荧光探针法研究阳离子多聚物基因载体Polybrene与DNA的相互作用

目的:用荧光探针法研究海美溴铵(PB)和DNA之间的相互作用。方法:将一定量的PB溶液逐渐加入到DNA/溴化乙锭(EB)复合物的水溶液中,在535nm处激发,测定595nm的荧光强度,观察体系荧光强度随PB浓度变化而发生的改变。用同样的方法观察PB对Hoe-DNA和4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)-DNA体系荧光强度的影响,Hoe的激发和发射波长分别设置为350nm和460nm,DAPI为340nm和450nm。通过荧光Scatchard分析法获得PB对DNA的结合常数。结果:随着PB浓度的增加,EB与DNA的结合减弱。通过对PB存在下EB-DNA体系的荧光分析,获得了PB与DNA之间的结合常数为1.8×105/mol。PB的加入大大提高了Hoe-DNA体系的荧光强度,同时Hoe的最大发射波长由最初的490nm蓝移至460nm。Hoe-DNA体系和DAPI-DNA体系的荧光强度均随着聚合物单体的浓度与DNA磷酸基团的浓度比值(N∶P比值)的增加而增加,并且在N∶P比值等于或接近1.0时达到最大。结论:DNA与PB之间复合物的形成减弱了DNA与嵌入剂的结合,但却能增强DNA和沟区结合探针之间的相互作用。提示PB与DNA的结合可能特异性地影响了DNA的二级结构。

聚阳离子海镁溴铵与DNA之间相互作用的光谱分析

本文用紫外光谱、显微傅立叶变换红外光谱和圆二色光谱对聚阳离子海美溴铵(PB)和DNA之间的相互作用进行研究。以溴化乙锭作为与DNA结合的荧光探针,考察PB对其结合体系的影响。荧光分析结果显示,PB与DNA的相互作用可能对DNA二级结构的构型产生影响。IR光谱表明,PB通过磷酸基团和DNA碱基与DNA发生相互作用,DNA/PB复合物的形成引起DNA二级结构的构型变化,这一点也在CD光谱分析中得到验证。

分子光谱法研究新型抗肿瘤前药双(β-二酮)Ti(Ⅳ)与DNA相互作用

在生理酸度(pH=7.4)下,采用紫外及荧光等分子光谱法研究了自制的双(β-二酮)Ti(Ⅳ)新型抗肿瘤前药与DNA之间的相互作用,考察了前药和溴化乙锭与鱼精DNA结合的竞争性.研究结果表明:DNA通过静态猝灭作用机制猝灭前药的荧光,并测得其在298K和308K时的猝灭常数(Kq)分别为8.590 3×1011和7.192 2×1011 L·mol-1·s-1,结合常数(Kd)分别为5.583 9×104和4.798 1×104 L·mol-1,结合位点数(n)为1.16和0.97;DNA的存在使前药的紫外吸收光谱发生减色效应且吸收波长产生红移;前药分子可插入DNA中置换出于DNA结合的溴化乙锭.这些结果说明前药分子以嵌插方式与DNA进行结合.

羧甲基壳聚糖-Co(Ⅱ)配合物与鲱鱼精DNA的相互作用

目的研究了羧甲基壳聚糖-Co(Ⅱ)配合物与鲱鱼精DNA之间的作用方式。方法采用循环伏安法和光谱法研究了羧甲基壳聚糖-Co(Ⅱ)配合物与鲱鱼精DNA之间的作用机制。结果 (1)羧甲基壳聚糖-Co(Ⅱ)的存在导致Fe(CN)63-/4-探针分子氧化还原峰电流下降,峰值电位正移,显示羧甲基壳聚糖-Co(Ⅱ)和Fe(CN)63-/4-与DNA之间存在竞争性作用。(2)随着DNA的不断加入,羧甲基壳聚糖-Co(Ⅱ)的特征吸收峰强度逐渐降低,峰位红移;同时,中性红的加入导致羧甲基壳聚糖-Co(Ⅱ)/DNA体系的特征吸收峰发生增色效应、峰位红移并伴有等吸收点出现,表明羧甲基壳聚糖-Co(Ⅱ)、DNA与中性红三者存在新的共平衡体系,中性红对羧甲基壳聚糖-Co(Ⅱ)与DNA的作用有竞争抑制作用。结论羧甲基壳聚糖-Co(Ⅱ)能够以嵌插方式与鲱鱼精DNA发生相互作用。