化香树果序乙醇提取物诱导CNE1、CNE2细胞发生methuosis死亡的机制

目的探讨化香树果序乙醇提取物(PSZ)诱导鼻咽癌细胞CNE1、CNE2发生methuosis死亡的机制。方法用1.0 mg/m L PSZ处理CNE1、CNE2细胞,观察细胞形态学变化,RT-q PCR、Western blotting检测PSZ干预后Rac1基因和蛋白表达水平。EHT 1864抑制两组细胞Rac1表达,观察化香树果序醇提物对CNE1、CNE2细胞的作用。结果 CNE1、CNE2细胞经PSZ处理后,细胞质出现大量空泡,空泡相互融合,不断增大,最后细胞膜破裂,细胞核没有发生明显的变化,这种形态学改变符合methuosis细胞死亡方式,Rac1在基因和蛋白水平表达均增加。EHT 1864抑制细胞Rac1表达后,PSZ引起的methuosis死亡现象消失。结论 Rac1是PSZ诱导人鼻咽癌细胞CNE1、CNE2发生methuosis死亡的关键靶点。

超声法提取化香树果序中黄酮类化合物工艺

研究以化香树果序为原料、乙醇为溶剂,超声提取黄酮类化合物工艺过程的最优条件。在单因素实验基础上通过响应面实验优化乙醇体积分数、超声时间和料液质量体积比等。首次从化香树果序中提取分离出了黄酮类化合物,并得到了超声提取的优化条件。此法与传统的热回流相比,最大的特点是提取时间短,研究结果对化香树果序在药物领域的深入开发提供了一定的理论基础和参考。

化香树果序中总黄酮不同提取方法对比研究

以化香树果序为原料,对水提醇沉法、乙醇回流提取法、超声提取法等三种方法提取黄酮工艺过程进行了研究,结果表明乙醇回流提取法具有提取率高、操作简便、成本低等特点。并通过响应面实验得到了乙醇回流提取法的最优条件为:温度60℃,提取时间4.5h,提取次数三次,醇浓度70.00%,料液比1:10;黄酮提取率4.25%。

化香树果序化学成分研究

目的：研究化香树果序的化学成分。方法：采用各种色谱方法分离纯化,通过光谱分析鉴定化合物结构。结果：从化香树果序的氯仿部位和乙酸乙酯部位分离鉴定了11个化合物,分别为：正三十二烷（1）、熊果酸（2）、二十六烯（3）、β-谷甾醇（4）、胡萝卜苷（5）、2,5,8-三羟基-3-甲氧基-1,4-萘醌（6）、3,3＇-二甲氧基鞣花酸（7）、鞣花酸（8）、4＇-羟基异黄酮-7-O-β-D-半乳糖苷（9）、3,3＇-二甲氧基鞣花酸-4＇-O-β-D-木糖苷（10）、没食子酸（11）。结论：其中,化合物1、3~6、9、10为首次从该属植物中分离得到,化合物1~6、9、10为首次从该植物中分离得到。

大孔吸附树脂纯化化香树果序总黄酮工艺研究

以吸附量和解吸率为指标对9种大孔吸附树脂进行对比,H-327B是分离纯化化香树总黄酮的理想树脂;热力学、动力学研究表明,Langmuir模型描述化香树果序黄酮在大孔树脂上的吸附规律更为适宜,该吸附属单分子层吸附,提高温度有利于吸附的进行,吸附过程可自发进行;对吸附?解吸工艺条件优化研究表明:当上样质量浓度为8.9 mg/mL、流速为3 BV/h时,H-327B型树脂对化香树果序总黄酮的吸附量较大。采用体积分数90%乙醇水溶液进行洗脱时,用5 BV乙醇洗脱,解吸率达到65%。

响应面法优化化香树果序多酚的提取工艺研究

目的:确定化香树果序中酚类化合物的提取方法并得到最佳提取工艺条件。方法:以化香树果序为原料,在单因素实验基础上根据中心组合(Box-Benhnken)实验设计原理,对提取温度、溶剂浓度、料液比3个影响显著因素采用三因素三水平的响应面分析法对酚类化合物的工艺过程进行优化。结果:得到最佳提取工艺条件为提取温度77℃,溶剂浓度55%,液料比C=14 mL/g,多酚提取率为3.746%。结论:首次从化香树果序中提取分离出了多酚类化合物,通过实验分析得到一条最佳的提取工艺路线。

RP-HPLC测定化香树果序中没食子酸的含量

目的:建立化香树果序中没食子酸含量测定的方法。方法:采用色谱柱为HypersilL C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇:0.035%磷酸溶液(5:95)为流动相,流速为1 ml·min^(-1),柱温为25℃,270nm为检测波长。结果:没食子酸在0.25～8.00μg·ml^(-1)(r=0.999 9)范围内呈良好线性关系,平均回收率为99.8%,RSD为1.1%(n=9)。不同批号没食子酸含量差异较大。结论:该法便捷、灵敏、准确、重复性好,为化香树果序药材的质量提供科学依据。

化香树果序对EB病毒抗原表达的抑制作用及其细胞毒作用

目的观察化香树果序对EB病毒壳抗原表达的影响及对人鼻咽癌CNE2细胞的细胞毒作用。方法用间接免疫酶法测定化香树果序对B95-8细胞病毒壳抗原(virus capsid antigen,VCA)表达的影响;用MTT法测定其对人鼻咽癌CNE2细胞的细胞毒作用。结果化香树果序在无毒浓度下对正丁酸钠激发的B95-8细胞EB病毒VCA表达有明显抑制作用;在高浓度时对人鼻咽癌细胞CNE2的生长有较强抑制作用。结论化香树果序能抑制EB病毒抗原的表达,对人鼻咽癌CNE2细胞具细胞毒作用,值得进一步研究。

化香树果序的生药学研究

对化香树果序的生药性状、组织结构、粉末特征、化学成分进行初步研究,为化香树果序的鉴定,质量研究及开发应用提供科学依据。

基于PB-CCD设计的化香树果序碱提酸沉提取工艺

目的:基于二水平析因-星点设计法(PB-CCD)优化化香树果序碱提酸沉提取工艺。方法:以鞣花酸含量为评价指标,采用PB设计试验,研究液料比、提取时间、提取温度、碱提液pH和酸沉液体积分数对化香树果序中鞣花酸提取率的影响;采用CCD设计对筛选出的因素进一步优化,确定化香树果序碱提酸沉提取的最佳工艺。结果:化香树果序碱提酸沉提取的最优工艺条件为液料比13∶1、提取时间80 min、提取温度85℃、碱提液pH 13、酸沉液体积分数10%。结论:基于PB-CCD设计确定的化香树果序碱提酸沉的最佳提取工艺模型预测性良好、提取工艺简便可行。

化香树果序挥发油化学成分分析

目的:对化香树果序中挥发油进行化学成分研究。方法:采用水蒸汽蒸馏法从化香树果序中提取挥发油,用气相色谱-质谱法对化学成分进行分析,用峰面积归一化法得到各组分在挥发油中的相对含量。结果:测得挥发油的含量为0.10%。从化香树果序挥发油中鉴定了27种化学成分,占挥发油总成分的92.10%。主要成分为γ-桉叶醇(18.92%)、β-桉叶醇(18.74%)、五十四烷(8.64%)、正十六酸(7.87%)、十六酰胺(5.04%)、十八酰胺(4.84%)、香木兰烯(4.23%)、三十二烷(3.99%)等。结论:化香树果序挥发油中的主要成分是倍半萜类化合物,约占挥发油总量的37.66%。

化香树果序多糖抗氧化性

从化香树果序中提取纯化多糖,研究了它对DPPH·自由基、超氧自由基、羟基自由基的清除作用,以此来评价该多糖的抗氧化活性。研究发现化香树果序多糖具有显著的抗氧化性,其抗氧化性研究有待遇于进一步开发应用。