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人跨损伤合成DNA聚合酶Polη的研究进展 被引量:1
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作者 胡恭华 庄志雄 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期808-811,共4页
跨损伤合成是细胞内的一种DNA损伤耐受机制,它分为无误性和易误性两种。hPolη是一种跨损伤合成DNA聚合酶。与复制性DNA聚合酶相比,它具有低保真性和低持续合成性;此外,它还具有“超距作用”和反转录活性。hPolη具有介导无误性及易误... 跨损伤合成是细胞内的一种DNA损伤耐受机制,它分为无误性和易误性两种。hPolη是一种跨损伤合成DNA聚合酶。与复制性DNA聚合酶相比,它具有低保真性和低持续合成性;此外,它还具有“超距作用”和反转录活性。hPolη具有介导无误性及易误性跨损伤合成的能力,并且与免疫球蛋白可变区基因的体细胞超突变有关。 展开更多
关键词 跨损伤合成 polη 体细胞超突变
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POLΗ基因反义阻断细胞系的建立及POLΗ在MNNG引起的非定标性突变中的作用 被引量:1
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作者 罗月球 杨军 余应年 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2003年第5期398-402,共5页
目的 :通过建立 POLΗ反义阻断细胞系 FL - POLΗ-,研究 POLΗ的功能。方法 :将 POLΗ基因的 14 73~ 2 131片段反向克隆到哺乳动物细胞表达载体 p MAMneo- amp-中 ,将重组表达质粒转染 FL细胞 ,G4 18筛选 ,获得 POLΗ基因被表达阻断的... 目的 :通过建立 POLΗ反义阻断细胞系 FL - POLΗ-,研究 POLΗ的功能。方法 :将 POLΗ基因的 14 73~ 2 131片段反向克隆到哺乳动物细胞表达载体 p MAMneo- amp-中 ,将重组表达质粒转染 FL细胞 ,G4 18筛选 ,获得 POLΗ基因被表达阻断的哺乳动物细胞系 FL - POLΗ-。采用穿梭质粒 p Z189介导的突变实验 ,观察在 POLΗ基因表达被阻断细胞系中进行复制时的自发突变频率和 MNNG引起的诱发突变频率。结果 :成功建立细胞系 FL -POLΗ-。穿梭质粒 p Z189在 FL- POLΗ-细胞中复制后 ,其 Sup F t RNA基因的自发突变频率为 13.5× 10 -4,而对照细胞 FL和 FL- M分别为 4 .9× 10 -4和 3.7× 10 -4。同时 ,质粒在接触过 MNNG的 FL- POLΗ-细胞中复制 ,其 Sup Ft RNA基因的非定标性突变频率不发生。结论 :POLΗ在维持哺乳类细胞的遗传稳定性中起重要作用 ,且参与哺乳动物细胞中 MNNG引起的非定标性突变。 展开更多
关键词 polH基因 N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍 非定标性突变 DNA突变分析
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皮革的可塑性 POLENE首尔专卖店
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作者 Minwoo(Ian)Yang +3 位作者 Sunho Shin Hyevin Park Yongjoon Choi(摄影) 秋落(编译) 《室内设计与装修》 2025年第1期90-95,共6页
继巴黎、纽约和东京之后,专注皮革设计的小众品牌Pol$ne于日前在韩国首尔开设首家品牌旗舰店,也是全球第4间专卖店。这个深受时尚迷和年轻一代欢迎的法国小众品牌,将店址选在逛街胜地之一的江南新沙洞,打造了两层的品牌旗舰店。除了延... 继巴黎、纽约和东京之后,专注皮革设计的小众品牌Pol$ne于日前在韩国首尔开设首家品牌旗舰店,也是全球第4间专卖店。这个深受时尚迷和年轻一代欢迎的法国小众品牌,将店址选在逛街胜地之一的江南新沙洞,打造了两层的品牌旗舰店。除了延续品牌形象,引进品牌经典包款和人气新作,受到韩国打卡文化的影响,Pol$ne为首尔旗舰店精心规划出拍照空间,凡是走进店内的人,都会忍不住想要拿起手机留下回忆。 展开更多
关键词 小众品牌 旗舰店 皮革 品牌形象 专卖店 pol
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基于POL的智慧园区全光网络建设研究
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作者 陈晨 《科技创新与应用》 2024年第23期132-136,共5页
通过对以太全光网和无源光局域网POL 2种组网技术的对比分析,提出园区全光网络建设方案,详细说明其设计及部署方式,并进一步介绍微管微缆气吹施工工艺在园区全光网络建设中的应用。
关键词 智慧园区 全光网络 无源光局域网 pol 微管微缆
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全光网络POL智能化系统施工技术
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作者 陈永生 李孟桓 +1 位作者 王中涛 杨斌 《安装》 2024年第7期45-47,共3页
本文通过天府机场国际健康服务中心项目智能化系统施工及调试,总结形成了一套成熟的全光网络POL智能化系统施工工艺,提高了系统运行可靠性,为今后同类型的智能化项目施工提供了一定的参考借鉴。
关键词 全光网络pol 线缆终接 调试
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甘蓝型油菜Pol CMS育性恢复基因的PCR标记(英文) 被引量:10
6
作者 王俊霞 杨光圣 +1 位作者 傅廷栋 孟金陵 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第11期1012-1017,共6页
采用恢、保回交群体和集团混合分析法,筛选了1040个10—mer随机引物,找到了与甘蓝型油菜波里马细胞质雄性不育系(Pol CMS)育性恢复基因(Rfp)连锁的两个RAPD标记S1019720和S1036810。它们... 采用恢、保回交群体和集团混合分析法,筛选了1040个10—mer随机引物,找到了与甘蓝型油菜波里马细胞质雄性不育系(Pol CMS)育性恢复基因(Rfp)连锁的两个RAPD标记S1019720和S1036810。它们位于Rfp的一侧,与该基因的遗传图距分别为 5.8cM和 12.3cM。随后,克隆并测序这 2个多态性片段,根据其 2端序列设计了2对20~24-mer的特异引物,它们在138株的回交群体中PCR分离分析的结果与原来各自的RAPD标记相同。这2个SCAR标记将被用于分子标记辅助选育Pol 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 pol CMS 恢复基因 RAPD SCAR
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参数激励Duffing-Van der Pol振子的动力学响应及反馈控制 被引量:10
7
作者 李欣业 陈予恕 +1 位作者 吴志强 宋涛 《应用数学和力学》 CSCD 北大核心 2006年第12期1387-1396,共10页
研究了Duffing_VanderPol振子的主参数共振响应及其时滞反馈控制问题·依平均法和对时滞反馈控制项Taylor展开的截断得到的平均方程表明,除参数激励的幅值和频率外,零解的稳定性只与原方程中线性项的系数和线性反馈有关,但周期解的... 研究了Duffing_VanderPol振子的主参数共振响应及其时滞反馈控制问题·依平均法和对时滞反馈控制项Taylor展开的截断得到的平均方程表明,除参数激励的幅值和频率外,零解的稳定性只与原方程中线性项的系数和线性反馈有关,但周期解的稳定性还与原方程中非线性项的系数和非线性反馈有关·通过调整反馈增益和时滞,可以使不稳定的零解变得稳定·非零周期解可能通过鞍结分岔和Hopf分岔失去稳定性,但选择合适的反馈增益和时滞,可以避免鞍结分岔和Hopf分岔的发生·数值仿真的结果验证了理论分析的正确性· 展开更多
关键词 Duffing-Van der pol振子 主参数共振 时滞 反馈控制 分岔
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多频激励Duffing-van der Pol系统振动状态研究 被引量:7
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作者 赵志宏 张明 +1 位作者 杨绍普 邢海军 《振动与冲击》 EI CSCD 北大核心 2013年第19期76-79,共4页
通过多尺度法对Duffing-van der Pol系统的幅频响应特性进行研究,多频激励改变了单频激励条件下系统的振动状态。与Duffing系统相比,Duffing-van der Pol系统不但使系统主共振曲线发生了偏移,而且系统的振幅也发生了变化。经过分析得出... 通过多尺度法对Duffing-van der Pol系统的幅频响应特性进行研究,多频激励改变了单频激励条件下系统的振动状态。与Duffing系统相比,Duffing-van der Pol系统不但使系统主共振曲线发生了偏移,而且系统的振幅也发生了变化。经过分析得出了Duffing-van der Pol系统主共振幅频特性曲线的偏移和振幅的改变与加入的多频激励的幅度和频率有关。利用Matlab对Duffing-van der Pol进行了数值仿真,仿真结果得出多频外激励改变了原有单频激励的振动状态,并且随着多频激励的幅值和频率的改变,系统的振动状态出现了一定规律的变化。对比研究了解析分析与数值仿真结果,得出的结论比较一致。 展开更多
关键词 Duffing-van der pol系统 非线性 多频 分岔 LYAPUNOV指数
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不同倍性不结球白菜Pol CMS及保持系生理生化特性比较 被引量:10
9
作者 汤伟华 张蜀宁 +1 位作者 孔艳娥 张丽丽 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期80-84,共5页
对二、四倍体不结球白菜Pol CMS及其保持系花蕾和薹叶进行生理生化特性比较分析,结果表明:不育系花蕾中可溶性蛋白、可溶性糖、脯氨酸含量均显著低于保持系,且各指标在不育系中四倍体低于二倍体,而在保持系中则四倍体高于二倍体;不育系... 对二、四倍体不结球白菜Pol CMS及其保持系花蕾和薹叶进行生理生化特性比较分析,结果表明:不育系花蕾中可溶性蛋白、可溶性糖、脯氨酸含量均显著低于保持系,且各指标在不育系中四倍体低于二倍体,而在保持系中则四倍体高于二倍体;不育系MDA含量,POD、SOD、CAT活性均高于保持系,不育系中四倍体均高于二倍体,而保持系中四倍体均低于二倍体;薹叶中MDA含量,POD、SOD、CAT活性均为不育系高于保持系,不育系中四倍体高于二倍体;POD、EST同工酶显示不育系与保持系间均具特异酶带,但不同倍性间并无差异。 展开更多
关键词 不结球白菜 pol胞质雄性不育 同源四倍体 生理生化特征 同工酶分析
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不结球白菜Pol胞质雄性不育系及其保持系的部分生理生化指标分析 被引量:9
10
作者 邓晓辉 张蜀宁 +1 位作者 侯喜林 杨寅桂 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期522-525,共4页
对不结球白菜Pol胞质雄性不育系及其保持系的可溶性糖、可溶性蛋白质和脯氨酸含量及其超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化进行研究,结果表明:不育系不同时期的蕾和花中可溶性糖、可溶性蛋白质和脯氨酸含... 对不结球白菜Pol胞质雄性不育系及其保持系的可溶性糖、可溶性蛋白质和脯氨酸含量及其超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化进行研究,结果表明:不育系不同时期的蕾和花中可溶性糖、可溶性蛋白质和脯氨酸含量均低于其保持系;SOD、POD和CAT活性则是不育系高于其保持系;POD同工酶电泳分析发现不育系和保持系也存在差异,这说明上述物质含量和酶活性变化可能与不结球白菜Pol胞质雄性不育有关。 展开更多
关键词 不结球白菜 pol胞质雄性不育 可溶性糖 可溶性蛋白质 酶活性
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不结球白菜同源四倍体Pol CMS及其保持系花药发育的解剖学研究 被引量:12
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作者 汤伟华 张蜀宁 孔艳娥 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期704-708,共5页
以秋水仙素人工诱变获得的不结球白菜同源四倍体Pol CMS及其保持系为材料,采用石蜡切片法研究其花药发育过程。结果显示:四倍体Pol CMS与保持系花药发育差异明显,不育系花药发育受阻于孢原细胞分化期,不形成药室,属无花粉囊型。极... 以秋水仙素人工诱变获得的不结球白菜同源四倍体Pol CMS及其保持系为材料,采用石蜡切片法研究其花药发育过程。结果显示:四倍体Pol CMS与保持系花药发育差异明显,不育系花药发育受阻于孢原细胞分化期,不形成药室,属无花粉囊型。极少数温敏型花药能产生1~2个花粉囊,但四分体时期绒毡层提早退化,导致成熟小孢子数目减少。四倍体保持系花药发育过程与二倍体基本一致,同一时期的可育小孢子四倍体比二倍体大,二倍体花粉粒都为3个萌发孔,而四倍体多为4个萌发孔。四倍体保持系同一花粉囊中花粉粒发育有不同步现象,花粉粒败育频率比二倍体高。研究表明,不结球白菜同源四倍体Pol CMS比其二倍体Pol CMS不育更彻底,更具廊用性。 展开更多
关键词 同源四倍体 不结球白菜 pol雄性不育 花药发育
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不结球白菜Pol胞质雄性不育系和保持系蕾期基因的差异表达 被引量:4
12
作者 张昌伟 张蜀宁 +2 位作者 侯喜林 齐莉 孙菲菲 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1545-1550,共6页
以不结球白菜Pol胞质雄性不育系及其保持系为材料,利用cDNA-AFLP技术分析它们蕾期基因的差异表达,以获得与胞质不育相关的差异表达基因.结果共得到7条在GenBank中有同源性的差异表达片段,5条存在于不育系中,2条存在于保持系中.序列分析... 以不结球白菜Pol胞质雄性不育系及其保持系为材料,利用cDNA-AFLP技术分析它们蕾期基因的差异表达,以获得与胞质不育相关的差异表达基因.结果共得到7条在GenBank中有同源性的差异表达片段,5条存在于不育系中,2条存在于保持系中.序列分析发现,在不育系花蕾克隆到的5条差异片段,分别与芥菜胞质雄性不育系线粒体orf108和atpA、拟南芥焦磷酸酶基因、拟南芥的锚定蛋白家族基因、甘蓝型油菜中的水胁迫蛋白、大白菜叶绿体基因片段有较高同源性;在保持系花蕾克隆到的2条差异片段分别与拟南芥未知蛋白基因有较高同源性.采用实时定量PCR验证其中5条差异片段在不育系和保持系花蕾中的表达水平,结果表明bcA19T15、bcA7T9在不育系中特异表达,bcA6T9、bcA19T8、bcA12T19在不育中表达比保持系中略强. 展开更多
关键词 不结球白菜 pol CMS CDNA-AFLP 差异表达 实时定量PCR
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DNA polβ启动子和CMV启动子调控的p53基因在涎腺腺样囊性癌细胞中表达的比较 被引量:4
13
作者 阎炳智 王洁 +3 位作者 张波 董福生 侯琳 王旭 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期22-25,28,共5页
目的检测DNA polβ启动子在涎腺腺样囊性癌细胞中的活性,探讨DNA polβ启动子对外源性野生型p53基因表达的影响。方法荧光素酶法测定DNA polβ启动子在涎腺腺样囊性癌细胞中的活性。构建携带人野生型p53基因的真核表达载体,以脂质体法... 目的检测DNA polβ启动子在涎腺腺样囊性癌细胞中的活性,探讨DNA polβ启动子对外源性野生型p53基因表达的影响。方法荧光素酶法测定DNA polβ启动子在涎腺腺样囊性癌细胞中的活性。构建携带人野生型p53基因的真核表达载体,以脂质体法转染涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测p53基因mRNA的表达。博莱霉素、H2O2及紫外线刺激转染细胞,采用RT-PCR及Western blot法比较DNA损伤下DNA polβ启动子和CMV启动子调控的p53基因及P53蛋白的表达。结果荧光素酶活性分析显示,涎腺腺样囊性癌细胞中DNApolβ启动子活性增高。p53基因的导入使其在涎腺腺样囊性癌细胞中表达增强,DNA polβ启动子组较CMV启动子组更为明显。DNA损伤后,DNA polβ启动子组的p53基因和P53蛋白的表达较CMV启动子组增强(P<0.05)。结论在涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞中,DNA polβ启动子的活性增高,DNA polβ启动子能够增强外源性野生型p53基因在涎腺腺样囊性癌细胞中的表达。 展开更多
关键词 涎腺腺样囊性癌 DNA polβ P53基因 DNA损伤 基因转染
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Duffing-van der Pol振子的时滞反馈控制研究 被引量:5
14
作者 李欣业 张振民 +1 位作者 张华彪 高仕赵 《振动与冲击》 EI CSCD 北大核心 2010年第10期118-121,共4页
研究了Duffing-van der Pol振子在一类时滞反馈控制下零解的稳定性问题以及极限环的振幅和稳定性问题。依平均法和对时滞反馈控制项泰劳展开的截断得到的平均方程表明,零解的稳定性除与原方程中线性项的系数有关外,只与线性反馈有关,与... 研究了Duffing-van der Pol振子在一类时滞反馈控制下零解的稳定性问题以及极限环的振幅和稳定性问题。依平均法和对时滞反馈控制项泰劳展开的截断得到的平均方程表明,零解的稳定性除与原方程中线性项的系数有关外,只与线性反馈有关,与非线性反馈无关。通过调整线性反馈的增益和时滞,可以使不稳定的零解变得稳定。零解发生Hopf分岔导致的周期解的振幅除与原方程中非线性项的系数有关外,与线性反馈和非线性反馈均有关。通过调整反馈增益和时滞,不仅可以控制极限环的振幅,还可以抑制极限环的产生。此外,根据平均方程还容易发现反馈时滞对系统动力学行为的影响具有周期性。数值仿真的结果验证了理论分析的正确性。 展开更多
关键词 Duffing-van der pol振子 反馈控制 时滞 稳定性
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简谐与随机噪声联合激励下Van der Pol-Duffing系统的响应 被引量:3
15
作者 戎海武 王向东 +2 位作者 孟光 徐伟 方同 《振动工程学报》 EI CSCD 北大核心 2003年第4期502-505,共4页
研究了 Van der Pol-Duffing振子在简谐与随机噪声联合激励下的响应问题。用参数变换法使方程出现小参数 ,用多尺度法分离系统的快变项 ,讨论系统的阻尼项、非线性项和随机项等参数对系统响应的影响。理论分析和数值模拟表明 ,当随机激... 研究了 Van der Pol-Duffing振子在简谐与随机噪声联合激励下的响应问题。用参数变换法使方程出现小参数 ,用多尺度法分离系统的快变项 ,讨论系统的阻尼项、非线性项和随机项等参数对系统响应的影响。理论分析和数值模拟表明 ,当随机激励强度增大时 ,系统的响应可从一个极限环变为一个扩散的极限环 ;在一定的条件下 ,系统可有两个稳定的稳态解及随机跳跃现象。 展开更多
关键词 Van der pol—Duffing振子 简谐运动 随机噪声激励 参数变换法 多尺度法 非线性振动
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Van der Pol振荡器的模拟仿真 被引量:3
16
作者 唐志凯 刘隆和 +2 位作者 姜永华 郝媛 杜文超 《现代雷达》 CSCD 北大核心 2007年第5期89-92,104,共5页
利用运算放大器和乘法器进行电路设计,对早期利用电子管实现的Van der Pol振荡器利用现代集成电路加以实现。文中还利用OrCAD PSpice对设计的电路进行了模拟,得到了Van der Pol振荡器输出信号的波形图,并利用文本文件作为OrCAD PSpice和... 利用运算放大器和乘法器进行电路设计,对早期利用电子管实现的Van der Pol振荡器利用现代集成电路加以实现。文中还利用OrCAD PSpice对设计的电路进行了模拟,得到了Van der Pol振荡器输出信号的波形图,并利用文本文件作为OrCAD PSpice和Matlab之间的接口,将OrCAD PSpice仿真得到的波形在Matlab中进行处理,得到Van der Pol振荡器两个状态变量的相图,并以此说明了Van der Pol振荡器所具有的丰富的非线性动力学特性。 展开更多
关键词 电路设计 VAN der pol振荡器 OrCAD仿真 MATLAB仿真 非线性动力学
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宽带噪声激励下含分数阶导数的van der Pol-Duffing振子的可靠性 被引量:4
17
作者 陈林聪 李海锋 +1 位作者 梅真 朱位秋 《西南交通大学学报》 EI CSCD 北大核心 2014年第1期45-51,共7页
为了研究宽带噪声激励下含分数阶导数的van der Pol-Duffing振子的首次穿越问题,首先应用广义谐波平衡技术,将分数阶导数表示的回复力分解为等效拟线性阻尼力和拟线性回复力,获得不含分数阶导数的等效非线性随机系统;然后,应用随机平均... 为了研究宽带噪声激励下含分数阶导数的van der Pol-Duffing振子的首次穿越问题,首先应用广义谐波平衡技术,将分数阶导数表示的回复力分解为等效拟线性阻尼力和拟线性回复力,获得不含分数阶导数的等效非线性随机系统;然后,应用随机平均法将等效非线性随机系统近似为一维扩散过程,再建立和求解相应的后向Kolmogorov方程,获得系统的条件可靠性函数和平均首次穿越时间计算式;最后,通过实验结果表明,所提方法与蒙特卡罗法模拟结果吻合得非常好;系统的可靠性随分数阶数的增加而提高;分数阶导数表示的回复力不能简单地当作一类特殊的阻尼力. 展开更多
关键词 分数阶导数 可靠性 随机平均法 van der pol—Duffing振子 宽带噪声
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Pol■与移行细胞癌发生关系的实验研究 被引量:3
18
作者 赵谦 杨劲 +7 位作者 金锡御 陈志文 宋波 曾益军 位全芳 季惠翔 李劲 周虎传 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第10期1513-1516,共4页
目的:检测DNA聚合酶■(Pol■)在膀胱肿瘤细胞株及移行细胞癌组织中的表达,探讨Pol■在移行细胞癌组织中表达的意义。方法:培养膀胱肿瘤细胞株BIU87细胞、T24细胞株,利用RT-PCR方法检测Pol■在膀胱肿瘤细胞株中的表达;收集人膀胱粘膜正... 目的:检测DNA聚合酶■(Pol■)在膀胱肿瘤细胞株及移行细胞癌组织中的表达,探讨Pol■在移行细胞癌组织中表达的意义。方法:培养膀胱肿瘤细胞株BIU87细胞、T24细胞株,利用RT-PCR方法检测Pol■在膀胱肿瘤细胞株中的表达;收集人膀胱粘膜正常组织、临床膀胱肿瘤和肾盂癌的移行细胞癌组织标本,利用RT-PCR方法检测组织标本中Pol■的表达。结果:Pol■在膀胱肿瘤细胞株中丰富表达,显著高于膀胱正常粘膜组织(P<0.01);Pol■在膀胱肿瘤及肾盂癌组织的表达显著高于膀胱正常粘膜组织的表达(P<0.01),且与移行细胞癌的分级相关。结论:Pol■在移行细胞癌组织中的高表达可能与膀胱肿瘤的发生、发展相关,为进一步研究Pol■在膀胱肿瘤中表达的意义打下基础。 展开更多
关键词 DNA聚合酶 polι 移行细胞癌
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HIV—Pol基因的套式PCR检测 被引量:8
19
作者 王斌 邵一鸣 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期357-363,共7页
根据HIV—1 MN株Pol基因序列设计了套式聚合酶链反应(Nestedpolymerasechainreaction,nPCR)引物,将外周血单核细胞DNA粗提物先以一对外侧引物扩增,其产物再以一对内侧引物扩增,两... 根据HIV—1 MN株Pol基因序列设计了套式聚合酶链反应(Nestedpolymerasechainreaction,nPCR)引物,将外周血单核细胞DNA粗提物先以一对外侧引物扩增,其产物再以一对内侧引物扩增,两次扩增后的产物直接经电泳判定结果。nPCR在保持常规PCR特异性的同时,其敏感性较单对引物PCR高100倍以上,可检出约10个分子的目的基因片段。探讨了HIV—1 Pol基因套式PCR检测在HIV—1感染的早期诊断、感染确认及病毒分离中的应用,表明本方法是一种敏感性及特异性俱佳,结果判断简单的基因检测技术,有应用前景。 展开更多
关键词 艾滋病毒 pol基因 聚合酶链反应 感染
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靶向pol基因siRNA抑制J亚型禽白血病病毒复制的研究 被引量:2
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作者 张在平 马学恩 +2 位作者 杨海彦 田进 孟庆文 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期344-347,共4页
为筛选能够有效抑制J亚型禽白血病病毒(ALV-J)复制的siRNA,本研究根据ALV的pol基因保守序列设计合成5对shRNA序列,并将其分别克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体中,构建siRNA表达重组质粒,分别为pcDNA-sh-pol711、pcDNA-sh-pol814、pcDN... 为筛选能够有效抑制J亚型禽白血病病毒(ALV-J)复制的siRNA,本研究根据ALV的pol基因保守序列设计合成5对shRNA序列,并将其分别克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体中,构建siRNA表达重组质粒,分别为pcDNA-sh-pol711、pcDNA-sh-pol814、pcDNA-sh-pol1016、pcDNA-sh-pol1915和pcDNA-sh-pol2516。将重组质粒分别转染DF-1细胞6h后,以100TCID50的ALV-J感染细胞,并利用IFA、westernblot和real-timePCR方法评价其对ALV-J复制的抑制效果。IFA和westernblot检测结果表明:其中pcDNA-sh-pol711、pcDNA-sh-pol814和pcDNA-sh-pol2516可以有效抑制病毒囊膜蛋白的表达。Real-timePCR结果显示:与阴性对照和空载体对照相比,这3种siRNA在mRNA水平对ALV-J的抑制率达29%~86%。本研究在细胞水平上筛选的siRNAs可作为候选siRNAs,为抗鸡ALV-J的研究奠定基础。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 pol基因 SIRNA
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