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水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白在水稻原生质体内的表达
被引量:
1
1
作者
张洁
陈晓敏
+3 位作者
吴锦鸿
朱重庆
丁新伦
吴祖建
《中国水稻科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期232-237,共6页
【目的】水稻齿叶矮缩病毒(Rice ragged stunt virus,RRSV)Pns10蛋白在介体昆虫细胞内可形成类似病毒原质(viroplasm)的内含体,是RRSV侵染介体所必需。然而Pns10蛋白在水稻寄主中是否具有类似功能及其表达情况如何未见报道。【方法】利...
【目的】水稻齿叶矮缩病毒(Rice ragged stunt virus,RRSV)Pns10蛋白在介体昆虫细胞内可形成类似病毒原质(viroplasm)的内含体,是RRSV侵染介体所必需。然而Pns10蛋白在水稻寄主中是否具有类似功能及其表达情况如何未见报道。【方法】利用大肠杆菌系统表达Pns10蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体;通过水稻原生质体病毒侵染体系,利用免疫荧光技术分析Pns10蛋白在水稻原生质体内的分布情况,利用实时定量PCR技术和Western blot技术分别检测Pns10 RNA和Pns10蛋白在水稻原生质体内的积累情况。【结果】将Pns10基因克隆到Gateway系统原核表达载体p DEST17中,IPTG诱导表达成功后,制备融合蛋白抗血清。Western blot检测显示,该抗血清可检测感病水稻叶片中的Pns10蛋白。病毒侵染水稻原生质体后,Pns10蛋白可形成类似病毒原质的内含体;Pns10 RNA在病毒接种8 h后开始积累,24 h后达到最大值,随后开始下降;Pns10蛋白在24 h后开始表达,之后维持较高水平,60 h后略有下降。【结论】成功获得了Pns10抗血清;Pns10在水稻原生质体内成功表达,可形成类似病毒原质的内含体,并且Pns10 RNA的表达先于其蛋白的表达。
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关键词
水稻齿叶矮缩病毒
水稻原生质体
Pns10抗体
pns10rna
Pns10蛋白
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职称材料
题名
水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白在水稻原生质体内的表达
被引量:
1
1
作者
张洁
陈晓敏
吴锦鸿
朱重庆
丁新伦
吴祖建
机构
福建农林大学植物病毒研究所/福建省植物病毒学重点实验室
出处
《中国水稻科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期232-237,共6页
基金
高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20133515120004)
国家自然科学基金资助项目(31301640)
福建教育厅科技项目(JA13103)
文摘
【目的】水稻齿叶矮缩病毒(Rice ragged stunt virus,RRSV)Pns10蛋白在介体昆虫细胞内可形成类似病毒原质(viroplasm)的内含体,是RRSV侵染介体所必需。然而Pns10蛋白在水稻寄主中是否具有类似功能及其表达情况如何未见报道。【方法】利用大肠杆菌系统表达Pns10蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体;通过水稻原生质体病毒侵染体系,利用免疫荧光技术分析Pns10蛋白在水稻原生质体内的分布情况,利用实时定量PCR技术和Western blot技术分别检测Pns10 RNA和Pns10蛋白在水稻原生质体内的积累情况。【结果】将Pns10基因克隆到Gateway系统原核表达载体p DEST17中,IPTG诱导表达成功后,制备融合蛋白抗血清。Western blot检测显示,该抗血清可检测感病水稻叶片中的Pns10蛋白。病毒侵染水稻原生质体后,Pns10蛋白可形成类似病毒原质的内含体;Pns10 RNA在病毒接种8 h后开始积累,24 h后达到最大值,随后开始下降;Pns10蛋白在24 h后开始表达,之后维持较高水平,60 h后略有下降。【结论】成功获得了Pns10抗血清;Pns10在水稻原生质体内成功表达,可形成类似病毒原质的内含体,并且Pns10 RNA的表达先于其蛋白的表达。
关键词
水稻齿叶矮缩病毒
水稻原生质体
Pns10抗体
pns10rna
Pns10蛋白
Keywords
Rice ragged stunt virus
rice protoplast
Pns10 antibody
Pns10 RNA
Pns10 protein
分类号
S435.11 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白在水稻原生质体内的表达
张洁
陈晓敏
吴锦鸿
朱重庆
丁新伦
吴祖建
《中国水稻科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
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