平菇与香菇属间原生质体融合的研究

通过分离和出菇试验,获得了纯化的平菇(Pleurotus sapidus)和香菇(Lentinus edodes)单孢系。用溶壁酶去细胞壁制备成原生质体。以PEG为融合诱导剂,诱导两者原生质体融合。1988年获得了可以出菇的融合子。这些融合子形成的子实体,从形态、生长习性和菌伞的颜色特征上都与双亲有明显的差异。大部分氨基酸含量介于双亲之间。同功酶分析也显示出融合子呈现与双亲不同的酶带。融合子出现的上述新性状,可能是平菇与香菇的原生质体基因重组的结果。

电击法介导的紫孢侧耳原生质体转化

使用基因脉冲导入仪成功地将糙皮侧耳DNA导入紫孢侧耳单核原生质体内,获得了具有“锁状联合”特征的双核转化菌株T_1和T_2。转化率为8.2×10^(-5),转化比为3.6％。酯酶同Ⅰ酶分析结果表明,转化菌株除具有受体菌的酶带外,还存在供体菌的酶带,由此证明转化菌株确为紫孢侧耳和糙皮侧耳DNA重组的产物。转化菌株子实体形态也发生了变化。两菌株子实体均不释放孢子;T_1菌柄中生;T_2成熟子实体菌盖中部易长出菌丝。

原生质体诱变选育无孢平菇

用紫外线照射紫孢侧耳（Pleurotussapidus）双核菌丝原生质体，再生后筛选生长势好的菌株，通过出菇试验得到了生产性状与紧孢侧耳一致的无孢和少孢平菇新品种．

紫孢侧耳平菇原生质体再生无性系的变异性研究

用溶壁酶制备出平菇原生质体，经过原生质体再生，获得３５６个无性系菌株。从中随机选出３１个原生质体Ｆ１代无性系，２５个原生质体Ｆ２代无性系进行一些性状研究。所测的３１个无性系Ｆ１代菌株都产生了新的遗传变异。所测的５６个无性系中有３１个茵株的生物效率显著高于亲株。所以，原生质体再生无性系的变异，可以丰富食用菌的品种资源，为高技术育种开辟了一条新途径。

侧耳与香菇属间原生质体融合育种研究

侧耳、香菇皆属四极性异宗结合食用菌,其异核双核菌丝体均具“锁状联合”形态标记。本研究以PEG-Ca^(++)为诱导剂,以紫孢侧耳和香菇Cr-20的原生质体再生单核体为亲株,进行侧耳与香菇的属间原生质体融合,结果从1022个融合再生体中镜检出16个具锁状联合遗传标记的融合株。对1～4号融合株与亲株进行的拮抗反应、双单交配、过氧化物同功酶谱分析及菇形特征对比皆证明融合株确具双亲杂合体特征。出菇验证表明,融合株菌丝体长速均快于亲株,出菇期早,菇产量近于或高于亲株侧耳的水平。

香菇与平菇的融合子后代性状分离研究

本项研究对香菇和平菇进行单孢分离,对二者单孢经过三纯化实验,淘汰有锁状联合和出菇的非单孢无性系。将纯化的香菇和平菇单孢系制备成原生质体,用PEG作聚合剂,使香菇和平菇单孢系的原生质体进行异源融合。经过生物技术操作后获得了属间融合子。融合子F_1代出现性状分离。统计融合子F_3代形态性状,有97％为中间性状,出现2％的平菇性状,仅有1％的香菇性状。经过融合子1—3代性状观察,中间性状基本不稳定,而生物效率低于平菇。

平菇遗传转化的研究进展

平菇是重要的食用担子菌之一,具有广阔的研究应用前景。综述了近年来平菇遗传转化体系的研究进展。