0.94±0.10) g/L和(0.98±0.09) g/L、(6.22±1.24) g/L和(6.48±1.31) g/L,明显高于对照组和SAP组;AMI组Gensini评分为(70.24±9.87)分,明显高于UAP组和SAP组;UAP组Gensini评分为(48.44±10.46)分,明显高于SAP组,差异均有统计学意义( P <0.05);RDW、PLR与cTnI呈正相关( r =0.322和0.311, P <0.05);GPⅥ与cTnI、CK-MB、Gensini评分呈正相关( r =0.307、0.322和0.297, P <0.05)。结论冠心病患者RDW、PLR及GPⅥ明显升高,与心肌损伤标记物存在相关性,其中GPⅥ与冠状动脉病变程度有一定关系。

抗血小板药物研究进展及新靶点药物的发现

抗血小板药物是预防和治疗心肌梗死和缺血性脑卒中等动脉血栓疾病的主要药物,目前应用的该类药物主要包括阿司匹林、P2Y12受体拮抗剂、糖蛋白IIb/IIIa(GPIIb/IIIa)受体拮抗剂和蛋白酶激活受体(PAR1)拮抗剂等。尽管已有抗血小板药物能够在一定程度上降低动脉血栓疾病的发生,但出血副作用不容忽视。随着对血小板相关机制研究的不断深入,越来越多抗血小板药物新靶点被发现,包括蛋白酶激活受体(PARs)、血小板糖蛋白VI(GPVI)、磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)和蛋白二硫键异构酶(PDI)等。综述了已上市的抗血小板药物、目前临床应用存在的问题以及以新靶点研发的研究状况。