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水稻矮缩病毒Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达
被引量:
2
1
作者
张洁
宛柏杰
+3 位作者
尚鹏祥
丁新伦
杜振国
吴祖建
《中国水稻科学》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期118-123,共6页
【目的】为明确水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus, RDV) Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达动态,【方法】利用PEG介导的病毒侵染原生质体体系,通过免疫荧光和电镜技术分析Pns6、P8蛋白以及病毒粒体在水稻原生质体中的定位;同时...
【目的】为明确水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus, RDV) Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达动态,【方法】利用PEG介导的病毒侵染原生质体体系,通过免疫荧光和电镜技术分析Pns6、P8蛋白以及病毒粒体在水稻原生质体中的定位;同时,通过Western blot和实时荧光定量PCR分析Pns6和P8蛋白及其RNA在水稻原生质体中的积累量。【结果】病毒接种水稻原生质体48h后,Pns6蛋白在细胞质中可以形成类似于病毒原质(viroplasm)的点状内含体,P8蛋白也大量的表达。同时,病毒粒体在水稻原生质体中也形成内含体状的结构。病毒接种水稻原生质体12 h后,均可检测到Pns6和P8蛋白的表达,并且在36 h后达到最高值。病毒接种水稻原生质体后,Pns6 RNA在24 h时表达量达到最高,P8 RNA在36 h时表达量达到最高。【结论】RDV侵染水稻原生质体后,Pns6和P8蛋白均有表达,并且病毒也可能通过形成病毒原质来完成病毒在寄主细胞的复制和装配。
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关键词
水稻矮缩病毒
水稻原生质体
pns6蛋白
P8
蛋白
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职称材料
水稻矮缩病毒非结构蛋白Pns6和外壳蛋白P8多克隆抗体的制备及其应用
被引量:
1
2
作者
宛柏杰
林文武
+3 位作者
吴锦鸿
陈晓敏
吴祖建
张洁
《福建农林大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2016年第1期42-47,共6页
利用RT-PCR的方法从感染水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV)的水稻中克隆该病毒的运动蛋白基因S6和外壳蛋白基因S8,通过Gateway系统进行原核表达,获得表达载体p DEST17-Pns6和p DEST17-P8,将表达载体转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导表...
利用RT-PCR的方法从感染水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV)的水稻中克隆该病毒的运动蛋白基因S6和外壳蛋白基因S8,通过Gateway系统进行原核表达,获得表达载体p DEST17-Pns6和p DEST17-P8,将表达载体转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导表达后获得分子质量约为59和46 ku含HIS标签的融合蛋白.以诱导表达的目的蛋白为抗原,免疫注射新西兰大白兔制备多克隆抗体.结果表明,Western blot检测制备的Pns6和P8抗体可特异性检测RDV,间接ELISA测定Pns6和P8抗体的效价均约为6 400倍,并建立了可靠、灵敏、特异的Dot-blot ELISA方法检测RDV.以上研究表明,RDV运动蛋白和外壳蛋白抗体均可应用于该病毒在田间的大规模调查和检测.
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关键词
水稻矮缩病毒
非结构
蛋白
pns
6
外壳
蛋白
P8
多克隆抗体
DOT-BLOT
ELISA
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职称材料
题名
水稻矮缩病毒Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达
被引量:
2
1
作者
张洁
宛柏杰
尚鹏祥
丁新伦
杜振国
吴祖建
机构
福建农林大学植物病毒研究所/福建省植物病毒学重点实验室/闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室
江苏沿海地区农业科学研究所
出处
《中国水稻科学》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期118-123,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(31672005)
福建农林大学科技创新专项(CXZX2017324
CXZX2016132)
文摘
【目的】为明确水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus, RDV) Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达动态,【方法】利用PEG介导的病毒侵染原生质体体系,通过免疫荧光和电镜技术分析Pns6、P8蛋白以及病毒粒体在水稻原生质体中的定位;同时,通过Western blot和实时荧光定量PCR分析Pns6和P8蛋白及其RNA在水稻原生质体中的积累量。【结果】病毒接种水稻原生质体48h后,Pns6蛋白在细胞质中可以形成类似于病毒原质(viroplasm)的点状内含体,P8蛋白也大量的表达。同时,病毒粒体在水稻原生质体中也形成内含体状的结构。病毒接种水稻原生质体12 h后,均可检测到Pns6和P8蛋白的表达,并且在36 h后达到最高值。病毒接种水稻原生质体后,Pns6 RNA在24 h时表达量达到最高,P8 RNA在36 h时表达量达到最高。【结论】RDV侵染水稻原生质体后,Pns6和P8蛋白均有表达,并且病毒也可能通过形成病毒原质来完成病毒在寄主细胞的复制和装配。
关键词
水稻矮缩病毒
水稻原生质体
pns6蛋白
P8
蛋白
Keywords
Rice dwarf virus
rice protoplast
pns
6
protein
P8 protein
分类号
S435.111.49 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
S511.034 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
水稻矮缩病毒非结构蛋白Pns6和外壳蛋白P8多克隆抗体的制备及其应用
被引量:
1
2
作者
宛柏杰
林文武
吴锦鸿
陈晓敏
吴祖建
张洁
机构
福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室
出处
《福建农林大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2016年第1期42-47,共6页
基金
高等学校博士学科点专项科研基金(新教师类)(20133515120004)
国家自然科学基金(31301640)
福建省教育厅科技项目(JA13103)
文摘
利用RT-PCR的方法从感染水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV)的水稻中克隆该病毒的运动蛋白基因S6和外壳蛋白基因S8,通过Gateway系统进行原核表达,获得表达载体p DEST17-Pns6和p DEST17-P8,将表达载体转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导表达后获得分子质量约为59和46 ku含HIS标签的融合蛋白.以诱导表达的目的蛋白为抗原,免疫注射新西兰大白兔制备多克隆抗体.结果表明,Western blot检测制备的Pns6和P8抗体可特异性检测RDV,间接ELISA测定Pns6和P8抗体的效价均约为6 400倍,并建立了可靠、灵敏、特异的Dot-blot ELISA方法检测RDV.以上研究表明,RDV运动蛋白和外壳蛋白抗体均可应用于该病毒在田间的大规模调查和检测.
关键词
水稻矮缩病毒
非结构
蛋白
pns
6
外壳
蛋白
P8
多克隆抗体
DOT-BLOT
ELISA
Keywords
Rice dwarf virus
non-structural protein
pns
6
coat protein P8
polyclonal antibodies
Dot-blot ELISA
分类号
S435.111.49 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水稻矮缩病毒Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达
张洁
宛柏杰
尚鹏祥
丁新伦
杜振国
吴祖建
《中国水稻科学》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
下载PDF
职称材料
2
水稻矮缩病毒非结构蛋白Pns6和外壳蛋白P8多克隆抗体的制备及其应用
宛柏杰
林文武
吴锦鸿
陈晓敏
吴祖建
张洁
《福建农林大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2016
1
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