现场PCR诊断箱POCKIT试剂联合应用技术快速检测炭疽芽孢杆菌的实验研究

目的建立一种灵敏度高、特异性强、操作简单、检测结果准确并对检测环境要求低等优点的炭疽芽孢杆菌基因检测方法。方法利用Taqman探针原理,设计炭疽杆菌质粒PXO1和PXO2基因引物,采用冷冻干燥工艺将PCR检测试剂全部组分制备成冻干粉,使用时加入缓冲液进行溶解,与PCR诊断箱中配置便携PCR联合使用,可实现现场快速检测的目的。结果使用Taqman探针原理的PCR诊断箱和POCKIT试剂组合应用是目前最适合的现场检测方法,在敏感性和准确性方面一致,且操作简便。结论本研究建立的现场PCR诊断箱POCKIT试剂联合应用技术,方法可特异、灵敏地检测出患者的涂抹样本、环境样本。胶体金检测及荧光定量PCR检测结果充分证明此技术在现场快速检测炭疽疫情中具有重要意义。