新疆野生阿魏菇复合群的种群结构及地理分布

【目的】研究新疆野生阿魏菇复合群的种群组成、地理分布和自然保有量等,为野生阿魏菇资源保育和开发利用提供理论支撑。【方法】采用普查和样方调查相结合方法,采集新疆野生阿魏菇复合群资源,利用分子生物技术对收集菌株进行种类鉴定,运用统计学分析,阐明新疆野生阿魏菇复合群资源的种群组成、地理分布和自然保有量等。【结果】新疆野生阿魏菇复合群资源由白灵侧耳和阿魏侧耳两个种群组成,白灵侧耳为优势种群,占鉴定总数97.23%,阿魏侧耳为弱势种群,占鉴定总数的2.77%;野生白灵侧耳种群广泛分布在新疆石河子市、托里县、裕民县、额敏县、福海县、富蕴县和青河县等7个区域,而野生阿魏侧耳种群仅分布在托里县、裕民县和额敏县等3个区域;野生白灵侧耳资源自然保有量总体呈下降趋势,且各分布区差异明显,其中石河子市、托里县和额敏县下降幅度最大,样方内年度采集数量最低年份只有0~1株,保育形势严峻;野生阿魏侧耳资源自然保有量极少,5年内在3个分布区样方内仅采集到3株野生菌株,保育形势尤为严峻。【结论】新疆野生阿魏菇复合群由白灵侧耳和阿魏侧耳2个种群组成,白灵侧耳为优势种群,且为广布种;野生白灵侧耳和阿魏侧耳资源自然保有量总体均呈下降趋势。

中国栽培白灵菇学名的订正

采用形态学方法对采集于新疆野生的阿魏蘑标本进行分类鉴定,结果表明其形态学特征符合刺芹侧耳托里变种Pleurotus eryngii var.tuoliensis的特征范围,它与欧洲已报道的Pleurotus nerbrodensis有明显差异。此外本研究还采用分子生物学方法对从该野生样品分离的菌株CCMSSC 02514进行了rDNA ITS序列分析,结果表明它与我国栽培白灵菇菌种CCMSSC00973、KH5和AFRL6002完全相同,以此构建系统发育树,将我国栽培白灵菇种质与意大利的P.nebrodensis、P.eryngii var.ferulae以及来自荷兰的P.eryngii等分为两组。因此,形态学和rDNA ITS序列分析结果支持我国栽培的白灵菇与欧洲的P.ne-brodensis为不同种,我国的白灵菇是刺芹侧耳独立进化的一个分支,其名称应该为刺芹侧耳托里变种P.eryngii var.tuoliensis。

优化氮源种类及碳氮比对阿魏菇液体种生长的效应

[目的]阿魏菇液体培养过程中氮源种类及碳氮比的优化研究,为阿魏菇生理活性物质代谢、分析与提取提供技术保障,同时为野生菌种质资源的保护、菌株保存和驯化提供方法。[方法]选择6种有机氮源、2种无机氮源以及8个碳氮比梯度,采用液体培养技术通过菌球直径、菌球密度、菌丝生长量等生物量指标测定,反映阿魏菇液体培养的氮代谢特性。[结果]不同氮源种类及浓度显著或极显著影响了阿魏菇液体种的生长。黄豆、黄豆芽是阿魏菇液体种培育的良好氮源,菌球密度分别达到26.67%和24.00%,是对照的145%和131%。其次是蛋白胨、酵母片,甘氨酸与硫酸铵、硝酸钾之间差异不显著,尿素是最差的氮源。2.5%黄豆芽和黄豆均可以获得阿魏菇液体种最高的生物量,是可以取代蛋白胨的有机氮源。适宜阿魏菇液体种生长的碳氮比是20:1。[结论]阿魏菇液体种培养过程中存在氮源的选择性差异,天然有机氮源优于其他形式的各种氮源,同时氮源浓度的变化极显著影响了液体种的生产能力,阿魏菇液体种培育过程中对氮源浓度的要求相对较高。

白灵菇瓶栽工艺培养料配方筛选

在瓶栽工艺工厂化生产条件下,分别以玉米秸秆、棉籽壳、玉米芯为主料,筛选白灵菇(Pleurotus eryngii var.tuoliensis)高产优质配方。结果表明,培养料配方对白灵菇菌丝生长和子实体产量具有显著影响。玉米秸秆为主料时产量最低,棉籽壳作为培养料主料,产量较高,玉米芯为主料,经过复配后可以达到较高产量。综合考虑成本后,配方P4是白灵菇瓶栽工艺工厂化生产中的优选配方。

不同搔菌方式对瓶栽工艺白灵菇子实体形成的影响

在瓶栽工艺工厂化生产条件下,研究了不同搔菌方式对白灵菇(Pleurotus eryngii var.tuoliensis)子实体形成和产量的影响。结果表明,不同搔菌方式对白灵菇子实体形成早晚和数量影响显著,搔菌方式3(打开瓶盖,用专用工具将老菌种清理干净,在料面中间搔1个点孔)和方式5(打开瓶盖,不清理料面老菌种,用专用工具在料面形成2个点孔)使白灵菇子实体形成早,疏蕾强度低,是较好的搔菌方式。不同搔菌方式对单瓶白灵菇产量没有影响。

白灵菇瓶栽工艺工厂化生产专用品种筛选

在瓶栽工艺工厂化生产条件下,从20个白灵菇(Pleurotus eryngii var.tuoliensis)菌株中筛选出2个长柄型、2个马蹄型、16个贝壳型子实体菌株。其中长柄型品种具有发菌快、后熟时间短、出菇早的特点。综合评价表现优良的是白灵2号、白灵9号、白灵18号和中农1号共4个菌株。

华东地区阿魏菇工厂化生产的相关技术

阿魏菇(Pleurotus eryngii var.tuoliensis)属于珍稀高档食用菌,在华东消费市场深受欢迎。但华东地区气候四季分明,夏季高温和冬季严寒持续时间长,对阿魏菇等低温出菇种类周年工厂化生产的能耗要求非常高。立足工厂化节能生产,从厂房建造、设备选用、菌株和管理工艺优化等方面入手,探讨华东地区阿魏菇工厂化节能生产技术,以供广大食用菌工厂化生产者参考。

白灵侧耳栽培基质C/N研究

分别以尿素和麦麸为补充氮源,调节栽培基质的C/N,对不同C/N下白灵侧耳(Pleurotus eryngii var.tuoliensis)菌丝生长速度、子实体发育和产量等指标进行测定和数据分析。结果表明,栽培基质的C/N在30:1~51:1范围内菌丝生长速度较快,但添加尿素时菌丝生长速度更快;在相同C/N条件下,添加麸皮的配方比添加尿素的配方现蕾时间更短、生物学效率更高;在添加麸皮的配方中,生物学效率随着C/N的降低(麸皮添加量增加)而升高,但当C/N为25:1时出菇率仅为73.3%,最佳C/N为36:1~41.5:1;在添加尿素的配方中,C/N为36:1时,生物学效率最高,达到52.15%,出菇率为96.67%。

不同碳源对7个白灵菇品种菌丝生长的影响

以7个不同来源白灵菇(Pleurotus eryngii var.tuoliensis)品种为供试菌株,通过对其菌落直径、菌丝颜色、菌丝生长速度及液体菌种摇瓶发酵菌丝产量进行比较,探讨6种碳源对白灵菇菌丝生长的影响。研究结果表明,白灵菇有较广的碳源谱。从菌丝生长速度来看,7个白灵菇菌株总体以麦芽糖、可溶性淀粉、甘露醇、蔗糖为碳源时菌丝生长最快,对葡萄糖和乳糖利用较差;引入生长指数进行分析,葡萄糖、麦芽糖是白灵菇菌丝生长的最佳碳源,其次是甘露醇和可溶性淀粉,对蔗糖和乳糖利用最差。从菌丝生物量看,以甘露醇和可溶性淀粉为碳源时发酵液中获得的菌丝干重最大,其次是蔗糖和麦芽糖,葡萄糖和乳糖最低。

中国野生白灵菇遗传多样性的SCoT分析

对来自新疆裕民、托里、青河等3个县的63株野生白灵菇(Pleurotus eryngiivar.tuoliensis)的遗传多样性进行了SCoT分析。9条SCoT引物共产生147条带,多态性条带比率为92.52%,平均多态性条带数为15.11。总样本的Nei’s基因多样性指数为0.261,Nei’s遗传一致度0.612～0.932,平均为0.772,这表明中国野生白灵菇具有丰富的遗传多样性。聚类分析和主坐标分析结果高度相似,几乎将供试样本完全按地理分布划分为3大类群,表明野生白灵菇的遗传多样性与地理分布密切相关。遗传距离分析表明,3个居群中,裕民居群与托里居群的亲缘关系最近,遗传距离为0.086;托里居群与青河居群的亲缘关系最远,遗传距离为0.156。相关性分析表明,遗传距离与直线地理距离和经向地理距离均不存在相关性,而与纬向地理距离存在明显的正相关关系。

中国五种重要食用菌学名新注

基于最新的分子系统发育分析研究、《国际藻类、菌物和植物命名法规》和《汉语学名法规》,对毛木耳、玉木耳、金针菇、阿魏侧耳和白灵侧耳等5种重要食用菌的学名进行了解析和介绍,建议使用下述规范名称:毛木耳Auriculariacornea Ehrenb.,玉木耳Auricularia cornea Ehrenb.,金针菇Flammulina filiformis (Z.W. Ge et al.) P.M. Wang, Y.C. Dai, E. Horak&Zhu L. Yang,阿魏侧耳(阿魏菇)Pleurotus eryngii var. ferulae (Lanzi) Sacc.,白灵侧耳(白灵菇)Pleurotus tuoliensis (C.J. Mou)M.R. Zhao&Jin X. Zhang。虽然拉丁名称发生了很大变化,但为了保持汉语学名的稳定性,上述5种食用菌的汉名不变。

白灵侧耳栽培种质对高温胁迫的反应研究

本文以"中农一号"、"华杂13"、"中农翅鲍"和"CCMSSC 00488"4个白灵侧耳菌株为材料,通过测定高温胁迫下菌丝体内硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric acid-reactive substances,TBARS)和蛋白质羰基(protein carbonyl,PCO)含量,观察适温培养和高温胁迫后恢复培养时菌落的生长速率、生长势和菌丝形态特征,研究不同白灵侧耳栽培种质对高温胁迫的反应。研究表明,白灵侧耳不同栽培种质对高温胁迫的反应在氧化损伤程度、菌落形态和菌丝形态特征上都有变化,不同材料的高温伤害程度有着较显著的差异。4个材料高温胁迫条件下TBARS和PCO含量均显著升高,但是升高程度不同,按照TBARS和PCO含量多少排序,依次为CCMSSC 00488>华杂13>中农翅鲍>中农一号。高温胁迫处理后恢复生长需要的时间依次为:CCMSSC 00488>华杂13>中农翅鲍、中农一号;菌落生长势:中农一号>中农翅鲍=华杂13>CCMSSC 00488;菌丝形态特征:菌丝表面增长率、菌丝顶端细胞表面积、菌丝直径和菌丝体分支频率均显著降低,但降低程度以中农一号为最大。菌丝体分支频率与菌落生长势相对应。

不同温度条件下白灵菇、杏鲍菇及其杂交菌株的生长情况

对5份白灵菇菌株、5份杏鲍菇菌株和3份杂交菌株进行了栽培出菇试验,比较分析了不同温度条件下白灵菇、杏鲍菇及其杂交菌株的生长情况。试验结果表明,在4~24℃范围内,白灵菇与杏鲍菇的菌丝体生长速度与温度的变化呈正相关,最适合菌丝体生长的温度为22℃。4~24℃范围内,白灵菇的原基形成周期与温度呈V型曲线变化,12~14℃原基形成周期最短;杏鲍菇的原基形成周期与温度呈负相关,随着温度的升高原基形成周期变短,22~24℃原基形成周期最短。3份杂交菌株11D、53D、70D的原基形成周期与其对应亲本白灵菇菌株的原基形成周期差异极显著(P<0.01)。白灵菇子实体形成最短周期所需温度为12~14℃,而杏鲍菇子实体形成最短周期所需温度为22~24℃,3份杂交菌株11D、53D、70D的子实体形成周期与其对应亲本白灵菇菌株的子实体形成周期差异极显著(P<0.01)。

白灵侧耳漆酶分离纯化及其酶学性质研究

为了探索白灵侧耳Pleurotus eryngii var.tuoliensis漆酶性质,以白灵侧耳菌株00485为试验材料,从发酵液中分离纯化得到胞外漆酶并对其酶学性质进行测定。纯化流程依次为DEAE-Cellulose阴离子交换层析,CM-Cellulose阳离子交换层析,SP-Sepharose强阳离子交换层析以及Superdex 75凝胶过滤层析,获得胞外白灵侧耳漆酶(Pn Lac)。SDS-PAGE检测结果表明Pn Lac为65k Da的单一蛋白。Pn Lac经过胰蛋白酶水解得到3种肽段,经过NBCI-BLAST后发现它们与糙皮侧耳、环柄韧伞、刺芹侧耳等的漆酶具有同源性。底物为2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)时该种漆酶的最适反应温度和p H分别为50℃和3.0,Ca2+和Hg2+能够抑制它的活性,相反地Cu2+和Mn2+能够提高它的活性,米氏常数Km和Vmax分别是0.17mmol/L和1.76OD/min/U。

白灵菇杂交子的筛选及鉴定

以白灵菇2个品种"中农1号"和"中农翅鲍"为亲本,采用镜检、拮抗、酯酶同工酶及原基诱导等方法,研究了150对杂交组合菌株特性。结果表明:150对杂交组合菌株中,99个菌株生长较快,有锁状联合,75个与2个亲本有明显拮抗线,且具与2个亲本菌株的典型酯酶同工酶条带,确定是杂交菌株,其中50个杂交子具有出菇能力。