口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)的稳定性研究

目的评价细胞工厂工艺连续生产的口服脊髓灰质炎减毒活疫苗（人二倍体细胞）的稳定性。方法疫苗在-20℃放置24个月,检测病毒滴度、外观、抗生素残留量、无菌性,及对病毒血清型进行鉴别;2~8℃放置12个月检测疫苗稳定性;室温放置7周、37℃放置7 d检测加速热稳定性并冻融的稳定性。结果该疫苗-20℃可贮存24个月以上,2~8℃有效期可延长至12个月,且冻融不会影响疫苗的稳定性。结论疫苗质量稳定,各项检测结果均符合《中华人民共和国药典》三部（2010版）及企业《口服脊髓灰质炎减毒活疫苗（人二倍体细胞）注册标准》。

口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)的安全性与免疫原性研究

目的评价口服脊髓灰质炎(脊灰)减毒活疫苗(人二倍体细胞)[Oral Poliomyelitis Attenuated Live Vaccine(Human Diploid Cell),OPV(HDC)],在≥2月龄儿童中的安全性和免疫原性。方法采用随机、盲态、对照的原则进行设计,1200名2～5月龄婴儿随机接种OPV(HDC)和对照疫苗,用抗脊灰病毒中和抗体试验检测免疫前、后抗体。结果接种3剂OPV(HDC)后全身反应轻微,全程免疫后1个月,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体免疫成功率分别为98.28%、95.32%、95.34%;免疫后易感人群的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体几何平均滴度,分别为1∶1243.72、1∶234.38、1∶273.10。结论 OPV(HDC)在≥2月龄儿童中具有良好的安全性和免疫原性。

细胞工厂在制备口服脊髓灰质炎减毒活疫苗中的应用

目的 采用细胞工厂替代转瓶培养Sabin株脊髓灰质炎病毒，制备脊髓灰质炎减毒活疫苗。方法用细胞工厂和15L转瓶分别培养人二倍体细胞（2BS），扩增至36代后，分别接种0.20MOI的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎工作代毒种，待细胞病变达100％时收获病毒液，加入保护剂（4.5mol／L氯化镁溶液），制备单价疫苗，分别将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个型别的单价疫苗按照病毒数10：1：6的比例混匀，制备成三价疫苗半成品，分装入1ml西林瓶中（每瓶为10人份剂量），即为疫苗成品。采用微量滴定法测定疫苗原液及成品的病毒滴度，同时进行其他各项检定，并考察疫苗成品的稳定性。结果采用相同的感染复数接种病毒，细胞工厂制备的3个型别疫苗原液的病毒滴度均高于转瓶制备的疫苗原液，Ⅰ型平均滴度高0.17 log10 CCID50／ml，Ⅱ型平均滴度高0.33 log10 CCID50／ml，Ⅲ型平均滴度高0.27 log10 CCID50／ml；细胞工厂制备的疫苗成品3个型别的病毒滴度均高于转瓶制备的疫苗，三价疫苗的平均滴度均高于6.24 log10 CCID50／ml，符合国内外标准；疫苗原液及疫苗成品的其他各项检定均合格；细胞工厂制备的3批疫苗成品于37℃放置2d，疫苗的总病毒含量不低于6.24 log10 CCID50／0.1ml，且病毒滴度下降未超过0.5 log10 CCID50／0.1ml，于2～8℃放置9个月，疫苗的总病毒含量仍不低于6.24 log10 CCID50／0.1ml，均符合WHO的标准要求。结论利用细胞工厂替代转瓶培养2BS细胞制备脊髓灰质炎减毒活疫苗，可获得高于转瓶培养3个型别疫苗的滴度，且工艺稳定，质量可控，可用于规模化脊髓灰质炎减毒活疫苗的生产。