不结球白菜Pol胞质雄性不育系及其保持系的部分生理生化指标分析

对不结球白菜Pol胞质雄性不育系及其保持系的可溶性糖、可溶性蛋白质和脯氨酸含量及其超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化进行研究,结果表明:不育系不同时期的蕾和花中可溶性糖、可溶性蛋白质和脯氨酸含量均低于其保持系;SOD、POD和CAT活性则是不育系高于其保持系;POD同工酶电泳分析发现不育系和保持系也存在差异,这说明上述物质含量和酶活性变化可能与不结球白菜Pol胞质雄性不育有关。

不结球白菜Pol胞质雄性不育花酵母双杂交cDNA文库的构建及筛选

[目的]构建不结球白菜Pol胞质雄性不育花酵母双杂交cDNA文库,筛选与细胞色素C还原酶铁硫蛋白(BcRISP1)互作的蛋白。[方法]从不结球白菜Pol胞质雄性不育花中提取总RNA,通过长距离PCR,扩增双链cDNA(ds cDNA)。采用SMART建库技术构建不结球白菜Pol胞质雄性不育花全长cDNA文库。利用BcRISP1基因的开放阅读框,构建诱饵表达载体pGBK T-7-BcRISP1转化AH109酵母菌,根据酵母双杂交技术筛选出与BcRISP1互作的片段,并进行质粒共转化验证。[结果]经检测,文库的转化率为每μg p GADT7-Rec 1.80×106转化子,文库滴度为1.21×107CFU·m L-1,重组率为94%,成功构建可以用于酵母双杂交的cDNA文库。酵母双杂交技术获得了与BcRISP1互作的阳性克隆,试验表明诱饵载体表达产物对酵母无毒性作用,质粒共转化试验初步验证了BcRISP1与CYP81G、PIP2蛋白的互作关系。[结论]cDNA文库的成功构建为后期互作蛋白的顺利筛选奠定了基础,利用酵母双杂交技术成功获得与BcRISP1互作的蛋白CYP81G和PIP2,为明确不结球白菜Pol胞质雄性不育相关基因的信号传递通路提供更多的依据,以期从分子水平上进一步阐明不结球白菜Pol胞质雄性不育的机制。

大白菜波里马胞质雄性不育系A7的选育及应用

以不结球白菜波里马(Pol)胞质雄性不育系为不育源,用大白菜自交系作转育父本,通过杂交,多代回交及不育性选择,育成具有波里马不育细胞质的大白菜胞质雄性不育系A7,不育株率100%,不育度99%以上,具有不育性稳定、对温度敏感性极低、生长发育正常、农艺性状优良、配合力高等特点,并用于一代杂种的配制。

不结球白菜同源四倍体Pol CMS及其保持系花药发育的解剖学研究

以秋水仙素人工诱变获得的不结球白菜同源四倍体Pol CMS及其保持系为材料，采用石蜡切片法研究其花药发育过程。结果显示：四倍体Pol CMS与保持系花药发育差异明显，不育系花药发育受阻于孢原细胞分化期，不形成药室，属无花粉囊型。极少数温敏型花药能产生1～2个花粉囊，但四分体时期绒毡层提早退化，导致成熟小孢子数目减少。四倍体保持系花药发育过程与二倍体基本一致，同一时期的可育小孢子四倍体比二倍体大，二倍体花粉粒都为3个萌发孔，而四倍体多为4个萌发孔。四倍体保持系同一花粉囊中花粉粒发育有不同步现象，花粉粒败育频率比二倍体高。研究表明，不结球白菜同源四倍体Pol CMS比其二倍体Pol CMS不育更彻底，更具廊用性。

不同倍性不结球白菜Pol CMS及保持系生理生化特性比较

对二、四倍体不结球白菜Pol CMS及其保持系花蕾和薹叶进行生理生化特性比较分析,结果表明:不育系花蕾中可溶性蛋白、可溶性糖、脯氨酸含量均显著低于保持系,且各指标在不育系中四倍体低于二倍体,而在保持系中则四倍体高于二倍体;不育系MDA含量,POD、SOD、CAT活性均高于保持系,不育系中四倍体均高于二倍体,而保持系中四倍体均低于二倍体;薹叶中MDA含量,POD、SOD、CAT活性均为不育系高于保持系,不育系中四倍体高于二倍体;POD、EST同工酶显示不育系与保持系间均具特异酶带,但不同倍性间并无差异。

小孢子培养技术纯化与选育Pol TCMS不育两用系

利用甘蓝型油菜游离小孢子培养技术，获得了4个甘蓝型Pol细胞质温敏雄性不育两用系（Pol TCMS）的DH系，说明通过小孢子培养技术纯化选育Pol TCMS不育两用系是可行的。研究结果表明：Pol TCMS不育两用系的最佳取样时期为第一朵花开放前的4—7d；在NLN培养基中补充0．05mg／L的细胞分裂素6-BA可以显著提高出胚频率；游离小孢子首先在35℃高温条件下热激48h，然后转入到22℃恒温箱中连续暗培养效果最佳，其出胚频率显著高于其他3种温度组合；胚状体在8—10％条件下低温诱导两星期，能够显著提高其再生频率。

抗热白梗小白菜菜秧新品种暑热的选育

以Polima胞质雄性不育系P44为母本,自交系矮脚白为父本配制抗热白梗小白菜新品种暑热。试验结果表明,该品种丰产(夏季菜秧产量1500 kg/667 m^2)、生长迅速(16~18 d即可采收)、抗热、抗病性强(病毒病和炭疽病)。