聚合人脐带血血红蛋白(PolyPHb)对兔心肌缺血/再灌注损伤的保护研究

目的探讨聚合人脐带血血红蛋白(PolyPHb)对新西兰大耳白兔心肌缺血/再灌注损伤的保护效果。方法采用随机分组对照研究的方法,将30只雄性新西兰大耳白兔随机平均分为假手术组、对照组和实验组;对照组和实验组分别注射5 ml生理盐水和PolyPHb溶液(8 gHb/dl)做预处理,通过临时阻断冠脉前降支实现心肌缺血;观察缺血30 min、再灌注90 min后的心脏功能和肌钙蛋白Ⅰ释放水平。结果实验组与对照组比较,兔左室收缩压:(82.59±8.13)mmHg vs(61.39±7.92)mmHg(P<0.05);左室内压最大上升速率:(3.76±0.73)mmHg/msvs(2.23±0.89)mmHg/ms(P<0.05);左室内压最大下降速率:(-3.08±0.49)mmHg/ms vs(-1.89±0.65)mm-Hg/ms,P<0.05):左室舒张末压(9.35±1.82)mmHg vs(18.21±2.43)mmHg(P<0.01);肌钙蛋白Ⅰ释放水平:(8.71±1.90)ng/ml vs(17.83±1.72)ng/ml(P<0.05)。结论 PolyPHb预处理对兔心肌缺血/再灌注损伤具有明显保护作用。

输注聚合人胎盘血红蛋白对大鼠氧化损伤的初步研究

目的探讨输注不同浓度聚合人胎盘血红蛋白(Poly PHb)对大鼠造成的氧化损伤。方法建立动物换血模型,将50只SD大鼠随机均分为假手术组:仅做股动/静脉插管处理;氯化钠注射液(对照)组:股动/静脉插管,输注氯化钠注射液行换血实验;2%、4%及6%Poly PHb 3个实验组:股动/静脉插管,分别输注相应浓度的Poly PHb行换血实验。分别在大鼠换血前、换血70%后即刻观测平均动脉压(MAP),换血完成后即刻从大鼠股动脉取血0.5 m L/只,做动脉血血气分析,并检测各组大鼠血浆中还原型谷胱甘肽(GSH)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活力、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)浓度、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)浓度。结果 1)大鼠换血70%后,2%、4%及6%Poly PHb组与对照组相比,GSH(μmol/L)分别为33.76±14.33、47.98±21.88、39.73±15.54及10.25±5.70(P<0.01);SOD(U/m L)分别为238.07±27.39、355.73±35.42、405.26±45.01及138.46±57.16(P<0.01);T-AOC(U/m L)分别为20.50±7.87、32.65±4.38、38.03±4.50及5.40±2.22(P<0.01)。2)大鼠换血70%后,2%、4%及6%Poly PHb组与对照组相比,MDA浓度(nmol/m L)随着Poly PHb浓度的增高而增高:45.08±4.12、54.39±3.16、58.52±6.33及2.85±0.59(P<0.01)。3)大鼠换血70%后,2%、4%及6%Poly PHb组与对照组相比,大鼠血浆8-OHDG浓度(nmol/m L)未发生明显变化:2.54!0.90、2.76!0.99、2.79!0.82及2.26!0.42(P>0.05)。结论 Poly PHb对大鼠造成脂质过氧化损伤,且氧化损伤程度随着Poly PHb浓度的增高而加重,但并未对大鼠DNA造成损伤。

聚合人脐带血血红蛋白预处理对肝缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨聚合人脐带血血红蛋白(PolyPHb)预处理对SD大鼠肝脏缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法采用随机分组对照研究的方法,将30只成年雄性SD大鼠平均分为假手术(Sham)组、I/R组和PolyPHb预处理(PolyPHb)组;采用大鼠70%肝I/R损伤模型,缺血前I/R组和PolyPHb组动物分别静脉推注生理盐水和PolyPHb(0.3 gHb/kg)预处理,然后缺血60 min,再灌注3 h。检测术前及术后丙氨酸转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,并采集术后肝脏组织标本行HE染色和TUNEL染色。结果 PolyPHb组、I/R组的肝酶释放ALT、AST分别为(350.9±80.8)U/L vs(830.5±85.7)U/L(P<0.01)和(446.1±97.10)U/L vs(1 096.2±135.6)U/L(P<0.01),肝细胞凋亡发生率分别为(15.62±8.58)%vs(35.21±9.62)%(P<0.01)。结论 PolyPHb预处理对大鼠肝脏I/R损伤具有明显的保护作用。

维生素C对血红蛋白类血液代用品抗氧化效果的研究

目的探讨聚合人胎盘血红蛋白溶液（PolyPHb）保存过程中加入Vc的抗氧化效果及最适条件。方法以Vc为抗氧化剂,以固定变量的方法逐个研究溶液中Vc的加入量、pH、温度等因素对Vc抑制高铁血红蛋白（MetHb）生成的影响,并考察Vc在控制MetHb的同时对PolyPHb的结构、载氧活性及主要理化质量指标的影响。结果Vc的最适加入量3≤Vc/Hb（摩尔比）≤8,pH7.5～8.0,在4℃保存抗氧化效果更好;特征光谱扫描、圆二色谱分析和养结合特性曲线分析：Vc作用前后PolyPHb的功能基团、高级结构和氧结合特性无明显区别。结论 Vc能有效抑制MetHb生成,并且对PolyPHb的结构和功能没有影响,可作为血红蛋白类血液代用品保存中的抗氧化剂。

冻干工艺对聚合人胎盘血红蛋白质量影响的研究

探讨冻干处理对聚合人胎盘血红蛋白质量的影响。设计适宜的实验条件对聚合人胎盘血红蛋白(PolyPHb)溶液进行冻干处理后,检测冻干前后的血红蛋白浓度、高铁血红蛋白(MetHb)含量、氧结合量、游离三价铁离子(Fe3+)含量、pH值、紫外线(UV)光谱扫描、平均分子量及其分布、圆二色谱扫描、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、氧饱和曲线等指标的变化以及冻干品的外观、残余含水量、复溶时间等是否符合要求。结果表明:5批冻干处理样品的各项检测指标在冻干前后均无显著变化。这说明冻干处理对PolyPHb溶液理化性质及生物活性无显著影响,因此可以将PolyPHb溶液按本工艺进行冻干保存。