糖尿病大鼠肾组织podocin mRNA和蛋白的表达

糖尿病肾病是严重的糖尿病并发症之一。定位于裂孔膜的podocin分子由足细胞分泌产生，是裂孔膜铰链样结构的重要成分，对维持足突结构和裂孔膜的完整性起关键作用。裂孔膜蛋内podocin表达改变可能与糖尿病性蛋白尿的发生发展有密切关系^[1]。本研究通过观察podocin mRNA和蛋白在链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型肾组织的表达情况，探讨糖尿病肾病足细胞的损伤机制。

突变NPHS2基因在真核细胞中的表达

目的通过在真核细胞中表达突变基因,探讨NPHS2基因突变对podocin分子表达和分布的影响。方法构建分别含有野生型NPHS2编码区cDNA、467-468insT和503G>A突变NPHS2编码区cDNA的表达载体,分别转染人胚肾细胞(HEK293)后用抗podocin氨基端多克隆抗体(P21)和抗podocin羧基端多克隆抗体(P35)进行免疫荧光染色,在共聚焦显微镜下观察podocin在细胞内的分布。结果与野生型NPHS2编码的podocin分子的表达和分布比较,抗podocin氨基端抗体染色显示,两个突变NPHS2表达的podocin与野生型的一样均为阳性;抗podocin羧基端抗体染色显示503G>A突变NPHS2表达的podocin与野生型的一样为阳性,而467-468insT突变NPHS2表达的podocin呈阴性。野生型NPHS2表达的podocin不但分布在胞核的周围,而且主要在细胞膜上呈连续性的线状分布,而两个突变NPHS2表达的podocin主要分布在胞核周围。结论NPHS2的467-468insT突变将严重影响podocin的分子结构和在细胞内的正常分布。NPHS2的503G>A突变即使没有严重影响podocin的结构,但仍然导致podocin不能正常到达细胞膜,因而不能行使正常功能。podocin的正常功能不但有赖于分子结构也有赖于分子分布。