龟足（Pollicipes mitella）的胚胎发育

本文详细描述了龟足（Ｐｏｌｌｉｃｉｐｅｓｍｉｔｅｌｌａｌｉｎｎａｅｕｓ１７５８）从受精卵至孵化成无节幼虫的发育过程。卵细胞的两次成熟分裂是在受精后才先后完成，卵裂为螺旋形卵裂，若水温为２９～３１℃，从受精至孵化约需８～１５天。

拉萨裂腹鱼胚胎适宜孵化水温研究

为探索拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni)胚胎适宜孵化水温,提高胚胎受精率和孵化率,降低初孵仔鱼畸形率,设置5℃、9℃、12℃、14℃、16℃、18℃、20℃、22℃共8个温度梯度进行拉萨裂腹鱼鱼卵孵化实验,统计各温度下的胚胎发育速度、鱼卵受精率和孵化率、初孵仔鱼畸形率及形体指标。结果显示,拉萨裂腹鱼胚胎卵裂期发育最快,到囊胚期、原肠期、器官分化期及出膜期,每个发育时期积累时间逐渐增长;随温度的升高,胚胎发育时间缩短,发育速度加快。各温度条件下,胚胎发育时期与孵化时间均呈幂函数关系,孵化积温随温度升高呈现逐渐降低的趋势。水温9~18℃的鱼卵受精率较高,均超过90%;水温12~16℃的孵化率较高,均超过95%;水温9~16℃的鱼苗畸形率较低,均低于4%。初孵仔鱼全长与孵化温度呈二次多项式函数关系;不同水温的初孵仔鱼体高没有显著性差异,但卵黄囊体积先升高、后降低、再升高。研究表明,适当提高孵化水温能缩短胚胎孵化周期,但水温过高会影响胚胎孵化率,增加初孵仔鱼畸形率,影响仔鱼对营养物质的吸收利用以及器官发育分化。综合考虑胚胎孵化周期、孵化率、初孵仔鱼畸形率及形体指标,拉萨裂腹鱼胚胎适宜孵化水温为12~16℃。

温度对龟足胚胎和幼虫发育的影响

在室内海水盐度为27～28的条件下，观察了18，21，24，27，30，33，36C等7个温度对龟足（Pollicipes mitella）胚胎发育时间、孵化率和幼虫生长、存活率和变态率的影响．实验结果表明：在18～36℃之间，龟足的胚胎均能正常发育并且孵化，其发育时间随温度的升高而缩短，18℃的发育时间最长为12d，而30～36℃所需的发育时间最短，仅需5．5d．实验结束时（20d）温度对累积孵化率的影响不明显，但在胚胎发育过程中（14d之前）低温（18，21℃）对累积孵化率的影响明显，其他温度（24～36℃）对胚胎孵化率的影响不显著．结合胚胎发育时间和孵化率两个指标，龟足胚胎发育的最适温度为24～33℃．根据存活率和变态率，龟足幼虫生长发育的温度上限和下限分别是36℃和18℃，在21～33℃之间，龟足幼虫可以不同程度地生长和变态，幼虫发育的最适温度范围是24～30℃．

卵泡发育速度对胚胎发育及体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探讨促排卵过程中卵泡发育速度与卵母细胞质量间的相关性。方法154名患者共159个体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期,按卵泡发育速度(v,mm/d)的分布分为A组(v<1)、B组(1≤v≤1.59)、C组(v>1.59),比较各组卵母细胞成熟度指标。结果A、B、C3组卵细胞成熟率分别为89.56%、92.45%和94.76%,优质胚胎率分别为40.85%、36.37%和37.11%,妊娠率分别为42.1%、43.1%和35.3%,卵母细胞成熟率C组高于A、B组,优质胚胎率A组高于B、C两组,但组间差异均无显著性(P>0.05),而妊娠率A、B两组明显高于C组,且B、C两组间差异有显著性(P<0.05)。结论促排卵过程中卵泡的生长速度应控制在一个最佳的范围内,因其与卵子质量和后期优质胚胎率及妊娠结局密切相关,且卵泡发育速度又可作为衡量卵泡发育潜能的一项重要指标。

男性年龄对常规体外受精-胚胎移植结局的影响

目的:研究男性年龄对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的影响。方法:按男方年龄将2008至2010年接受常规IVF-ET的夫妇170对分为3组,年龄<35岁组60例、35～39岁组77例,≥40岁组33例,观察男方年龄对IVF的受精率、卵裂率、优质胚胎率、着床率、妊娠率及流产率的影响。结果:3组精液量[(3.10±1.22)ml vs(2.84±1.05)ml vs(2.80±0.79)ml]、精子浓度[(54.23±26.07)×106/ml vs(60.27±24.80)×106/ml vs(60.21±27.42)×106/ml]、活动率[(53.93±13.25)%vs(56.10±16.58)%vs(51.82±15.45)%]相比均无显著性差异(P>0.05),≥40岁组的(a+b)级精子的百分率[(40.97±11.91)%]低于<35岁组[(48.47±11.78)%]和35～39岁组[(46.84±13.51)%],结果有显著性差异(P<0.05),≥40岁组精子正常形态[(11.76±5.97)%]与<35岁组[(15.25±6.94)%]相比,结果有显著性差异(P<0.05)。男方年龄≥40岁组的受精率(81.52%)、卵裂率(82.61%)、优质胚胎率(52.33%)、植入率(18.06%)、妊娠率(33.33%)与男方年龄<35岁组(分别为83.18%、82.68%、56.99%、22.40%、40.00%)和35～39岁组(分别为78.78%、80.66%、55.01%、21.74%、38.96%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。男方年龄≥40岁组患者的流产率(36.36%)与男方年龄<35岁组(8.33%)相比明显升高,但无统计学差异(P>0.05)。结论:男性年龄对前向运动精子百分率和精子正常形态率有一定影响,而与受精、胚胎质量、植入率、妊娠率、流产率没有明显的相关性。

同源四倍体结球甘蓝胚胎发育和结实性研究

利用Flankling荧光染色和石蜡切片技术观察了同源四倍体和二倍体结球甘蓝的授粉受精及胚胎发育过程，探讨了同源四倍体结籽率降低的原因。结果表明：四倍体结球甘蓝自交授粉后部分胚囊能够正常受精和胚胎发育，最终形成正常的种子；但与二倍体相比，四倍体雌蕊柱头上花粉萌发量相对较少，进入花粉管的胚珠数和完成受精的胚珠率明显降低；胚胎发育进程一般晚2～3d；胚乳发育无明显的细胞化阶段。因此认为导致结球甘蓝四倍体结籽率降低的主要原因是四倍体花粉在其柱头上的萌发率和胚囊正常受精率都较低所致。

5种重金属对光棘球海胆胚胎的毒性作用

采用静态毒性试验方法,在水温(21±0.5)℃、盐度32条件下,研究Zn、Hg、Cu、Pb、Cd单独暴露对光棘球海胆的精卵结合和胚胎发育的毒性作用。观察了5种重金属对光棘球海胆精子超微结构的损伤。试验结果表明,3个暴露浓度下,5种重金属均可导致光棘球海胆受精率极显著下降,胚胎延滞率和胚胎畸形率极显著上升,并呈剂量—效应关系。5种重金属对海胆精子细胞超微结构的损伤,可能是导致海胆受精率降低、胚胎延滞率和畸形率升高的原因之一。

辅助生殖技术中HBV携带者胚胎发育和IVF结局的回顾分析

【目的】探讨乙肝病毒(HBV)感染以及不同感染模式的夫妇胚胎发育情况和体外授精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)结局。【方法】回顾性分析行IVF/ICSI治疗,637个HBV感染患者周期与1 892个未感染者周期的基础参数以及临床结局,同时进一步比较不同模式HBV感染者之间的临床结局。基础参数包括女方年龄、月经第3天基础内分泌水平、不孕原因、原发还是继发不孕、不孕年限、第几次周期、卵巢刺激方案是长方案还是短方案、IVF还是ICSI。临床结局包括比较各组人群在获卵数、受精率、卵裂率、着床率、临床妊娠率、流产率方面有无差异。【结果】一方或双方感染HBV的夫妻与未感染的夫妻在基础参数方面没有显著性差异。获卵数、受精数、卵裂数、优质胚胎数、冷冻胚胎数、着床率、妊娠率以及流产率与未感染组比较没有差异(P均>0.05),不同模式的HBV感染者之间着床率、妊娠率和早期流产率均没有显著差异(P均>0.05)。【结论】HBV感染夫妇的胚胎继续发育的潜能和IVF结局与未感染者相似。不同模式的HBV感染者IVF结局相似。

不同取卵时间对兔ICSI胚胎体外发育的影响

目的探讨不同取卵时间对兔ICSI胚胎体外发育的影响。方法采用Piezo操作系统对实验兔进行辅助体外受精。结果hCG注射后14、161、8 h取卵,ICSI后的受精率分别为82.2%、75.9%和0.0%,对受精卵进行体外发育培养,桑椹胚的发育率分别为72.9%、70.0%、0.0%,囊胚的发育率分别为62.2%、53.3%、0.0%。14 h和16 h之间受精率、桑椹胚率、囊胚率差异不显著(p>0.05),但是14 h采卵比16 h要好;18 h和14 h1、6 h之间差异显著(P<0.05)。结论不同取卵时间影响实验兔的ICSI体外受精率及胚胎的体外发育率,hCG注射后14 h取卵最有利于兔ICSI胚胎的发育。

使用不同来源精子行卵胞浆内单精子注射对受精、胚胎发育及妊娠结局的影响

目的探讨使用不同来源精子行卵胞浆内单精子注射(ICSI)对受精、胚胎发育及临床妊娠结局的影响。方法回顾性分析接受ICSI治疗的703对不育夫妇的资料,根据精子来源分为正常精液组(A组)56例、少弱精子症组(B组)364例、附睾精子组(C组)187例和睾丸精子组(D组)96例。比较4组精子DNA碎片率、精子顶体完整率、正常受精率、胚胎发育参数及临床妊娠结局。结果A组与B组DNA碎片率低于C组与D组,且顶体完整率高于C组与D组(均P<0.05)。A组的正常受精率高于B组、C组与D组,且B组的正常受精率高于C组(均P<0.05)。B组的优质胚胎率、囊胚形成率和可冻囊胚形成率低于D组(均P<0.05)。4组的正常卵裂率、优质囊胚形成率、胚胎种植率、临床妊娠率、流产率、活产率、男女婴比例差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论使用不同来源精子行ICSI治疗,会导致精子DNA碎片率和顶体完整率存在差异,从而影响正常受精率;少弱精子症来源的精子可影响ICSI治疗周期胚胎发育结局。

形态正常但发育滞后的非优质胚胎移植的妊娠结局

【目的】探讨体外受精中形态正常但发育滞后的胚胎移植的妊娠结局。【方法】收集冻融胚胎移植（FET ）的755周期，根据授精后d3或d4卵裂球分裂速度分为正常组和滞后组，比较两组的复苏率、移植胚胎数、周期取消率、临床妊娠率、种植率、多胎率及流产率。【结果】滞后组胚胎复苏率、临床妊娠率、种植率、多胎率及流产率与正常组比较差异无统计学意义（P ＞0．05），但平均移植胚胎数低于发育正常组（P ＜0．05），周期取消率高于正常组（ P ＜0．05）。【结论】d3或d4形态正常但发育速度滞后的胚胎仍具有冷冻价值。

大鲵胚胎早期发育特征和受精率计算方法

探讨了大鲵（Andrias davidianus）胚胎发育过程中受精率的评判标准和计算受精率的最佳时间。对大鲵胚胎发育观察表明：发育到二细胞的胚胎均能发育到神经胚期,因此可以将二细胞胚胎期作为受精的标志;孵化温度在17-20℃时,温度对大鲵的孵化率没有影响;胚胎发育经过24 h后,有90%-95%的受精卵可发育到二细胞期。因此可以以受精后24 h的二细胞分裂数作为计算大鲵胚胎受精率的基础数据。研究结果有利于对大鲵人工繁育效果提前判断和对孵化条件及时调控处理。

胚胎发育速度对山羊体外受精胚胎发育能力的影响

研究山羊体外受精胚胎的发育速度与胚胎发育能力的关系，为进一步探讨哺乳动物体外胚胎发育能力的影响因素奠定基础。方法：观察比较在不同时间点逾越第1次卵裂和发育阻滞期的山羊体外受精胚胎的进一步发育能力。结果：山羊精卵共孵育后，在超过42h才出现卵裂的2-细胞胚胎比36h之前出现卵裂的胚胎更难越过发育阻滞期，精卵共孵育后78h以内逾越发育阻滞期的胚胎桑葚胚发育率高于84h以后逾越发育阻滞期的胚胎。结论：受精卵逾越第1次卵裂和胚胎发育阻滞期的时间对受精卵随后的发育能力有着重要的影响。

影响人类体外受精——胚胎移植成功率的某些因素分析

对137例采用hMG/hCG超排的IVF-ET的结果,分析比较了采卵时不同成熟度卵子的受精率、妊娠组与非妊娠组采卵时卵子的成熟度分布、采卵数、移植时胚胎发育阶段及移植胚胎数等差异。结果表明,采卵时成熟的卵子受精率较高,接近成熟卵子的受精率略低,未成熟卵子的受精率最低,仅达14％左右。妊娠组和非妊娠组卵子成熟度分布无显著差别(P>0.05),但妊娠组平均采卵数显著高于非妊娠组(P<0.01)。两组移植时胚胎发育阶段无显著差异(P>0.05),妊娠组可供移植胚胎数显著高于非妊娠组(P<0.01)。

异常形态精子对植入前胚胎发育和妊娠结局的影响

目的探讨异常形态精子(畸形率≥98%)对植入前胚胎发育及妊娠结局的影响。方法采用回顾性队列研究,分析2017年1~12月在唐都医院妇产科生殖医学中心行ART助孕的2419例患者临床资料,根据异常形态精子分为3组,即IVF对照组(畸形率≤96%,n=2129)、IVF实验组(畸形率≥98%,n=90)和ICSI实验组(畸形率≥98%,n=200)。比较3组间植入前受精失败率(受精率<30%)、正常受精率、可用胚胎率等胚胎发育参数和着床率、临床妊娠率、流产率及活产率等妊娠结局的差异。结果(1)胚胎发育结果:组间比较,IVF实验组受精失败率显著高于IVF对照组(P<0.05),ICSI实验组的受精失败率为0;ICSI实验组正常受精率显著高于IVF对照组和IVF实验组(P<0.05);IVF实验组可用胚胎率显著低于IVF对照组和ICSI实验组(P<0.05)。(2)妊娠结局:单因素分析结果显示,与IVF对照组、ICSI实验组相比,IVF实验组的着床率、临床妊娠率、流产发生率和活产率差异均有统计学意义(P<0.05);IVF对照组和ICSI实验组组间妊娠结局指标比较均无显著性差异(P>0.05)。(3)Logistic多因素分析显示:IVF实验组的受精失败风险显著高于IVF对照组(P=0.002),可用胚胎率、活产率显著低于IVF对照组(P=0.002);ICSI实验组的正常受精率显著高于IVF对照组(P=0.05)。结论对于活力正常、但异常形态精子率≥98%的患者,采用ICSI授精方式,能降低受精失败风险,提高正常受精率和可用胚胎率,同时提高妊娠率和活产率并降低流产发生率。

关于男性年龄对体外受精结局的影响研究

目的探讨男性年龄对常规体外受精(IVF)结局的影响。方法选取2015年5月至2018年3月邯郸市中心医院生殖医学科行体外受精(IVF)的208例患者作为研究对象。筛选输卵管梗阻因素且男性精液常规均正常的不孕患者208例,按男性年龄分为≤30岁组(n=116)、31岁~35岁组(n=64)和≥36岁组(n=28)共三组,比较各组的精液体积、精子浓度、前向运动精子比率、精子正常形态比率、DNA碎片率及IVF受精率、卵裂率、优胚率、可利用胚胎率、囊胚形成率、妊娠率、流产率等。结果研究发现≥36岁组前向运动精子比率低于≤30岁组,DNA碎片率高于≤30岁组和31岁~35岁组,囊胚形成率显著低于≤30岁组,流产率高于≤30岁组,差异具有统计学意义(P<0.05),而各组其余精液参数及IVF各项指标相比差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论男性年龄与受精率、卵裂率、优胚率、可利用胚胎率、妊娠率均无明显相关性,但随男性年龄增加,前向运动精子比率及囊胚形成率下降,DNA碎片率及流产率升高。

未成熟卵体外培养发育潜能探究

目的体外受精-胚胎移植(In vitro fertilization and embryo transplantation,IVF-ET)周期所获卵子均未成熟时,其体外培养发育潜能探究。方法 25例IVF-ET周期所获卵子均未成熟(未成熟卵149枚),通过实验室体外过夜培养所有未成熟卵子(M1期,142枚;GV期,7枚),培养成熟卵子(M11期,98枚)行体外单精子胞内注射(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后进行72h体外培养;回顾性分类统计IVF-ET周期中IVF、ICSI和Half ICSI的正常受精率、正常卵裂率和优胚率,比较它们间的差异。结果 IVF周期与Half ICSI周期中的IVF部分在受精率、正常卵裂率和优胚率均无统计学差异;ICSI周期与Half ICSI周期中的ICSI部分在受精率、正常卵裂率和优胚率均无统计学差异;所获卵子均未成熟周期与ICSI周期在受精率和优胚率有统计学差异,在正常卵裂率无统计学差异;所获卵子均未成熟周期与HalfICSI周期中的ICSI部分在受精率和优胚率有统计学差异,在正常卵裂率无统计学差异。结论所获卵子均未成熟周期的未成熟卵子经体外培养能部分成熟,并具有继续发育潜能,但其受精率和优胚率均明显低于体内成熟卵子的相应指标;且他们最终临床结局较差。

体外受精-胚胎移植患者HCG日雌二醇水平与胚胎发育情况的相关性研究

目的探讨超促排卵周期中E2水平对胚胎发育产生的影响。方法回顾分析我院2013年1月至2016年12月期间改良长方案促排卵治疗的体外受精(IVF/ICSI)患者,检测患者HCG日血清E2水平,并根据患者E2水平的四分位距将所有患者分为Q1、Q2、Q3和Q4四组。通过广义线性模型和广义估计方程分析不同E2水平与胚胎发育参数之间的关系,校正的混杂因素包括患者年龄,基础FSH,PCOS诊断,启动剂量,刺激时间,获卵数以及受精方式。结果广义线性模型显示HCG日E2水平是优胚率的独立预测因素,高E2组(Q2、Q3、Q4)与参照组(Q1)相比,优胚率显著降低(P<0.05),且E2水平越高,回归系数越大;广义估计方程分析显示高E2组(Q4)与低E2组(Q1)相比发育较快胚胎减少、发育较慢胚胎增多、Day3融合胚胎减少、0-1分胚胎增多(P<0.05)。Q3与对照组Q1相比发育较快的胚胎显著减少(P<0.05)。结论高E2水平对胚胎的发育具有不利影响,高E2水平患者的优胚率更低且胚胎发育更慢,在体外受精-胚胎移植过程中需引起重视。