刺芹侧耳细菌性软腐病病原菌分离鉴定

刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)细菌性软腐病,主要侵染子实体,可给生产造成严重损失。本研究从刺芹侧耳主产区福建和河北采集罹病样品,分离到3株病原菌菌株ES4-1、ES1-9和ES1-10,病原菌菌落乳白色,直径约1mm,中间稍隆起,表面光滑,湿润,边缘整齐。革兰氏阴性,菌体短杆状,0.5~1.0μm×1.0~2.0μm,以单生为主,有时成双,无芽孢,无荚膜,兼性厌气,氧化酶阴性。进一步进行16SrDNA序列分析以及gyrB、rpoB、atpD、infB 4个管家基因的多位点序列分析,构建系统发育树。结果表明引起刺芹侧耳细菌性软腐病的病原在分类上属于欧文氏菌属,暂定为Erwinia sp.。

高温平菇种质资源的ITS-RFLP分析

目前高温平菇菌种存在混乱。本研究对16个供试菌株进行ITS特异性扩增,得到约680 bp的单一片段。根据遗传差异选择菌株进行ITS克隆测序,经ITS序列和ITS-RFLP分析可知:16个菌株分为二个种类,第一类由Pl.cy0002、Pl.cy0009、Pl.cy0012、Pl.cy0014和Pl.cy0015等5个菌株组成,为肺形侧耳;第二类是由剩下的11个菌株组成,是糙皮侧耳类,其中菌株Pl.cy0001和Pl.cy0006的ITS序列与其它菌株存在差异。研究结果表明基于ITS序列建立的ITS-RFLP可应用于高温平菇种的鉴定。

侧耳菌GH196木质纤维素降解酶系的研究

以一株从腐朽竹子上分离得到的侧耳菌(Pleurotus sp．)GH196为产酶菌,研究了其 在静置和振荡两种液体培养方式下的木质纤维素降解酶系的产生。结果表明:在含有稻草和 麦麸的液体培养基中生长,可以产生木聚糖酶、纤维素酶和依赖锰过氧化物酶-漆酶型(MnP- Laccas型)木质素降解酶。振荡条件可以促进菌丝生长,有利于多糖水解酶的产生,其中以木聚糖酶的合成为 主;150 r／min振荡培养5 d,木聚糖酶酶活达到44．7 U／mL。

平菇津平90特性及栽培技术

介绍了平菇菌种津平 90的特征特性、生长条件及其高产栽培技术。

一株野生侧耳属菌株的分离鉴定与生物学特性

采用组织分离的方法从野生侧耳属菌株（Pleurotu ssp.）子实体上分离得到菌株XZG-ts,以其基因组为模板扩增获得该菌株的ITS序列,序列分析结果表明,菌株XZG-ts与Gen Bank中来自于澳大利亚、印度和中国云南的3个肺形侧耳菌株聚为一簇,组内核苷酸一致率为100%,而与侧耳属其他4个种的10个菌株核苷酸一致率为98.10%~99.06%,依此结果将XZG-ts菌株鉴定为P.pulmonarius。进一步研究了不同碳源、氮源、碳氮组合、温度及p H值对菌株XZG-ts菌丝生长的影响,结果表明,最适碳源为果糖,氮源为酵母膏,最佳碳氮源组合为果糖1%、麦芽糖1.0%、酵母膏0.2%、蛋白胨0.3%,最适生长温度为25℃,最适p H值为6。

“莱牧一号”牧草栽培平菇的关键技术研究

随着我国食用菌产业的发展壮大,栽培料需求持续攀升,传统的木屑、棉籽壳等栽培料已经不能满足产业的持续发展。"莱牧一号"(Pennisetum sp.)牧草为莱索托引进的新品种,生物量大,可作为食用菌栽培的原料。现主要介绍"莱牧一号"牧草栽培平菇的技术措施,以期为平菇栽培提供新原料,促进平菇产业的可持续发展。

醋糟代替棉籽壳栽培平菇的研究

本文从试验中得出，以醋渣全部或部分取代棉籽壳栽培平菇的配料技术和适宜的平菇菌种。

利用侧耳属真菌制造生物量的研究

利用侧耳属真菌制造生物量的研究陈启武夏群香（湖北农学院食用菌研究室，荆州４３４１００）ＳｔｕｄｙｏｎＭａｎｕｆａｃｔｕｒｅｏｆｔｈｅＢｉｏｍａｓｂｙＢａｓｉｄｉｏｍａｔｅ．ＣｈｅｎＱｉｗｕ，ＸｉａＱｕｎｘｉａｎｇ（ＤｅｐａｔｍｅｎｔｏｆＡｇｒｏｎｏ...

一种竹腐朽菌胞外木聚糖酶的分离和特性研究

从腐朽的竹子上分离得到一株产木聚糖酶侧耳真菌Pleurotus sp.GH196,研究了其液体振荡培养的产酶条件。适宜碳源是1%稻草粉与1%麸皮组成的复合碳源,氮源是0.2%NH4NO3。经过硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sephadex A-25离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤三步纯化得到木聚糖酶的一个主要酶活组分A。该木聚糖酶在40～50℃、pH 4.0～5.5可以保持较好的稳定性,酶活最适反应条件是温度55℃、pH 4.5。

平菇优良菌种（株）筛选

本文就４８株平菇菌种进行了栽培试验，综合产量、品质、抗逆性等栽培性状筛选出适于我省生产栽培用高、中、低温菌种８株即低温型平菇Ｃ１１、Ｃ３０、Ｃ４２、Ｃ４８，中温型平菇Ｃ１６，Ｃ３８，高温型平菇Ｃ２５．经大面积推广使用获得了较好的经济效益和社会效益．

刺芹侧耳软腐病病原菌鉴定及其致病机制

从广东省梅州市丰顺县工厂化生产刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)的软腐病样品中分离纯化病原菌,对其进行致病性测定、理化特征分析及分子鉴定,并通过分析病原菌对刺芹侧耳菌丝生长和防御酶活性等的影响,研究软腐病的致病机制。结果表明:分离得到假单胞菌(Pseudomonas sp.)和北京泛菌(Pantoea beijingensis),在实验范围内,病原菌J2和F1在pH为6.0、8.0和6.0、7.0时生长速度较快;温度为24、28℃时J2的生长速度较快,F1在温度为24℃时生长速度较快。J2的生长速度总体上随着NaCl质量浓度的升高而下降;F1的生长速度在NaCl质量浓度低于2.0%时与对照差异不显著,之后生长速度呈下降趋势。两种病原菌均能分泌几丁质酶和纤维素酶,其菌体和代谢物均可抑制刺芹侧耳菌丝生长,导致菌丝形态异常。与正常子实体相比,病原菌侵染的子实体内过氧化氢酶(catalase,CAT)活性在初期(0.5 d)较高;过氧化物酶(peroxidase,POD)活性在前期(1.5 d)较高,后期(2 d和3 d)降低;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性则在1~2.5 d显著降低(P<0.05),推测这两种病原菌通过破坏细胞壁和影响主要防御酶活性侵染刺芹侧耳。

平菇主要虫害防治技术研究

通过野外调查和实验室研究,查清了河北省危害平菇的11种害虫种类、分布与危害情况,其中椭圆食粉螨的危害在国内为初次发现;对尖眼菌蚊、菇瘿蚊、椭圆食粉螨等三种主要害虫的生物学特性、形态特征及采用10多种药剂杀灭效果等方面进行了较系统研究,提出了综合防治措施,经在河北省推广应用,取得了明显效益.根据对尖眼菌蚊的生物特性观察,提出利用北方冬季O℃以下低温处理培养料、菌块消灭平菇害虫,以及利用气味、颜色诱螨物杀灭粉螨等方法,取得了较新资料.

三种侧耳漆酶在烷基咪唑类离子液体中催化特性的研究

漆酶在纸浆漂白、纤维改性、废纸脱墨、废水氯代酚降解等方面有广阔的应用前景,使用离子液体/水混合溶剂可以提高漆酶催化不溶性底物合成或降解的效率,但同时会造成酶的活力下降。作者从红平菇、榆黄菇和糙皮侧耳菌糠中分离得到漆酶并研究了它们在烷基咪唑类离子液体中的催化特性。结果表明,红平菇、榆黄菇和糙皮侧耳漆酶在三种离子液体中均受到抑制作用。几种溶剂的抑制作用排序如下:乙醇<丙酮<1-乙基-3-甲基咪唑硫酸乙酯盐([EMIM]EtOSO_3)<1-丁基-3-甲基咪唑磷酸二丁酯([BMIM]DBP)<1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐([EMIM]Ac)。动力学分析表示,离子液体[EMIM]EtOSO_3与底物2,2'-连氮-二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)对酶分子活性位点发生了竞争性结合,因此推测,漆酶在离子液体中的表观活力与初始酶用量无关,增加ABTS浓度有利于提高反应速率和酶的利用效率。

侧耳属种间有性杂交研究

本试验对阿魏蘑和香平菇(本实验室培育的四倍体侧耳)进行种间有性杂交获得成功,在F_2代中出现广泛的遗传分离,说明种间有性杂交可作为食用菌育种的有效手段。试验还探讨了阿魏蘑的起源问题。

等离子技术在弗氏链霉菌和侧耳属诱变选育中的应用

在室温常压条件下利用等离子射流对抗生素生产菌种弗氏链霉菌和侧耳属进行诱变，通过对菌落观察和死亡率、变异率、发酵能力的筛选统计，确定针对该两种微生物诱变的最佳照射时间分别为240—270s和25—30S，并分别从中筛选出高于出发株10．4％和9．6％的菌株。本实验可为菌种的诱变选育提供参考。

NTG对侧耳的诱变效应

采用正交试验设计以菌落直径为指标研究了NTG对侧耳8405的诱变效应.实验结果表明:当NTG的最终浓度为300μg/mL,处理前孢子先培养14h,于24℃黑暗条件下处理40min时,突变率和正变率高,变异幅度大.

L-肾上腺素对侧耳的生理效应

以侧耳(Pleurotus SP.)8405为实验菌株,研究了 L-肾上腺素对菌丝生长、子实体形成及多酚氧化酶、纤维素酶和呼吸强度的影响.实验结果表明:当培养基中 L-肾上腺素的浓度为5.5×10^(-7)～5.5×10^(-5)mol/L 时,侧耳8405菌丝生长快、生物学效率高,原基形成早,子实体数目和鲜重增加.当浓度为5.5×10^(-4)mol/L 时,对菌丝生长和子实体形成则有抑制作用.L-肾上腺素促进侧耳生长发育的效应同胞外多酚氧化酶、纤维素酶和呼吸强度之间有一定的联系.

侧耳属真菌胞内多糖提取条件及抗氧化活性的研究

本文以杏鲍菇、白灵菇、姬菇为实验菌株,通过单因子试验、正交试验得出了杏鲍菇、白灵菇、姬菇胞内多糖最佳提取条件并初步分析比较了三种菌株的抗氧化能力。三种侧耳属真菌胞内多糖的最佳提取条件分别为:杏鲍菇在超声波处理时间为20min、提取温度为80℃、提取时间为2.5h和乙醇浓度为90%条件下,多糖得率为7.5±0.3%;白灵菇、姬菇在超声波处理时间为25min、提取温度为85℃、提取时间为2h和乙醇浓度为90%条件下,多糖得率分别为7.1±0.4%和8.2±0.5%。在最佳提取优化条件下,杏鲍菇、白灵菇、姬菇胞内多糖有明显抑制O2-、OH和DPPH自由基的作用,并具有一定的还原力。

氨基寡糖对侧耳菌株发酵液中漆酶活性的影响

研究了在液体木屑培养基中添加0.005、0.01、0.015 mg/mL浓度的氨基寡糖对3株侧耳发酵液中漆酶活性的影响,结果表明:氨基寡糖对侧耳漆酶的产生有明显地促进作用,3株侧耳菌株在氨基寡糖液体木屑培养基中均有漆酶活性,酶活随发酵时间和氨基寡糖浓度而变化,冀微961糙皮侧耳在0.01 mg/mL氨基寡糖浓度,第10 d时漆酶酶活达到最高238 U/mL,比对照增加49.7%。漆酶参与木质素的降解,对木腐菌的生长有着直接的影响,氨基寡糖通过促进漆酶活性,影响侧耳的生长发育。