长角血蜱Pmy蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化

为提高长角血蜱副肌球蛋白(Pmy)的表达量,本研究对所在课题组前期构建的含有p ET-32(a+)-pmy的E.coli BL21载体的表达条件进行优化,考察温度、时间和异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)浓度对Pmy表达量的影响.SDS-PAGE电泳结果表明,最优表达条件为:诱导温度37℃,诱导时间8 h,IPTG浓度0.4 mmol/L.

基于氮氧自由基配体的锰和钴双核配合物的分子结构和磁性

合成了2个基于氮氧自由基配体且结构类似的双核配位化合物,其分子式分别为[Mn_(2)(hfac)_(4)(NIT-mo-pmy)_(2)](1)和[Co_(2)(hfac)_(4)(NIT-mo-pmy)_(2)](2),其中hfac=六氟乙酰丙酮,NIT-mo-pmy=2-(2-甲氧基-5’-嘧啶基)-4,4,5,5-四甲基咪唑啉基-3-氧-1-氧自由基。2个配合物均属于三斜晶系P1空间群,其双核配位单元进一步构筑为中心对称的平行四边形分子阵列。变温磁化率的测试表明,在2个配合物中,中心离子和氮氧自由基单元之间存在反铁磁交换作用。借助构效关系研究,分析了磁作用强度的差异。通过适当近似的磁化学模型,对Mn(Ⅱ)配合物的磁性行为进行了定量拟合,并与相关化合物磁作用强度进行了比对、分析。

旋毛虫副肌球蛋白缓解慢性炎症性肠病的初步研究

目的本研究旨在观察旋毛虫副肌球蛋白(Trichinella spiralis paramyosin,Ts Pmy)对于慢性结肠炎的影响。方法首先制备Ts Pmy蛋白,并通过初始T细胞诱导的方法在Rag1 KO小鼠中构建慢性结肠炎模型。随后将Rag1 KO小鼠采用随机数字表法分为3组:接受CD4^(+)Foxp3^(-)CD45RB hi T细胞与Ts Pmy共处理的小鼠组、接受CD4^(+)Foxp3^(-)CD45RB hi T细胞与磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)共处理的对照组,以及未经处理的Rag1 KO小鼠组。对小鼠进行腹腔内Ts Pmy预处理,并对其临床症状以及结肠缩短情况进行评估。通过苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)法观察结肠组织以评估炎症情况。此外,通过流式细胞术分析结肠固有层免疫细胞中的辅助性T细胞1(T helper 1 cell,Th1)和辅助性T细胞17(T helper 17 cell,Th17)细胞比例,以及肠道中特异性CD103^(+)耐受性树突状细胞(dendritic cell,DC)的比例。结果Ts Pmy能显著减轻小鼠的体质量下降、疾病活动指数、结肠组织的病理损害以及结肠固有层中炎性Th1和Th17细胞的比例,同时能增加耐受性CD103^(+)DC的丰度。结论Ts Pmy可能通过增加CD103^(+)DC的数量并减少Th1和Th17细胞的比例来缓解慢性结肠炎,显示其具有作为潜在治疗慢性结肠炎的候选分子的可能性。

亚铵法制浆废水处理技术研究

在比较系统研究的基础上，针对亚铵法制浆废水的特点，提出了亚铵法制浆废水处理的方案，试图为解决我国草浆造纸废水的污染问题提供一种行之有效的方法。高效絮凝剂（ＰＭＹ）具有脱色、去除悬浮物和降低水中ＣＯＤ的优异功能，它成本低、使用方便、易于保存和管理，挥发性有机物可以在曝气过程中被氧化或吹脱，难挥发的或不溶有机污染物可以在絮凝中除去，ＣＯＤ进一步降低。

长角血蜱副肌球蛋白的原核表达、纯化与免疫原性分析

为进一步研究长角血蜱副肌球蛋白(paramyosin,Pmy)的免疫保护力,将本实验室构建的重组质粒pET-32(a+)-pmy转入E.coli BL21进行原核表达。SDS-PAGE电泳结果表明,在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)浓度为0.5mmol/L、诱导温度为25℃、诱导时间为6h条件下,重组蛋白(rPmy)在菌液上清中的表达量最高,并通过亲和层析法纯化得到rPmy。Western blotting结果表明rPmy具有免疫原性。研究结果可为今后抗蜱疫苗的研制提供理论依据。